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猪链球菌2型菌毛骨架蛋白编码基因SSU2101敲除突变株的构建及其生物学功能被引量：3: 2010年; 利用同源重组基因敲除方法构建猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype2,S.suis2)中国强毒株05ZYH33菌毛骨架蛋白(Backbone protein,BP)编码基因SSU2101敲除突变株。采用引物特异性PCR分析、Southern杂交及RT-PCR等方法鉴定,证实成功构建了BP基因缺失突变株。生物学特性显示,突变株的菌落形态、溶血活性以及染色特性方面与野生株之间均无明显差异。小鼠致病性试验结果显示,突变株的毒力比野生株显著减弱。研究结果提示菌毛在S.suis2感染致病过程中起重要作用,为系统研究S.suis2菌毛分子装配机制及其生物学功能奠定了基础。; 秦跃红王长军陈红娜潘秀珍唐家琪; 关键词：猪链球菌2型基因敲除

组氨酸三聚体蛋白在2型猪链球菌的定位被引量：3: 2009年; 目的研究组氨酸三聚体蛋白(histidine triad protein,Htp)在2型猪链球菌(Streptococcus suis 2,S.suis 2)05ZYH33中的定位,以及sortase A(srtA)基因缺失对该蛋白表达的影响。方法通过生物软件分析Htp氨基酸序列的分子特征;以纯化的Htp重组蛋白为免疫原,免疫新西兰兔,获得兔抗Htp抗血清;利用western blotting和ELISA检测该抗体的特异性和效价;以抗Htp抗体为工具通过流式细胞术验证Htp在菌体表面的定位,并比较05ZYH33和srtA基因敲除突变株△srtA菌体表面Htp的表达量。结果生物软件预测发现Htp存在信号肽和跨膜序列,具备表面蛋白的特征;流式细胞分析发现Htp定位于S.suis 2表面;△srtA菌体表面Htp的量明显少于野生型菌株。结论本研究明确了Htp在S.suis 2菌体表面的定位并发现srtA基因敲除后细菌表面的Htp有所减少,为进一步研究Htp在猪链球菌致病过程中发挥的功能及其调控机制奠定了基础。; 邵珠卿潘秀珍韩明月李先富秦跃红王长军唐家琪; 关键词：流式细胞术 SORTASE

猪链球菌2型srtBCD菌毛岛SSU2099基因的克隆表达与免疫学特性被引量：4: 2010年; 通过同源性比较及生物信息学分析,发现猪链球菌2型srtBCD菌毛岛上菌毛辅助亚基编码基因SSU2099,PCR扩增目的片段,克隆入表达载体pET32a中原核表达,亲和层析法纯化重组蛋白。ELISA结果显示重组蛋白能够刺激小鼠产生高效价的免疫抗体,动物保护性实验表明该蛋白具有良好的免疫保护作用。提示菌毛亚基编码基因SSU2099是重要的疫苗候选分子,进一步研究该蛋白的定位和功能对于系统阐释srtBCD菌毛岛在猪链球菌2型致病机制中的作用有重要意义。; 陈红娜王长军秦跃红潘秀珍唐家琪; 关键词：猪链球菌2型原核表达免疫保护

2型猪链球菌人源致病株07NJH06的分离和病原生物学鉴定被引量：3: 2009年; 目的系统分析鉴定南京地区脑膜炎型猪链球菌感染病人脑脊液分离株07NJH06病原生物学特性。方法采集患者脑脊液,进行细菌分离和培养,观察菌体显微形态,通过免疫凝集试验和PCR方法对分离物进行种属鉴定及毒力因子基因携带情况分析,纸片法测定菌株药物敏感性,采用小白鼠和仔猪模型评估分离菌株的致病特性。结果从病人脑脊液分离到1株革兰阳性链球菌,经免疫学、生物化学及分子生物学方法系统鉴定为2型猪链球菌(命名为07NJH06),毒力基因型为cps2J+mrp+epf+sly+gdh+fbp+srtA+,未获得含有完整毒力岛PAI89k的证据,该岛两侧边缘反向重复区靶基因以及岛内二元调控系统SalK/SalR均未检出,但针对岛内3个独立的镶嵌结构区代表基因进行扩增,其中2个结构区代表基因(05SSU0942和05SSU0965)得到特异性扩增;药敏试验显示,07NJH06株对青霉素、万古霉素等抗生素敏感,对四环素、头孢噻肟钠等抗生素耐药;动物感染试验显示,07NJH06株对小鼠和猪仔有致病性,毒力较国内暴发流行强致病株05ZYH33弱,与国际参考株毒力相当。结论07NJH06株为致病性2型猪链球菌,基本生物学特性、主要毒力基因型与既往国内暴发现场分离株相似,但不含有完整的毒力岛PAI89k基因结构,系统掌握该菌遗传信息对于阐明国内强毒株遗传进化规律有重要价值。; 王长军郑峰潘秀珍董瑞平胡丹秦跃红唐家琪; 关键词：2型猪链球菌毒力因子病原生物学

猪链球菌2型菌毛样结构蛋白SSU2101原核表达及其免疫保护性被引量：4: 2009年; 为了研究猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2,S.suis 2)05Z33株预测的菌毛样结构蛋白(Pili-like protein,PLP)SSU2101的免疫保护性作用,本试验通过PCR扩增出plp基因片段,进一步将目的基因克隆到表达载体pET32a中,IPTG诱导重组蛋白表达,亲和层析法纯化目的蛋白。Western blot分析表明该重组蛋白具有良好的免疫原性,动物试验结果证实PLP蛋白对S.suis 2强致病株感染小鼠具有显著的免疫保护作用,提示菌毛样结构蛋白SSU2101是理想的猪链球菌2型亚单位疫苗的候选分子。; 秦跃红王长军董瑞萍潘秀珍唐家琪; 关键词：猪链球菌2型免疫原性免疫保护作用

2型猪链球菌srtBCD基因簇菌毛样结构蛋白SSU2101生物学功能研究: 2型猪链球菌(Streptococcus suis serotype 2,简称S. suis 2)是一种重要的人兽共患病病原体,不仅可致猪患急性败血症、脑膜炎、关节炎、心内膜炎及急性死亡,而且可通过伤口等传播途径,导致人...; 秦跃红; 关键词：2型猪链球菌生物学功能; 文献传递

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秦跃红

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