田佳
- 作品数:16 被引量:12H指数:2
- 供职机构:华中科技大学更多>>
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- 交互式电子白板录播系统的设计与实现
- 交互式共享电子白板是网络教学十分重要的辅助教学功能模块,它作为一种交互性强、富有即视感的沟通工具被广泛使用。对网络课堂的交互式共享白板的绘画过程进行录制和回放是学生自主学习非常重要的辅助手段。传统的网络教学录制方式主要是...
- 田佳
- 关键词:交互电子白板网络教学
- 文献传递
- 大蒜新素降低鼠巨细胞病毒播散性感染小鼠病毒DNA载量研究被引量:3
- 2010年
- 目的用大蒜新素治疗鼠巨细胞病毒(murine cytomegalovirus,MCMV)播散性感染小鼠至慢性期,检测小鼠唾液腺、肝、脾和肾组织内MCMV DNA载量动态变化,在整体水平上观察大蒜新素抗MCMV的长期疗效。方法BALB/c幼鼠60只,腹腔接种MCMVSmith株建立MCMV播散性感染模型,随机分为大蒜新素治疗组和模拟治疗组各30只,接种病毒后24 h,两组分别腹腔注射大蒜新素25 mg.kg-1.d-1和0.9%氯化钠注射液0.2 mL,qd,共120 d。于治疗后1,3,7,14,28,45,60,75,90和120 d,每组随机选择小鼠3只,取唾液腺、肝、脾和肾组织,采用real time PCR法检测组织内MCMV DNA载量。结果模拟治疗组小鼠唾液腺内MCMV DNA载量最高,在治疗后14 d(感染后15 d)达高峰;肝、脾和肾内病毒DNA载量治疗后7 d达峰值;治疗28 d(感染29 d)后,各组织内病毒DNA载量明显减少,尤其是肝、脾和肾组织病毒DNA呈持续低水平(进入慢性期)。与模拟治疗组比较,大蒜新素治疗组治疗后7,14和28 d唾液腺、脾和肾内MCMVDNA载量显著降低;治疗后7和14 d肝内病毒DNA载量明显降低。进入慢性期后,两组小鼠各脏器病毒DNA载量差异无显著性。结论大蒜新素长期治疗不能完全清除CMV,但在急性感染期(病毒增殖高峰期)能显著降低脏器内病毒DNA载量。
- 刘兴楼舒赛男罗丹李亚男王慧田佳方峰
- 关键词:大蒜新素巨细胞病毒播散性DNA载量
- MCMV感染对神经干细胞Wnt信号通路下游分化相关靶基因蛋白表达的影响
- 目的:
研究MCMV对神经干细胞Wnt信号通路下游分化相关靶基因c-myc、cyclinD1、ngn-1、ngn-2蛋白表达的影响,以探讨CMV致胎脑发育异常的分子机制。
方法:
1) 小鼠神经干细胞的...
- 田佳
- 关键词:神经干细胞WNT信号通路靶基因CYCLIND1蛋白表达MCMV感染
- 文献传递
- 酵母双杂交技术筛选小鼠脑cDNA文库中鼠巨细胞病毒即刻早期蛋白M122相互作用蛋白的研究被引量:1
- 2010年
- 目的 应用酵母双杂交技术筛选小鼠脑cDNA文库中与鼠巨细胞病毒即刻早期蛋白M122相互作用的宿主因子,为进一步研究巨细胞病毒的致病机制奠定实验基础.方法将诱饵质粒pGBKT7-M122转化酵母菌AH109,Western blot检测诱饵蛋白在酵母细胞中的表达.阳性重组AH109菌株与小鼠脑cDNA文库进行配合,在色氨酸、亮氨酸、组氨酸和腺嘌呤缺陷培养基(SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade)和铺有Ⅹ-α-gal的SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade平板上进行筛选,提取阳性酵母菌质粒,转化大肠杆菌后提取质粒测序,对测序结果进行序列比对和分析.将阳性文库质粒与诱饵质粒共同转化酵母AH109感受态细胞,重新验证其在酵母中的相互作用,同时阳性文库质粒与空载体pGBKT7亦被用同样的方法转入AH109感受态细胞,以排除阳性文库质粒的自激活作用.结果筛选出与M122蛋白相互作用的21种已知基因编码的蛋白质和3种未知基因编码的蛋白,其中21种已知蛋白分别为:突触融合蛋白8(syntaxin 8,Stx8)、磷酸葡萄糖变位酶2(phosphoglucomutase 2,Pgm2)、Shaker型电压依赖性钾通道的β1亚单位(potassium voltage-gated channel,shaker-related subfamily,beta member 1,Kcnab1)、19型胶原蛋白(collagen,type ⅪⅩ,alpha 1,Col19a1)、古蛋白1(archain 1,Arcn1)、胞嘧啶核苷酸激酶(cytidylate kinase,Cmpk)、热休克蛋白DnaJ同系物A亚家族成员1[DnaJ(Hsp40)homolog,subfamily A,member 1,Dnaja1]、Na+、K+ATP转运酶β3亚单位(ATPase,Na+/K+ transporting,beta 3 polypeptide,Atp1b3)、SH3结构域GRB2样相互作用蛋白1[SH3-domain GRB2-like(endophilin)interacting protein 1,Sgip1]、锚蛋白重复域17(ankyrin repeat domain 17,Ankrd17)、无义介导的mRNA 降解因子Smg-7同系物(Smg-7 homolog,nonsense mediated mRNA decay factor,Smg7)、精子相关抗原9(sperm associated antigen 9,Spag9)、FK506结合蛋白1A(FK506 binding protein 1a,Fkbp1a)、MYST组蛋白乙酰转�
- 王慧周玉峰舒赛男罗丹田佳张慧娟杜小弋方峰
- 关键词:酵母双杂交系统蛋白质相互作用
- 鼠巨细胞病毒干扰神经干细胞分化相关基因表达的体外研究被引量:1
- 2011年
- 目的研究鼠巨细胞病毒(MCMV)对体外培养神经干细胞(NSCs)wnt信号通路下游分化相关靶基因表达的影响,以探讨CMV先天感染致胎脑发育异常的分子机制。方法体外分离培养BALB/c胎鼠NSCs,用感染复数(MOI)为5、1和0.1的MCMV Smith毒株感染NSCs并进行分化培养,Western blot法检测病毒感染后NSCs Wnt信号通路下游分化相关靶基因c-myc、cyclinD1、ngn-1、ngn-2蛋白表达水平的动态变化,real-timeRT-PCR检测病毒感染后NSCs Wnt信号通路关键分化基因ngn-1mRNA水平的动态变化。结果感染组c-mye蛋白表达量在分化培养后第0.5-5天均显著低于正常对照组(P〈0.05);感染组cyclinD1蛋白表达量在第0.5天和1天显著低于正常对照组(P〈0.05);在第2天和3天显著高于正常对照组(P〈0.05);在第4天和5天,MOI=5组显著低于其他3组(P〈0.05);感染组ngn-1蛋白表达量在第1~5天显著低于正常对照组(P〈0.05);感染组ngn-1mRNA水平在第0.5~5天均显著低于正常对照组(P〈0.05);感染组ngn-2蛋白表达先降后升,与正常对照组先升后降相反,MOI=0.1和1组峰值后移至感染后第5天,且明显低于正常对照组峰值(P〈0.05)。MOI=5组未表现出明显的峰值,各感染组ngn-2表达量在感染后1d明显低于正常对照组(P〈0.05);感染后2d,MOI=5组明显低于正常对照组(P〈0.05);在感染后3、4、5d,各组ngn-2表达量又明显高于正常对照组(P〈0.05)。感染组和正常对照组的差异随病毒MOI的增加而更加明显。结论MCMV感染明显抑制NSCs Wnt信号通路分化相关基因c-myc和ngn-1蛋白表达,抑制ngn-1mRNA表达,并诱导cyclinD1和ngn-2蛋白表达紊乱,其效应随感染滴度增加而更为显著。MCMV抑制和干扰NSCs Wnt信号通路下游分化相关靶基因表达可能是其抑制NSCs增殖分化进而导致胎脑损伤的重要作用机制之一。
- 田佳刘兴楼方峰王慧张慧娟罗丹周玉峰李革
- 关键词:神经干细胞WNT信号通路CYCLIND1
- 小鼠巨细胞病毒即刻早期基因M122酵母双杂交诱饵载体的构建及自激活作用的检测被引量:2
- 2010年
- 目的构建小鼠巨细胞病毒(MCMV)即刻早期基因M122的酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-M122,并检测其自激活作用及对酵母AH109菌株有无毒性作用,用于筛选小鼠胚胎脑cDNA文库。方法采用反转录(RT)-PCR的方法扩增MCMV的M122基因片段,并将其插入到pMD18-Tsimple vector,构建重组质粒pMD18-T-M122。用限制性内切酶EcoRⅠ和SalⅠ将重组质粒酶切鉴定,并测序。测序正确的pMD18-T-M122重组质粒和载体pGBKT7-BD分别用限制性内切酶EcoRⅠ和SalⅠ进行双酶切,凝胶回收M122基因片段及pGBKT7-BD载体片段。将回收的M122基因片段和pGBKT7-BD载体片段,用T4 DNA连接酶16℃连接过夜,构建诱饵质粒pGBKT7-M122。对pGBKTT-M122进行酶切鉴定,测序。将测序正确的pGBKT7-M122转化AH109酵母感受态细胞,转化菌液涂布于营养缺陷培养基SD/-Trp平板和SD/-Trp/X-α-Gal平板。空载体质粒pGBKT7-BD和阳性质粒pCL作为对照亦被转入AH109酵母感受态细胞,转化菌液分别涂布于SD/-Trp平板和SD/-Leu/X-α-Gal平板。观察平板上菌落的颜色、数量及大小。结果1.成功构建了用于酵母双杂交筛选的诱饵载体pGBKT7-M122,其在SD/-Trp/X-α-Gal平板上的菌落为白色。2.转化有重组质粒pGBKT7-M122和空载体质粒pGBKT7的酵母菌株AH109,在2个SD/-Trp平板上长出的菌落大小一致数量相当。结论构建的诱饵质粒pG-BKT7-M122无自激活作用,对酵母菌株AH109亦无毒性。能够用于酵母双杂交系统以筛选与诱饵蛋白相互作用的蛋白分子。
- 王慧田佳罗丹刘兴楼舒赛男张慧娟方峰
- 关键词:诱饵载体酵母双杂交系统自激活作用小鼠巨细胞病毒
- 一种提高激光转盘斩波调Q性能的装置及调Q激光器
- 本发明公开了一种提高激光转盘斩波调Q性能的装置及包含该装置的调Q激光器,装置包括位于谐振腔内部或外部的伽利略望远镜装置以及位于谐振腔内部用于对压缩后的激光光束进行调Q的转盘斩波调Q器件。激光介质为一个时,第一伽利略式望远...
- 朱晓田佳王海林齐丽君郭飞朱广志朱长虹王珂
- 文献传递
- 鼠巨细胞病毒干扰神经干细胞分化相关基因表达的体外研究
- 目的研究鼠巨细胞病毒(MCMV)对体外培养神经干细胞(NSCs)Wnt信号通路下游分化相关靶基因表达的影响,以探讨CMV先天感染致胎脑发育异常的分子机制。方法体外分离培养BABL/c胎鼠NSCs,用感染复数(MOI)为5...
- 田佳刘兴楼方峰王慧张慧娟罗丹周玉峰舒赛男李革
- 文献传递
- MCMV影响神经干细胞cyclins表达和细胞周期进程的体外实验研究被引量:4
- 2010年
- 目的:观察鼠巨细胞病毒(MCMV)感染对体外培养神经干细胞(NSCs)细胞周期进程和cyclins表达的影响,探讨MCMV感染致脑发育异常的机制。方法:本实验体外分离、培养和鉴定BABL/C胎鼠NSCs,以感染复数(MOI)为5,1和0.1的MCMVsmith毒株感染NSCs并于感染后1,2,3,4,5,6d收集细胞,采用Cyclin/DNA双参数流式细胞术检测感染细胞cyclinA,cyclinB1,cyclinD1,cyclinE的表达和细胞周期时相的动态变化,观察MC-MV对感染NSCs细胞周期进程的影响。结果:体外分离培养的NSCs呈球样生长,神经干细胞特异性标记Nestin表达阳性,并可进一步分化为GFAP阳性的星形胶质细胞和NF-200阳性的神经元;各感染组cyclinA,cyclinB1,cy-clinD1和cyclinE的表达均上调,其中MOI=0.1表达逐渐上升,在第6d达峰值,MOI=1组表达高峰在第4d,MOI=5组表达高峰在第3d;感染组G0/G1期细胞比率减少,S期和G2/M期细胞比率增加,其变化趋势与cyclins的表达基本一致,并随MOI的增加变化越明显。结论:Cyclin/DNA多参数流式细胞术可用于NSCs细胞周期的分析;MCMV可通过上调cyclinA,cyclinB1,cyclinD1,cyclinE的表达来影响NSCs细胞周期进程,并与MOI存在一定量效依赖关系;MCMV感染可诱导NSCs从G0/G1期进入S期,出现S期和G2/M期偏移和阻滞,影响NSCs细胞周期进程,这可能是CMV抑制NSCs增殖并导致先天性脑发育异常的重要机制之一。
- 罗丹舒赛男田佳王慧周玉峰葛海霞周华李革方峰
- 关键词:巨细胞病毒神经干细胞细胞周期细胞周期素
- 长脉冲YAG激光放大器的研究
- 本论文对千瓦级长脉冲Nd:YAG固体激光放大器进行了理论分析和实验研究。 首先,在时间域和空间域对激光器振荡级和放大级进行了分析和模拟,得到了耦合输出镜透过率、输出功率、提取效率、高斯光束传输特性以及增益特性等方面的理...
- 田佳
- 关键词:电光效率