王鑫
- 作品数：7 被引量：7H指数：1
- 供职机构：皖南医学院更多>>
- 发文基金：安徽省自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组人HER3胞外域Ⅰ区183-227aa的原核表达及大鼠多克隆抗体的制备与鉴定被引量：1
- 2020年
- 目的原核表达、纯化由人表皮生长因子受体3(HER3)183-227aa肽段(HER3Ⅰ)和麻疹病毒蛋白288-302aa肽段(MVF)融合构建的重组肽(MVF-HER3Ⅰ),并制备其多克隆抗体。方法将MVF与HER3Ⅰ融合构建重组肽MVF-HER3Ⅰ,用化学合成法合成重组肽基因,并将其与pET21b质粒和含有硫氧还蛋白(Trx)基因的pET32a质粒连接构建重组肽表达质粒,重组质粒用双酶切法鉴定。将重组质粒导入到大肠杆菌BL21(DE3)并进行表达参数优化及诱导表达。融合蛋白依次经镍离子亲和层析、肠激酶酶切和再次镍离子亲和层析制备重组肽。表达和纯化过程中的样品纯度和相对分子质量用SDS-PAGE分析。以纯化的重组肽为抗原免疫大鼠制备多克隆抗体。用ELISA法测定抗重组肽多克隆抗体效价,免疫印迹和免疫沉淀法分析抗重组肽多克隆抗体对重组肽和非变性状态HER3的识别,激光共聚焦法分析抗重组肽多克隆抗体与MCF7细胞的结合,磺酰罗丹明B染色法测定在有无神经调节素刺激下抗重组肽多克隆抗体对高表达HER3的MCF7细胞的增殖抑制作用。结果成功构建了重组肽的两种表达质粒,重组肽基因不能单独表达,但和Trx融合后可在37℃、0.2 mmol/L IPTG条件下呈可溶高表达。融合蛋白经亲和层析、酶切和再次亲和层析后得到重组肽。重组肽可刺激大鼠产生效价达1:512000的抗重组肽多克隆抗体。该抗体不仅可特异性识别重组肽,还可特异性沉淀非变性HER3和结合于MCF7细胞的细胞膜。不管有无神经调节素刺激,该抗体均呈浓度依赖性地抑制HER3高表达的MCF7细胞的增殖(P<0.01)。结论成功进行了重组肽MVF-HER3Ⅰ的原核表达和纯化,制备并鉴定了抗MVF-HER3Ⅰ多克隆抗体,为在体内外深入研究该抗体对HER3信号通路的影响打下基础。
- 朱磊朱磊赵志刚王鑫赵志刚颜亮
- 关键词：二聚化多克隆抗体
- 竖脊肌平面阻滞在后入路腰椎手术患者围术期的应用效果及对早期恢复的影响被引量：6
- 2022年
- 目的评价超声引导下竖脊肌平面阻滞(ESPB)在后入路腰椎手术围术期应用效果及对术后早期恢复质量的影响。方法选择在医院接受后入路腰椎手术的患者80例,采用随机数字表法分为ESPB组和对照组(C组),每组40例。在常规麻醉基础上,ESPB组患者在超声下确认针头末端位于竖脊肌深面后在手术两侧各注入0.375%的罗哌卡因20 mL;C组则注入等量的生理盐水。术后两组给予患者自控静脉镇痛(PCIA)。比较两组术后2、6、12、24、48 h的VAS评分(静息和咳嗽);比较两组患者术中丙泊酚、瑞芬太尼及顺阿曲库铵的用量、术后PCIA镇痛按压次数、追加补救镇痛给药次数、术后早期恢复质量指标及不良反应的发生情况。结果两组患者术后2 h到术后48 h的静息VAS评分和咳嗽时VAS评分先升高后下降,ESPB组VAS评分显著低于C组(P<0.05)。ESPB组瑞芬太尼及顺阿曲库铵的用量均少于C组(P<0.05),两组丙泊酚的用量差异无统计学意义(P>0.05)。ESPB组PCIA镇痛按压次数及追加补救镇痛给药次数均显著低于C组(P<0.05)。ESPB组恶心呕吐及皮肤瘙痒的发生率低于对照组(P<0.05),两组其余不良反应的发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。ESPB组首次下床时间及住院时间短于C组(P<0.05)。ESPB组医疗费用少于C组(P<0.05)。ESPB组术后1 d和2 d的QoR-40总评分明显高于C组(P<0.05)。结论超声引导下竖脊肌平面阻滞能为后入路腰椎手术提供良好、安全的镇痛,减少医疗费用,改善患者术后早期恢复质量。
- 王鑫陈伟陈永权
- 关键词：腰椎手术镇痛
- 高频超声在婴幼儿髋关节发育异常早期诊断中的价值分析
- 2023年
- 目的 探讨高频超声在婴幼儿髋关节发育异常(DDH)早期诊断中的应用价值。方法 选取2019年5月至2021年12月在我院接受髋关节超声检查且疑似DDH的135例婴幼儿作为观察组,对其DDH发生情况和特征进行分析,并将X线和其他相关临床检查结果作为诊断“金标准”,了解高频超声对DDH的诊断效能;同时,选取同期50例健康婴幼儿作为对照组,对比两组婴幼儿的髋关节α、β角以及股骨头覆盖率。结果 135例疑似DDH婴幼儿中最终确诊110例,占比81.48%;270个髋关节中共有170个异常髋关节,占比62.96%。女婴DDH占比较男婴更高,左侧异常髋关节占比较右侧更高,差异有统计学意义(P<0.05)。高频超声对DDH的诊断敏感度为90.00%(99/110),特异度为24.00%(6/25)、准确度为77.78%(105/135)、阳性预测值为83.90%(99/118)、阴性预测值为35.29%(6/19)。观察组髋关节α角、股骨头覆盖率更低,髋关节β角高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 对疑似DDH婴幼儿采用高频超声进行诊断可获得较高的诊断效能,有助于DDH的早期诊断与治疗。
- 何花王鑫林海庆桂冬冬孙泉许子旻
- 关键词：婴幼儿高频超声
- 大鼠抗人表皮生长因子受体3(ErbB3)二聚化界面区多克隆抗体的制备与鉴定
- 2021年
- 目的制备由人表皮生长因子受体3(ErbB3)二聚化界面区第236至308位氨基酸肽段(ErbB3Ⅱ)与麻疹病毒蛋白第288至302位氨基酸肽段(MVF)连接而成的融合蛋白MVF-ErbB3Ⅱ,并制备和表征其大鼠多克隆抗体.方法化学合成法合成MVF-ErbB3Ⅱ的基因,利用DNA连接酶与pET-21b载体连接成重组质粒,转化E.coli BL21(DE3)进行MVF-ErbB3Ⅱ原核表达,MVF-ErbB3Ⅱ经镍离子亲和层析法纯化后,免疫大鼠制备多克隆抗体,采用ELISA检测抗体滴度,Western blot法、免疫共沉淀法(IP)和流式细胞术鉴定抗体特异性和靶向性.结果SDS-PAGE证实大肠杆菌成功表达了MVF-ErbB3Ⅱ蛋白,ELISA结果表明多克隆抗体具有较高的抗体效价,Western blot法、IP和流式细胞术结果表明多克隆抗体具有良好的MVF-ErbB3Ⅱ及非变性ErbB3特异性和二聚化界面靶向性.结论成功进行了MVF-ErbB3Ⅱ原核表达和分离纯化及大鼠抗MVF-ErbB3Ⅱ多克隆抗体的制备和表征.
- 朱磊朱磊袁平川王鑫
- 关键词：二聚化多克隆抗体免疫沉淀
- 一种美容护肤乳液及其制备方法
- 本发明公开了一种美容护肤乳液及其制备方法，所述的美容护肤乳液中含有以下物质：茶籽油、阿拉伯胶、西黄蓍胶、甘油、丝瓜提取液、黄瓜榨取液、白芨提取液、合成角鲨烷、卡波姆、三乙醇胺、透明质酸钠、尼泊金乙酯、乙二胺四乙酸二钠、蒸...
- 孙淑萍刘侠李国柱吴少云李胜利杨朋王鑫王青洋孟祥奎
- 文献传递
- 高压氧对小鼠神经病理性痛的影响及机制探讨
- 目的:此实验是为了探讨高压氧疗对神经病理性疼痛的缓解是否为通过抑制炎症,降低HIF-1α的表达来产生的。方法:神经病理性疼痛模型选择CCI模型,小鼠取右侧坐骨神经结扎压迫。选取成年健康雄性C57BL/6J小鼠96只,体重...
- 王鑫
- 关键词：高压氧疗低氧诱导因子1神经病理性疼痛炎症因子
- 一种美容护肤乳液及其制备方法
- 本发明公开了一种美容护肤乳液及其制备方法，所述的美容护肤乳液中含有以下物质：茶籽油、阿拉伯胶、西黄蓍胶、甘油、丝瓜提取液、黄瓜榨取液、白芨提取液、合成角鲨烷、卡波姆、三乙醇胺、透明质酸钠、尼泊金乙酯、乙二胺四乙酸二钠、蒸...
- 孙淑萍刘侠李国柱吴少云李胜利杨朋王鑫王青洋孟祥奎
