王金朝
- 作品数：9 被引量：29H指数：3
- 供职机构：浙江大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省博士后科研项目择优资助项目中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 苯乙烯在SD大鼠中的立体选择性代谢研究
- 苯乙烯,英文名称styrene,是塑胶行业的重要原料。作业环境中的苯乙烯主要以气体形式通过呼吸道进入人体。研究表明,短期接触可刺激皮肤和呼吸道,长期接触可以抑制中枢神经系统,在啮齿类动物中长期接触还可引起蛋白质和核酸的加...
- 王金朝
- 关键词：苯乙烯扁桃酸原代培养肝细胞
- 柱前衍生化RP-HPLC测定米格列奈钙光学纯度被引量：1
- 2009年
- 目的建立柱前衍生化-反相高效液相色谱法测定S-米格列奈钙的光学纯度。方法采用手性衍生化试剂S-萘乙胺(S-NEA),以1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)和1-羟基苯并三唑(HOBt)为偶联剂对样品S-米格列奈钙进行衍生化。衍生产物以乙腈-0.01mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(pH2.5)(50∶50)为流动相,在AgilentZorbaxC18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱上进行分离,流速为1.5mL·min-1,检测波长为225nm,柱温为30℃。结果R-米格列奈在0.3～3.0μg·mL-1内线性关系良好,检测限和最低定量下限分别0.1和0.3μg·mL-1,平均回收率为102.4%,日内日间精密度考察中RSD均小于5%。结论该方法灵敏度高,衍生化产物稳定,重复性好,可用于S-米格列奈钙光学杂质的检测。
- 王金朝曾苏胡功允
- 关键词：米格列奈钙光学纯度高效液相色谱法柱前衍生化
- 手性试剂柱前衍生化高效液相色谱法测定α-苯乙胺的光学纯度被引量：4
- 2009年
- 建立了一种简便的手性试剂柱前衍生化反相高效液相色谱测定α-苯乙胺光学纯度的方法。采用2,3,4,6-四-O-β-D-吡喃葡萄糖异氰酸酯(GITC)对α-苯乙胺进行衍生化,优化了衍生化反应参数;使用Agilent Zorbax C18色谱柱分离衍生化产物,流动相为甲醇-磷酸盐缓冲溶液(pH3.0)(体积比为58:42),流速1.0mL/min,检测波长241nm,柱温为30℃。实验结果表明,α-苯乙胺两个对映体的衍生化产物分离良好,在0.15～15.0mg/L范围内呈现良好的线性关系。方法的检出限为0.05mg/L,定量限为0.15mg/L,日内和日间精密度考察中测定值的相对标准偏差(RSD)均小于0.5%。建立的方法适用于α-苯乙胺的质量控制。
- 王金朝曾苏王丹华胡功允
- 关键词：高效液相色谱法柱前衍生化Α-苯乙胺光学纯度
- 扁桃酸在大鼠、小鼠和兔组织中的立体选择性代谢(英文)
- 2009年
- 目的研究扁桃酸(MA)在大鼠、小鼠和兔组织中的立体选择性代谢,探讨MA代谢酶存在的部位、辅酶依赖性等性质以及可能的种属差异。方法MA对映体与大鼠、小鼠和兔的肝脏、肺、肾脏S9和微粒体共孵育,HPLC检测代谢并用柱前衍生化方法进行手性分析。同时考察辅酶NADH和NADPH及醇脱氢酶竞争性底物乙醇和抑制剂4-甲基吡唑对S-MA代谢的影响。结果S-MA在大鼠肝和肾S9中被代谢为PGA,而R-MA无代谢。两对映体在小鼠和兔组织中均不被代谢。乙醇和4-甲基吡唑不影响酶的活性,该代谢顺利进行的重要辅酶是NADPH而非NADH。结论大鼠中参与MA立体选择性代谢的酶是存在于胞浆或线粒体中的具有NADPH依赖性的非微粒体酶,而不是醇脱氢酶。MA的立体选择性代谢存在种属差异性。
- 高凌波王金朝姚彤炜曾苏
- 关键词：代谢微粒体
- 柱前衍生化RP-HPLC测定L-去甲麻黄碱盐酸盐光学杂质被引量：1
- 2009年
- 目的采用柱前手性试剂衍生化反相高效液相色谱法测定L-去甲麻黄碱盐酸盐的光学纯度。方法采用手性衍生化试剂2,3,4,6-四乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基异硫氰酸酯(GITC)对样品L-去甲麻黄碱盐酸盐进行柱前衍生化。衍生产物以乙腈-0.01mol.L-1磷酸二氢钾缓冲液(pH3.0)(40∶60)为流动相,在Agilent Zorbax C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱上进行分离,流速为1.0mL.min-1,检测波长为210nm,柱温为30℃。结果D-去甲麻黄碱盐酸盐在0.3～5.0mg.L-1内线性关系良好,最低定量下限为0.3mg.L-1,平均回收率为98.0%,日内日间精密度考察中RSD均小于5.0%。结论该方法操作简便,衍生化产物稳定,结果准确,重现性好,灵敏度高,可用于L-去甲麻黄碱盐酸盐光学纯度的检查控制。
- 王金朝胡功允曾苏
- 关键词：去甲麻黄碱高效液相色谱法柱前衍生化
- 重组人和大鼠醇脱氢酶、醛-酮还原酶的克隆表达及应用被引量：5
- 2009年
- 克隆、表达人和大鼠醇脱氢酶(ADH)、醛-酮还原酶(AKR)基因全长cDNA,研究扁桃酸(MA)代谢机制。设计引物,利用RT-PCR克隆人和大鼠醇脱氢酶、醛-酮还原酶基因全长cDNA。测序正确的cDNA被克隆到表达载体pET-28a(+)上并在大肠杆菌BL21(DE3)中稳定表达。利用亲和色谱纯化相应的酶,通过检测其在340 nm吸收度值的变化进行酶活性测定。获得的醇脱氢酶与扁桃酸,醛-酮还原酶与苯乙酮酸(PGA)共孵育,采用HPLC分析其代谢和转化情况。通过测序,目的蛋白的cDNA序列完全正确,在宿主菌中获得良好的可溶性表达,经Ni2+亲和柱纯化后目的蛋白达到了电泳纯,具有较好的催化活性。人ADH2对扁桃酸的代谢具有立体选择性,优先代谢S-MA,对S-MA的代谢能力较强。大鼠ADH1对扁桃酸无代谢活性,人和大鼠AKR对苯乙酮酸均无代谢。成功构建人和大鼠醇脱氢酶、醛-酮还原酶的表达质粒,获得高活性的蛋白。这些重组酶模型可以用于由醇脱氢酶和醛-酮还原酶介导的药物代谢研究。
- 高凌波王金朝曾苏
- 关键词：乙醇脱氢酶扁桃酸
- 手性药物分析与手性药物代谢
- 曾苏余露山蒋惠娣姚彤炜陈枢青周慧胡海红周权孙翠荣潘远江王海钠王金朝钱鸣蓉高凌波陈仲益
- 尽管许多药物含有一个以上的不对称中心，但是常以外消旋体给药。然而，对映体之间的生物效应可有不同。"错误"的对映体，不但无效甚至可有严重的毒副作用。手性药物对映体之间还可具有不同的药物动力学行为。对映体的理化性质相同，只是...
- 关键词：
- 关键词：药物动力学诱导剂
- 高效液相色谱手性流动相添加剂法分离扁桃酸和邻氯扁桃酸对映体被引量：18
- 2005年
- 王金朝曾苏
- 关键词：高效液相色谱对映体添加剂法手性流动相添加剂配体交换色谱直接拆分
- 液相色谱法测定替米沙坦中的N-甲基邻苯二胺残留
- 建立了一种便捷的药品替米沙坦中残留试剂N-甲基邻苯二胺的高效液相色谱分析方法。对建立的方法进行了方法学验证。N-甲基邻苯二胺的最低检测限为40ng/ml,最低定量限为0.2μg/ml;在0.2～10μg/ml范围内具有良...
- 王金朝叶春王丹华胡功允曾苏
- 关键词：替米沙坦高效液相色谱药品
- 文献传递
