王瑞
- 作品数：7 被引量：27H指数：3
- 供职机构：辽宁医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金辽宁省医学高峰建设工程项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人胆固醇酯水解酶基因慢病毒载体构建及鉴定被引量：2
- 2012年
- 目的构建含有人胆固醇酯水解酶(hCEH)基因的慢病毒表达载体pLenti6.3-hCEH-IRES-EGFP,为hCEH基因治疗缺血性脑卒奠定基础。方法应用聚合酶链反应方法扩增目的片段,在目的基因进行上、下游分别加上Pac I和Asc I两个酶切位点,经双酶切后,转化入感受态DH5α细胞中,通过筛选获得重组质粒。将目的基因片段和pLenti6.3-IRES-EGFP载体连接,获得慢病毒表达载体pLenti6.3-hCEH-IRES-EGFP,并进行测序。抽提慢病毒载体,转染293T细胞,包装病毒,测定病毒滴度。结果目的基因与慢病毒表达载体pLenti6.3-IRES-EGFP连接,慢病毒表达载体pLenti6.3-hCEH-IRES-EGFP构建与预期相匹配,包装细胞293T呈绿色荧光。结论成功构建了携带hCEH基因的慢病毒载体。
- 关宁罗俊生霍晓川顾立学王瑞张兴海冯旭
- 关键词：慢病毒表达载体
- 胆固醇酯水解酶与缺血性脑血管病的关系被引量：1
- 2010年
- 缺血性脑血管病是威胁人类健康的常见病、多发病,其主要病理基础是脑供血血管动脉粥样硬化性狭窄。胆固醇酯(CEs)在单核巨噬细胞内过度聚集形成泡沫细胞是动脉粥样硬化病变的显著特征。胆固醇酯水解酶(CEH)能够将细胞内胆固醇酯水解为游离胆固醇而排出细胞,维持细胞内脂质的稳定,抑制单核巨噬细胞的泡沫化。国外研究发现,胆固醇酯水解酶(CEH)的表达水平同动脉粥样硬化的易感性呈负相关。目前国内对CEH在AS斑块形成中的作用研究甚少,本文就近年国外对胆固醇酯水解酶在动脉粥样硬化形成中的作用研究进展作一综述。
- 王瑞罗俊生关宁霍小川
- 关键词：缺血性脑血管病动脉粥样硬化病变单核巨噬细胞动脉粥样硬化形成细胞内脂质硬化性狭窄
- 血必静注射液治疗老年患者脑出血后吸入性肺炎的临床疗效被引量：8
- 2014年
- 目的探讨血必净注射液治疗老年脑出血后吸入性肺炎患者的治疗效果。方法将98例老年脑出血后吸入性肺炎患者随机分为血必净注射液治疗组(n=51)和对照组(n=47)。两组均予常规治疗,血必净注射液治疗组加用血必净注射液,比较两组治疗前后疗效、生命体征、白细胞计数(WBC)、血氧分压(PaO2)、血氧饱和度(SaO2)、急性生理与慢性健康状况(APCHE)评分、C-反应蛋白(CRP)、丙氨酸转氨酶(ALT)和血肌酐(Scr)的变化。结果治疗组总有效率为88.24%,对照组为78.72%,差异有统计学意义(P<0.05)。血必净注射液治疗后生命体征、WBC、PaO2、SaO2和CRP等方面均好于对照组(均P<0.05)。结论血必净注射液具有良好的辅助抗炎症作用,在老年脑出血后吸入性肺炎的治疗中有积极作用。
- 关宁霍晓川王瑞李晨光郭闻师
- 关键词：吸入性肺炎血必净注射液脑出血
- 胰岛素样生长因子结合蛋白-3在白藜芦醇抑制脑胶质瘤C6细胞增殖中的作用被引量：2
- 2015年
- 目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白-3(insulin like growth factor binding protein-3,IGFBP-3)在白藜芦醇(resveratrol,Res)抑制脑胶质瘤C6细胞增殖中的作用。方法将脑胶质细胞和脑胶质瘤C6细胞分为脑胶质细胞组、Res+脑胶质细胞组、脑胶质瘤C6细胞组及Res+脑胶质瘤C6细胞组,采用MTT和Western blot法分别检测Res对各组细胞增殖及细胞中IGFBP-3和ERK蛋白表达水平的影响。将脑胶质瘤C6细胞分为空白对照组、Res组、si RNA-IGFBP-3组和Res+si RNA-IGFBP-3组,采用MTT法、流式细胞术、Transwell试验及Western blot法分别检测Res联合si RNA-IGFBP-3对脑胶质瘤C6细胞增殖、凋亡、侵袭能力及细胞中IGFBP-3和ERK蛋白表达水平的影响。结果各组细胞培养48 h后,Res+脑胶质细胞组与脑胶质细胞组的细胞增殖抑制率及细胞中IGFBP-3和ERK蛋白的表达水平均无明显变化(P>0.05);Res+脑胶质瘤C6细胞组与脑胶质瘤C6细胞组比较,细胞增殖抑制率和细胞中ERK蛋白的表达水平均明显降低(P<0.05),而IGFBP-3蛋白的表达水平明显升高(P<0.05)。与空白对照组比较,Res组细胞增殖抑制率、凋亡率、IGFBP-3蛋白表达水平明显升高(P<0.05),侵袭能力、ERK蛋白表达水平明显降低(P<0.05);而si RNA-IGFBP-3组和Res+si RNA-IGFBP-3组细胞增殖抑制率、凋亡率、IGFBP-3蛋白表达水平明显降低(P<0.05),侵袭能力、ERK蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论 Res可能是通过增强IGFBP-3的表达来抑制ERK信号通路的活性,进而发挥促进脑胶质瘤细胞凋亡的作用。
- 王瑞张守丹孙大鹏
- 关键词：白藜芦醇细胞增殖
- 3D-CTA联合2D-DSA在颅内动脉瘤诊断及干预中的应用被引量：10
- 2011年
- 蛛网膜下腔出血是神经外科较为常见的疾病,其中约50%-80%由颅内动脉瘤破裂出血引起。动脉瘤首次出血的病死率可达40%,第2次出血病死率高达60%。因此早期做出正确诊断并制定合适的手术方案具有重要的临床意义。目前动脉瘤的临床诊断主要通过DSA及CTA。
- 陈杰罗俊生郭闻师关宁霍晓川王瑞
- 关键词：颅内动脉瘤破裂出血3D-CTA蛛网膜下腔出血干预
- 人胆固醇酯水解酶在RAW 264.7巨噬细胞内瞬时表达对胆固醇代谢的影响被引量：4
- 2010年
- 目的:以RAW264.7小鼠单核巨噬细胞为研究对象,探讨人胆固醇酯水解酶(Human cholesteryl ester hydrolase,hCEH)在鼠巨噬细胞内瞬时表达,对细胞内胆固醇代谢产生的影响。方法:利用FuGENE HD转染试剂将pEGFP-N1-hCEH质粒,转染RAW264.7小鼠单核巨噬细胞。24 h后将巨噬细胞与氧化型低密度脂蛋白(Oxidized low density lipoprotein,oX-LDL)(100 mg/L),共同孵育48 h。荧光显微镜观察及Western blot检测细胞内CEH的表达,油红O染色观察细胞内脂滴堆积情况,高效液相色谱检测细胞内游离胆固醇(Free cholesterol,FC)和胆固醇酯(Cholesterol esters,CE)含量。结果:转染72 h后,荧光细胞数最多,转染率接近40%。Western blot检测显示,hCEH蛋白在鼠巨噬细胞内大量表达并部分抑制鼠胆固醇酯水解酶(Cholesteryl ester hydrolase,CEH)表达。转染hCEH组与ox-LDL诱导组相比,油红O染色阳性细胞数显著减少,细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量明显下降。结论:hCEH基因在RAW264.7小鼠单核巨噬细胞内成功表达,减少细胞内胆固醇水平,抑制泡沫细胞的形成。
- 冯旭罗俊生关宁霍晓川王瑞
- 关键词：氧化低密度脂蛋白泡沫细胞胆固醇代谢
- 人胆固醇酯水解酶真核表达载体的构建及U937细胞系的转染被引量：1
- 2011年
- 目的构建人胆固醇酯水解酶(hCEH)绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-N1-hCEH,并观察其转染单核巨噬细胞株U937后,细胞中hCEH的表达情况。方法以人肝细胞L-O2总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增hCEH编码区序列,将扩增片段插入到pMD19-T载体中,回收、纯化目的片段后亚克隆到pEGFP-N1真核表达载体上,经双酶切、测序鉴定后,转染U937,观察U937中绿色荧光蛋白的表达情况。结果 RT-PCR扩增hCEH基因的编码区序列获得1条约1.7 kb的片段,与预期片段大小相符;以pEGFP-N1为载体,成功构建重组表达质粒pEGFP-N1-hCEH,该质粒可以在U937中表达。结论成功构建pEGFP-N1-hCEH,用其转染U937后,细胞中pEGFP-N1-hCEH大量表达。
- 顾立学罗俊生王瑞冯旭关宁霍晓川
- 关键词：真核表达载体单核巨噬细胞U937细胞转染
