王海
- 作品数：39 被引量：90H指数：5
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院生物医学工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学一般工业技术更多>>
- 肺保护性通气策略对食管癌根治术老年患者单肺通气期间脑氧饱和度的影响被引量：16
- 2012年
- 目的评价肺保护性通气策略对食管癌根治术老年患者单肺通气期间脑氧饱和度（rSO2）的影响。方法择期行食管癌根治术的患者40例，年龄65～76岁，体重45～75kg，ASA分级，Ⅰ～Ⅲ级，采用随机数字表法，将其随机分为2组（n=20）：常规通气组（CV组）和保护性通气组（PV组）。静脉注射咪达唑仑0．05mg／kg、舒芬太尼0．4μg／kg、罗库溴铵1mg／kg和异丙酚1．5mg／kg麻醉诱导，左侧插入左侧双腔支气管导管进行机械通气。CV组双肺通气和单肺通气期间v，均为10ml／kg，吸呼比均为1：2；PV组双肺通气和单肺通气期间v，均为6ml／kg，吸呼比均为1：2，并给予PEEP5cmH2O；两组维持PETCO235～45mmHg。吸入2％七氟醚，间断静脉注射罗库溴铵0．5mg／kg维持麻醉。于麻醉诱导前、双肺通气10min和单肺通气30min时，进行动脉血气分析，计算肺内分流率（Qs／Qt），记录rSO2。记录单肺通气期间低rSO2（rSO2积分〉3000％）的发生情况。结果与CV组比较，PV组单肺通气30min时PaO2和rSO2升高，Qs／Qt降低，低rSO2发生率降低（P〈0．05）。结论肺保护性通气策略可改善食管癌根治术老年患者单肺通气期间的氧合，降低肺内分流，减少低rSO2的发生。
- 丁超孙莉张燕王海承耀中赵桂军
- 关键词：正压呼吸潮气量血氧测定法
- RGD多肽化学修饰聚苯乙烯培养板的细胞相容性研究
- 2012年
- 目的考察RGD多肽化学修饰聚苯乙烯培养板细胞相容性研究。方法采用高锰酸钾硫酸溶液对聚苯乙烯表面进行氧化反应，生成羧基位点；水溶性碳二亚胺活化羧基，接枝明胶、胶原和RGD多肽。用红外光谱、X-射线光电子能谱（XPS）、动态接触角等研究了RGD化学修饰聚苯乙烯的变化，并考察了RGD化学修饰聚苯乙烯后细胞相容性的变化。结果XPS结果证实了聚苯乙烯表面N原子的引入，RGD是共价键合在聚苯乙烯表面的。动态接触角下降显著，证明修饰表面的亲水性能提高。在修饰后的聚苯乙烯培养板种植人表皮细胞，结果显示提高了细胞的黏附和增殖能力。结论聚苯乙烯表面进行RGD化学修饰，有利于提高细胞在其表面的黏附和增殖能力，有望为免疫磁珠分离得到的高纯度内皮祖细胞提供良好的培养介质。
- 王海梁士民刘兰霞庞丽云张超葛泉波朱敦皖
- 关键词：RGD多肽聚苯乙烯细胞相容性内皮祖细胞
- 胆固醇基修饰的普鲁兰纳米粒的摄取机制及亚细胞分布研究被引量：3
- 2014年
- 目的 研究胆固醇基修饰的普鲁兰（CHSP）纳米粒的体外HepG2细胞的摄取机制及亚细胞分布.方法 采用异硫氰酸荧光素（FTTC）标记CHSP,透析法制备FITC标记的CHSP（FITC-CHSP）自组装纳米粒并进行表征.采用MTT法考察CHSP纳米粒对HepG2细胞的毒性.选用选择性的内吞途径抑制剂氯丙嗪、菲律宾菌素和阿米洛利来研究HepG2细胞摄取CHSP纳米粒的机制.最后,采用细胞免疫荧光法对内质网、高尔基体和溶酶体进行染色,使用激光扫描共聚焦显微镜（CLSM）观察不同的孵育时间CHSP纳米粒的亚细胞分布.结果 成功合成了FITC-CHSP,且FITC-CHSP能在水介质中自组装成纳米粒,该纳米粒呈规则球形,平均粒径为（63.0 ±1.9） nm.MTT结果表明CHSP纳米粒对HepG2细胞无明显的细胞毒性.内吞抑制实验表明网格蛋白介导的内吞途径以及巨胞饮途径共同参与了CHSP纳米粒的入胞过程.纳米粒的亚细胞分布实验表明：在研究的孵育时间（4 h）内,并未发现CHSP纳米粒进入高尔基体和内质网;当纳米粒与HepG2细胞孵育30 min时,没有纳米粒定位于溶酶体中,随着孵育时间的延长,大量纳米粒分布于溶酶体中.结论 CHSP纳米粒有望成为细胞内递送治疗剂的一种通用载体.
- 张超杨菁肖宝张琳华王海孙洪范孔德领马桂蕾
- 关键词：纳米粒亚细胞分布
- 十二烷基化壳聚糖基因支架血管内基因转运的实验研究被引量：1
- 2006年
- 目的目前基因治疗方面存在的重要问题是缺乏有效的基因转运体系可以足量、安全地将治疗基因(无论病毒载体或非病毒载体)运送至体内靶细胞并提高其转染效率,以得到基因的高效表达。心血管内基因治疗的特殊性还在于很难把基因专一递送至血管组织的病灶处而不进入血液循环系统。实验研究提出了一种携带质粒DNA的烷基化壳聚糖纳米粒的血管内支架,可以有效地将质粒DNA递送至血管壁靶细胞并达到了高效转染的效果。
- 金旭朱敦皖冷希岗张超王海姚康德宋存先
- 关键词：质粒DNA基因载体
- RGD肽表面修饰聚苯乙烯及其细胞相容性研究被引量：3
- 2007年
- 目的以聚苯乙烯二维平面为模板研究了蛋白表面修饰技术,构建具有生物活性的生物材料表面。方法采用物理包被法依靠疏水作用在PS表面架构明胶、胶原和RGD（精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸）多肽的生物活性层。通过光电子能谱（XPS）分析修饰表面的元素含量变化,N元素含量显著提高,说明蛋白分子在表面存在。Bradford方法定量分析明胶、胶原和RGD多肽的表面吸附量。结果XPS证实了表面N原子的引入,存在酰胺键,确定蛋白分子存在于PS表面。结论动态接触角下降显著,证明修饰表面的亲水性得到提高。并在明胶、胶原和RGD多肽修饰表面接种人表皮细胞,对比考察其对细胞行为的影响,提高了细胞的黏附和增殖能力。
- 朱敦皖葛泉波柏金根张海玲张杨李秀兰宋丽萍刘兰霞唐丽娜王海冷希岗姚康德
- 关键词：聚苯乙烯RGD肽细胞相容性
- 巯基化壳聚糖修饰的PLA-PCL-TPGS纳米粒用于肺癌口服化疗药物载体的研究被引量：1
- 2017年
- 目的 构建一种新型的巯基化壳聚糖修饰的聚乳酸-聚己内酯-聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯（PLA-PCL-TPGS）纳米粒,探讨其用作肺癌口服化疗药物载体的可行性.方法 合成PLA-PCL-TPGS无规共聚物并进行表征,再以商业化的PCL和PLA-PCL-TPGS无规共聚物制备3种用于口服递送紫杉醇的纳米载体：5％巯基化壳聚糖修饰的PCL纳米粒（CNP）、未修饰的PLA-PCL-TPGS纳米粒（UNP）和5％巯基化壳聚糖修饰的PLA-PCL-TPGS纳米粒（TNP）,并对其粒径、Zeta电位、表面形态、载药量和包封率进行表征,研究其体外药物释放行为、体外人肺癌细胞A549的摄取及对A549细胞的毒性,采用离体肠吸收实验测定跨肠道屏障转运的紫杉醇含量.结果 成功合成了PLA-PCL-TPGS无规共聚物.场发射扫描电镜结果表明,3种载紫杉醇的纳米粒均呈球状,粒径约200 nm.PLA-PCL-TPGS纳米粒经巯基化壳聚糖修饰后,表面由负电荷转为正电荷.UNP和TNP的载药量、包封率和32 d内的紫杉醇累积释放率均高于CNP,差异均具有统计学意义（均P＜0.05）.A549细胞对TNP的摄取率显著高于CNP和UNP,差异均具有统计学意义（均P＜0.05）.体外细胞毒性研究结果显示,TNP较临床应用的紫杉醇注射液对A549细胞具有更强的细胞毒性.离体肠吸收实验结果显示,TNP可通过开放紧密连接、绕过P-糖蛋白外排泵增加紫杉醇的运输.结论 PLA-PCL-TPGS纳米粒经巯基化壳聚糖修饰后能增强细胞摄取和细胞毒性,有望用作肺癌口服化疗药物载体.
- 蒋丽琴张超王海庞丽云肖宝王晓莉
- 关键词：口服化疗纳米粒肺癌
- 功能化多壁碳纳米管对血管内皮细胞毒性的初步研究
- 2009年
- 目的由于碳纳米管的广泛应用，其对人类及环境造成的影响日益受到人们的关注。血管是碳纳米管进人人体的首要通道之一，因此探讨功能化与原始状态的多壁碳纳米管对血管内皮细胞的细胞毒性作用具有重要意义。方法自人脐静脉分离血管内皮细胞，免疫组化进行细胞鉴定。选择0．5～1μm经羧基修饰的功能化多壁碳纳米管（f-CNTs）与同等长度未经修饰的多壁碳纳米管（p-CNTs）制备颗粒悬液，与血管内皮细胞共育后，利用噻唑蓝实验（MTT比色法）检测细胞活力，透射电镜进行细胞形态学观察；制备碳纳米管透析液，通过MTT实验检测其对细胞的毒性作用。结果①2种纳米管均对原代脐静脉内皮细胞（HUVEC）产生一定的毒性作用，而且其细胞毒性随剂量递增呈上升趋势。与细胞共育24h后，p-CNTs的毒性大于f-CNTs；而共育48h及72h后，f-CNTs毒性大于p-CNTs。②透射电镜实验表明，f-CNTs共育细胞内空腔明显多于p-CNTs，而空腔内f-CNTs聚集体紧密程度明显小于p-CNTs。③对2种多壁碳纳米管透析后的细胞培养基对细胞活力无明显影响。结论根据上述结果笔者推测，p-CNTs细胞毒性的主导因素是聚集程度，f-CNTs对细胞毒性的主导因素为表面效应。进入细胞的碳纳米管数目增多，造成细胞损伤或阻断细胞内代谢通路，可能是共育后期f-CNTs细胞毒性大于p-CNTs的原因。
- 朱筠董霞宋丽萍王海徐伟杰朱敦皖冷希岗
- 关键词：细胞毒性血管内皮细胞
- 异硫氰酸荧光素标记的神经生长因子缓释微球的制备及评价被引量：3
- 2007年
- 目的探讨异硫氰酸荧光素（FITC）标记的神经生长因子缓释微球的制备，并对其进行体内外评价。方法采用水一油．水的双乳化技术制备FITC标记的神经生长因子缓释微球。利用扫描电镜和荧光显微镜对其形态特征进行观察，并对其体内外释放情况进行研究。结果制备的FITC标记的神经生长因子缓释微球包封率和载药量分别为（97.9±8.9）％和（4．90±0．56）％。扫描电镜结果鼎示所制备的微球呈圆形、形态规整、粒径分布较均匀。荧光显微镜结果显示所包载的蛋白类药物在微球内呈随机分布。缓释微球体外持续释放5周后，有73％的蛋白释放出来；荧光示踪显示在体内能够持续释放达5周以上。结论采用水-油-水的双乳化技术制备的缓释微球可以将生物大分子药物如神经生长闪子成功运载到脑内。
- 谷海刚龙大宏李晓滨王海宋存先
- 关键词：神经生长因子微球
- 载紫杉醇聚乳酸聚乙醇酸共聚物纳米粒抑制人肝癌细胞HepG2的作用被引量：6
- 2013年
- 背景:临床上应用的紫杉醇注射剂毒性大,过敏反应发生率高。目的:研制载紫杉醇聚乳酸聚乙醇酸共聚物纳米粒,观察其对人肝癌细胞HepG2的抑制及诱导细胞凋亡的作用。方法:采用MTT法检测0,3.125,6.25,12.5,25,50,100mg/L载紫杉醇聚乳酸聚乙醇酸共聚物纳米粒子或紫杉醇作用后人肝癌细胞HepG2的生长;观察25mg/L载紫杉醇聚乳酸聚乙醇酸共聚物纳米粒子或紫杉醇作用后人肝癌细胞HepG2的形态变化,并观察0,12.5,25,50mg/L载紫杉醇聚乳酸聚乙醇酸共聚物纳米粒子作用后细胞的凋亡情况。结果与结论:在3.125-100mg/L质量浓度范围内,载紫杉醇聚乳酸聚乙醇酸共聚物纳米粒子与紫杉醇均能明显抑制HepG2细胞的生长,且载紫杉醇聚乳酸聚乙醇酸共聚物纳米粒子显示出明显的缓释作用,随着作用时间的增加其抑制率显著增加,72h时抑制效果最好,但紫杉醇此现象不明显。载紫杉醇聚乳酸聚乙醇酸共聚物纳米粒子或紫杉醇作用后,细胞出现典型的凋亡形态,且随着载紫杉醇聚乳酸聚乙醇酸共聚物纳米粒子作用时间的增加这一现象更加典型;12.5,25,50mg/L载紫杉醇聚乳酸聚乙醇酸共聚物纳米粒子可明显诱导细胞凋亡,且有明显的量效和时效关系,质量浓度越高、时间越长效果越明显。
- 庞丽云王海陈永霞刘帅杨菁孙洪范
- 关键词：生物材料纳米生物材料紫杉醇纳米粒肝癌缓释药物
- 肝癌靶向载多烯紫杉醇聚多巴胺修饰琥珀酸酯-聚乳酸纳米粒子的研究被引量：1
- 2016年
- 目的 建立一种简便的、具有肝癌靶向的聚多巴胺表面修饰聚合物纳米粒子以增加聚合物膜层和功能化的方法.方法 采用聚多巴胺修饰聚乙二醇1000-琥珀酸盐-聚乳酸纳米粒子（pD-TPGS-PLA/NPs）,并用其包载多烯紫杉醇（DTX）.为了达到靶向治疗肝癌的作用,再将半乳糖胺连接在pD-TPGS-PLA/NPs表面,从而通过配体-受体介导的作用提高DTX的递送效率.结果 聚多巴胺-琥珀酸酯-聚乳酸纳米粒子（pD-TPGS-PLA/NPs）和半乳糖胺-聚多巴胺-琥珀酸酯-聚乳酸纳米粒子（Gal-pD-TPGS-PLA/NPs）在粒径和形态学上与琥珀酸酯-聚乳酸纳米粒子（TPGS-PLA/NPs）有明显的不同.体外研究结果显示,TPGS-PLA/NPs、pD-TPGS-PLA/NPs和Gal-pD-TPGS-PLA/NPs对DTX有相似的释放行为.激光扫描共聚焦显微镜和流式细胞仪结果显示,HepG2细胞对于包载香豆素-6的Gal-pD-TPGS-PLA/NPs有较高地细胞摄取效率.相比于TPGS-PLA/NPs、pD-TPGS-PLA/NPs和临床应用的DTX药物多西他赛,载DTX的Gal-pD-TPGS-PLMNPs对HepG2细胞的生长有更强的抑制能力.体内抗肿瘤研究结果显示,在荷瘤裸鼠上注射包载DTX的Gal-pD-TPGS-PLA/NPs能有效减小肿瘤尺寸.结论 Gal-pD-TPGS-PLA/NPs可通过配体-受体识别与肝癌细胞发生特有的相互作用,有望成为一种极具潜力的靶向治疗肝癌的药物递送系统.
- 务圣洁陈卓胡春艳秦玉樊帆王海张琳华陶伟刘赣曾小伟梅林朱敦皖
- 关键词：表面修饰肝靶向
