王月红
- 作品数：12 被引量：13H指数：2
- 供职机构：上海生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：上海市卫生系统百名跨世纪优秀学科带头人培养计划上海市科学技术委员会科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程生物学轻工技术与工程更多>>
- C群脑膜炎球菌结合疫苗的制备及其免疫原性
- 2014年
- 目的 制备由不同分子大小C群脑膜炎球菌多糖（group C meningococcal polysaccharide,CPS）与破伤风类毒素（tetanus toxoid,TT）共价偶联而成的结合疫苗（CPS-TT）,并检测其在小鼠中的免疫原性.方法 将CPS降解成不同大小的片段,经碳二亚胺（carbodiimide,EDAC）或溴化氰（cyanogen bromide,CNBr）活化后偶联到TT上制成CPS-TT.NIH小鼠皮下注射制备的不同CPS-TT,用ELISA法测定小鼠血清抗CPS和TT IgG抗体.结果 EDAC活化的降解CPS的衍化率（3.9％～5.7％）和多糖回收率（11.4％～21.3％）均高于CNBr活化的降解CPS的衍化率（0.4％～1.2％）和回收率（2.4％～11.5％）.EDAC或CNBr活化的降解CPS制备的CPS-TT在小鼠中均具有较强的免疫原性,但EDAC活化的降解CPS制备的CPS-TT免疫小鼠的抗CPS抗体滴度高于CNBr活化的降解CPS制备的CPS-TT免疫小鼠.结论 EDAC活化的降解CPS可用于制备C群脑膜炎球菌结合疫苗.
- 毕慧王伟沈坚王月红王晓荣家康朱为
- 关键词：免疫原性
- 高表达α1b干扰素(INF-α1b)工程菌的高密度发酵及干扰素纯化
- 目的在构建高表达INF-alb重组大肠杆菌工程菌的基础上,建立适合该工程菌的发酵和纯化工艺。方法采用高密度培养技术(HCDC)和柱层析技术。结果发酵密度A可达70,表达量为菌体总蛋白的30%左右。经破菌、离心、离子交换和...
- 徐帆洪吴腾捷路煜叶凡王月红刘朝阳郭盛淇
- 关键词：重组大肠杆菌高密度发酵纯化
- 文献传递
- 高效表达干扰素α1b(IFN-α1b)工程菌的高密度发酵及干扰素纯化被引量：2
- 2003年
- 目的在构建高效表达IFN-α1b重组大肠杆菌工程菌的基础上,建立适合该工程菌的发酵和纯化工艺.方法采用高密度培养方法(HCDC)和柱层析纯化技术.结果发酵密度A600可达70,表达量为菌体总蛋白的30%左右.经破菌、离心、离子交换和分子筛凝胶过滤得到IFN-α1b纯品,FPLC测定纯度为100%,活性为4.99×107U/ml,比活为2.5×107U/mg,均符合2000版<中国生物制品规程>要求.结论已建立了适用于规模化生产的发酵纯化工艺.
- 徐帆洪吴腾捷路煜叶凡王月红刘朝阳郭盛淇
- 关键词：干扰素工程菌高密度发酵纯化
- 脑膜炎球菌表面蛋白fHBP与PorA的融合表达及其免疫原性被引量：2
- 2016年
- 目的构建脑膜炎球菌（Neisseria meningitidis,Nm）表面蛋白fHBP重组表达质粒,并与PorA蛋白融合表达,对单抗原fHBP和融合抗原fHBP-PorA的免疫原性进行检测。方法筛选并优化fHBP和PorA基因序列,设计连接片段将PorA连接至fHBPC-端,构建重组表达质粒pET-24b-fHBP和pET-24b-fHBP-PorA,分别转化E.coli BL21（DE3）感受态细胞,IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经镍柱亲和层析和凝胶过滤层析后免疫家兔,制备抗血清,采用间接ELISA、流式细胞术和微量血清杀菌力试验（serum bactericidal assay,SBA）评价抗原的免疫原性。结果经双酶切和测序鉴定,两个蛋白的重组表达质粒构建正确。重组蛋白fHBP以可溶形式表达,fHBP-PorA以包涵体形式表达,纯化后纯度均在90%以上。抗血清滴度均在1.0×10~5以上。流式细胞术检测显示,抗血清与Nm可发生特异性结合,且fHBP-Por A抗血清显示出一定的交叉反应。fHBP和fHBP-PorA抗血清对Nm29019的杀菌滴度为1∶128。结论 fHBP具有较好的抗原性和免疫原性,具备B群脑膜炎疫苗开发前景。多抗原融合策略需更多的优化考虑。
- 吴根鹏袁萍王月红王晓毕慧黄帼英徐帆洪朱为
- 关键词：脑膜炎球菌免疫原性
- 用于Hib结合疫苗生产的新型候选菌株的评价被引量：1
- 2011年
- 目的观察b型流感嗜血杆菌（Haemophilus influertzae typeb，Hib）760705株在连续传代过程中的稳定性。方法将Hib 760705株工作种子批菌种连续传代，对第5、第8、第10代Hib培养物进行全面检测，包括培养特性（细菌培养、卫星试验）、染色镜检、生化反应，以检测第5、第8、第10代Hib的生物学特性。同时采用血清凝集试验和聚合酶链反应英膜分型方法进行b型荚膜多糖稳定性检测。结果Hib 760705株工作种子批培养物在连续传代过程中具有典型的细菌学特性，能够稳定地产生b型荚膜多糖。结论Hib 760705株有明确的来源和背景，可以稳定传代，具备作为Hib结合疫苗生产用候选菌株的条件。
- 王伟马雷钧王月红朱为马相虎
- 关键词：嗜血菌流感连续传代疫苗
- 高表达α1b干扰素(INF-α1b)工程菌的高密度发酵及干扰素纯化
- 目的:在构建高表达INF-α1b重组大肠杆菌工程的基础上,建立适合该工程菌的发酵和纯化工艺.方法:采用高密度培养技术(HCDC)和柱层析技术.结果:发酵密度A<,600>可达70,表达量为菌体总蛋白的30％左右.经破菌、...
- 徐帆洪吴腾捷路煜叶凡王月红刘朝阳郭盛淇
- 关键词：重组大肠杆菌高密度发酵纯化干扰素
- 文献传递
- 菌影作为新型疫苗递送载体的研究进展
- 2009年
- 尽管基于重组蛋白或DNA的新型疫苗的开发以指数级上升，但是其免疫原性常弱于传统疫苗，缺少有效的递送系统是其应用的主要限制因素，因此迫切需要开发新型改良的递送系统和佐剂。菌影（bacterial ghost，BG）系统正是这类载体系统，它能将结合的抗原靶向APC，并具有佐剂活性。BG是一种无生命的革兰阴性菌包膜，无胞质内容物，但保留了细胞形态和天然表面抗原结构。由于BG具有颗粒特性并包含许多已知的免疫刺激成分，因此BG能增强抗其传递的靶抗原的免疫应答。作为一种新型的疫苗递送载体，菌影将被用于人用和兽用疫苗的生产。
- 王月红朱为
- 关键词：药物载体疫苗
- 4株脑膜炎球菌菌株的16SrRNA、PorA和PorB基因序列分析
- 2011年
- 目的对A、C、Y和W135 4个不同血清群脑膜炎球菌菌株的16SrRNA、PorA和PorB基因进行序列分析，从分子水平对其做出鉴定。方法提取脑膜炎球菌基因组DNA为模板，设计特异性引物进行16SrRNA、PorA和PorB基因的PCR扩增并测序。结果A、C、Y和w135 群4个菌株的16SrRNA基因序列与GenBank中奈瑟菌属的脑膜炎球菌的同源性最高。4个菌株的PorA基因分型分别为P1．5—2，10；P1．7-1，1；P1．5-1，2—2；P1．5，2。PorB基因分别与porB3—26、porB2—40、porB3—100和porB3—25同源。结论从基因水平分析表明4个菌株属于脑膜炎球菌，并在PorA和PorB基因分型上有差异。
- 朱为王月红
- 关键词：奈瑟球菌脑膜炎核糖体
- 冻干A群脑膜炎球菌多糖结合疫苗的稳定性及氢氧化铝佐剂复溶疫苗的免疫效果被引量：2
- 2010年
- 目的观察冻干A群脑膜炎球菌多糖-破伤风类毒素结合疫苗的稳定性,并比较A(lOH)3佐剂和磷酸盐缓冲液(PBS)复溶疫苗的免疫效果。方法将冻干疫苗于2～8℃放置36个月,每隔6个月取样,测定游离多糖含量、分子大小等,观察疫苗的稳定性。分别用A(lOH)3和PBS两种稀释液复溶疫苗后,计算吸附率并免疫小鼠,采用ELISA法测定小鼠血清中抗多糖IgG抗体滴度。结果疫苗于2～8℃放置30个月,各项质量指标均合格。A(lOH)3稀释液复溶疫苗的吸附率为100%。以两种稀释液复溶的疫苗均可诱导小鼠产生高滴度的抗多糖IgG抗体及免疫记忆反应,且A(lOH)3稀释液明显优于PBS稀释液。结论冻干A群脑膜炎球菌结合疫苗具有良好的稳定性,A(lOH)3佐剂可作为其稀释液。
- 朱为毕慧王月红王晓
- 关键词：脑膜炎结合疫苗稳定性氢氧化铝
- A群和C群脑膜炎球菌荚膜多糖提制工艺研究被引量：4
- 2011年
- 研究一种不使用苯酚的荚膜多糖提制工艺,用于疫苗制备。采用液体罐培养A群和C群脑膜炎球菌,杀菌后离心取上清液,用十六烷基三甲基溴化铵沉淀多糖,用氯化钙溶液解离后,加乙醇至25%去除核酸等杂质,经乙醇沉淀获得粗多糖。将粗多糖溶解后,加乙醇至一定浓度沉淀蛋白,离心获得上清液,经超滤浓缩和乙醇沉淀,获得纯化多糖。纯化的多糖生化检测结果符合WHO和《中国药典》(2010年版)规定,豚鼠和小鼠异常毒性检查合格,豚鼠过敏试验未见过敏反应,1H NMR检测显示多糖结构具有一致性。该研究建立的A群和C群脑膜炎球菌荚膜多糖提制工艺为应用于疫苗制备奠定了基础。
- 朱为荣家康江元翔王晓毕慧王月红郑小秋黄帼英秦洁
- 关键词：脑膜炎球菌荚膜多糖提制乙醇
