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固相萃取高效液相色谱紫外检测法测定血清中结合型胆汁酸的方法研究与临床应用: 目的： 1.建立一种同时测定血清中9种结合型胆汁酸的固相萃取高效液相色谱紫外检测法（SPE-HPLC-UV）。 2.用SPE-HPLC-UV法测定正常孕妇、轻度和重度妊娠肝内胆汁淤积症（ICP）患者母...; 王文娟; 关键词：结合型胆汁酸色谱法妊娠肝内胆汁淤积症固相萃取高效液相色谱血清诊断; 文献传递

cAMP-PKA-CREB信号通路在骨形态发生蛋白9诱导小鼠间充质干细胞成骨分化中的作用被引量：4: 2014年; 目的探讨cAMP-PKA-CREB信号通路在骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导小鼠间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)C3H10T1/2成骨分化过程中的作用及其机制。方法将C3H10T1/2细胞分别加入不同浓度的cAMP-PKA-CREB信号通路抑制剂H89(1、2.5、5和10μmol/L),检测其对碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性的影响;通过ALP定量和钙盐沉积试验分别检测H89对BMP9诱导C3H10T1/2细胞早期和晚期成骨分化的影响;经Western blot法检测H89对C3H10T1/2细胞中磷酸化CREB、骨钙素(Osteocalcin,OCN)和成骨关键转录因子Runx2表达水平的影响;通过Wentern blot及荧光素酶活性的检测,观察H89对经典信号通路BMPs-smad1/5/8的影响。结果随着H89浓度的增加,对BMP9诱导的C3H10T1/2细胞ALP的抑制作用明显增强(P<0.05),且呈剂量依赖性;ALP定量和钙盐沉积试验结果表明,H89可明显抑制BMP9诱导的C3H10T1/2细胞早期及晚期成骨分化;H89可显著抑制BMP9诱导的C3H10T1/2细胞中磷酸化CREB、OCN及Runx2蛋白的表达(P<0.05),与AdBMP9组比较,H89对经典BMPs-smad1/5/8信号通路无明显影响(P>0.05)。结论阻断cAMP-PKA-CREB信号通路可抑制BMP9诱导的MSCs C3H10T1/2的成骨分化,为BMP9的临床应用奠定了理论基础。; 宋涛刘跃亮赵艳芳王文娟徐静罗进勇; 关键词：信号通路间充质干细胞分化

DLX1对BMP9诱导的间充质干细胞成骨分化的影响: 为了研究同源结构域转录因子家族成员DLX1对间充质干细胞成骨分化的影响，骨形态发生蛋白9（bone morphogenetic proteins9，BMP9）作用于小鼠间充质干细胞C3H10T1/2、小鼠胚胎成纤维细胞i...; 王文娟; 关键词：间充质干细胞成骨分化转录因子碱性磷酸酶

高效液相色谱法检测ICP脐血胆汁酸谱及妊娠结局被引量：2: 2010年; 目的:探讨不同程度妊娠期肝内胆汁淤积症脐血胆汁酸谱及其妊娠结局。方法:高效液相色谱法检测妊娠期肝内胆汁淤积症脐血8种胆汁酸。结果:①对照组和轻度ICP组比较,脐血TCA差异有统计学意义(P<0.05);对照组和重度ICP组比较,脐血TCA、GCA和TCDCA差异均有统计学意义(P<0.05):轻度组和重度组间比较TCA、GCA、TCDCA差异有统计学意义(P<0.05)。②对照组和轻度ICP组比较,ALT、AST差异均有统计学意义(P<0.05),而TBIL、DBIL没有差异;轻度ICP组和重度ICP组比较,ALT、AST、TBIL、DBIL差异均有统计学意义(P<0.05)。③重度ICP组早产儿例数显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:不同程度的ICP母血肝功能指标和脐血胆汁酸谱都有明显的差异特征。; 刘雨邵勇王文娟丁敏; 关键词：妊娠肝内胆汁淤积症脐血

骨形态发生蛋白9通过JNKs激酶途径调控间充质干细胞成骨分化被引量：3: 2013年; 前期研究发现骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)除了通过经典Smad途径外,也可通过丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPKs)中的p38激酶途径调控间充质干细胞成骨分化.本研究继续探讨MAPKs的重要成员c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinases,JNKs)对于BMP9诱导间充质干细胞成骨分化的调控作用.利用BMP9重组腺病毒感染间充质干细胞,通过体外细胞实验和体内动物实验,初步分析BMP9是否可通过JNKs激酶途径调控间充质干细胞成骨分化.结果表明:BMP9可通过促进JNKs激酶磷酸化而导致其活化;JNKs抑制剂SP600125可抑制由BMP9诱导的间充质干细胞的碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性、骨桥蛋白(osteocpontin,OPN)和骨钙素(osteocalcin,OCN)表达以及钙盐沉积;利用抑制剂SP600125抑制JNKs激酶活性后,BMP9诱导Runx2的表达和转录活性,以及Smad经典途径的激活也相应受到抑制;RNA干扰导致JNKs基因沉默同样也可抑制BMP9诱导的间充质干细胞成骨分化以及裸鼠皮下异位成骨.因此,BMP9可通过活化JNKs激酶途径,从而调控间充质干细胞成骨分化.; 徐静赵丹王箭王文娟罗进勇; 关键词：间充质干细胞成骨分化丝裂原活化蛋白激酶

HPLC-UV同时测定血浆色氨酸和犬尿氨酸浓度: 色氨酸(tryptophan,Trp)是蛋白质生物合成必需的氨基酸之一,哺乳动物摄入的Trp大多经犬尿氨酸原途径代谢.吲哚胺-2,3-双加氧酶(indoleamine-(2,3)-dioxygenase,IDO)是催化T...; 马莉王文娟邓文平丁敏; 关键词：HPLC-UV 血浆色氨酸犬尿氨酸; 文献传递

终末期肾病患者血浆同型半胱氨酸及其他氨基硫醇物水平变化被引量：16: 2009年; 目的观察终末期肾病（endstagerenaldisease，ESRD）患者血液透析前后血浆同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）及其他氨基硫醇物的水平变化。方法选择慢性维持血液透析患者26例，健康对照组54名。用HPLC．荧光检测法测定血浆总Hey（tHcy）、总半胱氨酸（totalcysteine，tcys）、总半胱氨酰甘氨酸（total cysteinylglycine，tCysGly）、总谷胱甘肽（total Glutathione，tGSH）浓度。同时测定受检者的血脂水平和肾功能。结果ESRD患者血液透析前血浆tHcy、tCys、tCysGly浓度分别为（16．70±3．51）μmol/L、（341．87±70．65）μmol／L和（41．33±32．95）μmol／L，明显高于健康对照组的（10．95±3．07）μmol／L、（249．76±13．18）μmoL／L和（31．3±11．78）μmol／L，差异有统计学意义（t值分别为3．625、6．219和3．530，P均〈0．01）；ESRD患者血液透析前血浆tGSH浓度为（5．91±0．08）μmol／L，低于健康对照组的（9．33±2．62）μmol／L，差异有统计学意义（t=-5．404，P〈0．01）；血液透析后，tHey、tCys浓度分别为（11．74±3．42）μmol／L、（272．67±64．18）txmoVL，较透析前显著降低，但不能恢复至正常水平；血液透析前后tCysGly浓度分别为（41．33±32．95）μmol／L与（44．93±13．88）μmol／L，差异无统计学意义（t=-0．758，P〉0．05）；tGSH浓度分别为（5．91±0．08）μmol／L与（5．93±0．38）μmol／L，差异无统计学意义（t=-0．068，P〉0．05）。患者血浆tHcy与tCys和Cr呈正相关（r值分别为0．7536、0．4582，P均〈0．01），与tGSH呈负相关（r值为-0．6099，P=0．0009），与tCysGly和血脂参数无关。结论ESRD患者普遍存在氨基硫醇物代谢紊乱。; 何俊张晓清王文娟丁敏; 关键词：肾病肾透析半胱氨酸

高效液相色谱法同时测定胆汁中9种结合型胆汁酸被引量：12: 2009年; 目的：建立测定人胆汁中结合型胆汁酸的HPLC-紫外检测法。方法：胆汁样品经固相萃取，采用WatersNovaC18色谱柱，柱温为25℃，流动相为甲醇：磷酸盐缓冲液（60mmol／L，pH3．3）（66：34，v／v），流速0．8ml／min，检测波长197nm。结果：9种结合型胆汁酸在20min内分离完全，各胆汁酸在浓度为8-1000umol／L范围内线性良好，r为0．9991-0．9999；最低检测限为1．25-3．13umol／L；该方法日内变异在3．77％-8．20％之间，日间变异在6．73％～17．11％之间，各胆汁酸的回收率在88．23％．109．75％之间。结论：本方法准确、灵敏、快速，适用于胆汁中结合型胆汁酸水平的实验室研究和临床常规检测。; 王文娟邓文平王猛陈耿丁敏; 关键词：胆汁胆汁酸色谱法

双氢青蒿素通过阻断Wnt/β-catenin信号抑制骨肉瘤细胞系体外增殖和侵袭被引量：6: 2014年; 目的研究双氢青蒿素(DHA)在体外对骨肉瘤细胞增殖和侵袭的抑制作用及其可能的分子机制。方法不同浓度的DHA处理骨肉瘤细胞,结晶紫染色检测细胞增殖。Western blot和荧光素酶报告基因实验检测Wnt/β-catenin信号通路的活化情况。结果 DHA在体外能明显浓度依赖性地抑制人骨肉瘤细胞的增殖和侵袭(P<0.05);DHA可降低骨肉瘤细胞β-catenin的蛋白水平和转录调控活性(P<0.01),过表达β-catenin可逆转DHA对骨肉瘤细胞增殖和侵袭的抑制作用(P<0.05),而β-catenin基因沉默则可进一步加强其抑制效果(P<0.01)。结论DHA可明显抑制人骨肉瘤细胞增殖和侵袭,这种作用可能与其阻断Wnt/β-catenin信号通路相关。; 王文娟赵丹徐静李丽董谦王玉凤冯巧灵王锦何娟文何通川罗进勇; 关键词：双氢青蒿素骨肉瘤 WNT

bFGF2抑制BMP9诱导小鼠间充质干细胞C3H10T1/2向成骨细胞分化被引量：3: 2013年; 目的观察碱性成纤维细胞生长因子(FGF2)对于骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导的间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化的影响,并探讨其机制。方法用BMP9和FGF2重组腺病毒感染C3H10T1/2细胞,测定成骨早期标志物碱性磷酸酶(ALP)活性变化,茜素红S染色观察成骨晚期标志物钙盐沉积,p12SBE-luc荧光素酶报告基因活性检测,Western blot检测经典信号通路smad1/5/8和成骨关键转录因子RUNX2的变化,以及晚期成骨标志物骨钙素(OCN)的表达。结果 FGF2抑制了BMP9诱导的早期成骨指标ALP和晚期成骨指标钙盐沉积和骨钙素的表达,抑制了经典的BMPs-Smad信号通路,抑制了成骨关键的转录因子Runx2的表达。结论 FGF2可抑制BMP9诱导的间充质干细胞C3H10T1/2的成骨分化。; 宋涛赵艳芳刘跃亮徐静王文娟罗进勇; 关键词：碱性成纤维细胞生长因子间充质干细胞成骨分化

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王文娟

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