王慧娟
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：四川大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金海南省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- SAFB1蛋白的表达纯化及其对乳腺癌细胞抑制作用的验证被引量：2
- 2010年
- 利用RT-PCR方法从7721细胞系中分离野生型SAFB1基因,将该基因分别克隆入PET28a和pcDNA3.1载体来构建原核表达及真核表达载体.重组质粒经IPTG诱导表达后亲和层析纯化,用Western印迹实验验证蛋白表达的正确性.将SAFB1基因转入MCF7中,以RT-PCR的方法检测蛋白的表达,检测其对XOR基因的调控作用及做生长曲线验证其对乳腺癌细胞抑制作用.结果证实了SAFB1对乳腺癌细胞生长抑制作用非常明显,且对XOR基因的表达有一定的抑制作用.
- 季雯娟张磊王慧娟刘挺柏庆然吴传芳
- 关键词：肿瘤抑制表达纯化
- RBM5蛋白调控c-FLIP差异性剪切及其抑制A549增殖的研究被引量：2
- 2010年
- 本文试探讨RBM5蛋白对肺腺癌细胞A549增殖的影响及其作用机制,以期为开辟肺癌基因治疗新途径提供帮助.本研究构建了表达RBM5基因的真核表达载体,并转染A549细胞株,增强其中该基因的表达量.采用RT-PCR检测转染后A549细胞中c-FLIP基因不同剪切体的表达量,并绘制生长曲线.结果表明,RBM5基因在A549细胞中的高表达,可以调控c-FLIP的差异剪切,减少c-FLIPs的表达量,激活细胞程序化死亡相关通路,抑制肺腺癌细胞恶性增殖.
- 张磊季雯娟柏庆然王慧娟吴传芳
- 关键词：细胞程序化死亡恶性增殖C-FLIP
- 人PSF蛋白的原核表达及分析鉴定
- 2011年
- PSF(polypyrimidine tract binding protein-associated splicing factor)蛋白是一种多功能的DNA/RNA结合蛋白,能够抑制原癌基因的表达,在人和小鼠中具有肿瘤抑制的作用。以人成纤维细胞总RNA为材料,利用PSF特异性引物通过RT-PCR的方法扩增得到PSF蛋白的编码序列,将其克隆到原核表达载体pET-28a(+)中构建重组表达质粒pET-28-PSF,转化大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达。SDS-PAGE及免疫印记分析表明PSF能够在大肠杆菌中以可溶性形式表达。凝胶阻滞分析显示,原核表达的PSF融合蛋白在体外条件下能够与mVL30-1 RNA结合,表明PSF的原核表达产物很可能具有完整的生物学活性。为进一步研究PSF蛋白的生物学功能奠定了基础。
- 王慧娟兰洋刘涛李灵
- 关键词：肿瘤原核表达
- 人PSF蛋白结合长非编码RNA的筛选及鉴定被引量：2
- 2011年
- 通过RNA亲和层析(RNA affinity chromatograph),4种可能与人PSF(human polypyrimidinetract-binding protein-associated splicing factor,hPSF)蛋白结合的长非编码RNA(1ong non-coding RNA,lncRNA)片段在人黑色素瘤细胞yusac细胞核RNA文库中被筛选得到.它们分别定位于人内源性逆转座子L1PA16、MER11C、非编码基因MALAT-1以及一个未知基因(unknown gene).紫外交联分析(UV cross-linking assay)证明在体外条件下这4种lncRNA片段均能与PSF蛋白结合;RNA免疫沉淀(RNA immunoprecipitation,RNA-IP)进一步证实在体内条件下这4种lncRNA均能与hPSF发生相互作用.最后,半定量RT-PCR表明,未知lncRNA特异高表达于人黑色素瘤细胞,其余3种lncRNA在多种人类肿瘤细胞中的丰度均较正常细胞明显升高.
- 兰洋王慧娟刘涛李灵
