王小兰
- 作品数：50 被引量：78H指数：5
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- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程轻工技术与工程更多>>
- 广东道地中药何首乌的组织培养被引量：4
- 2010年
- 以广东德庆何首乌为试材,研究叶片的愈伤组织诱导分化及茎尖的增殖快繁技术。结果表明:以MS为基本培养基,2,4-D是诱导愈伤组织的必需激素,1～2 mg/L有利于叶片愈伤组织诱导;分化培养基BA1～2 mg/L+NAA0.5～1 mg/L浓度组合分化能力低,未分化成芽;培养基BA2 mg/L+NAA0.5 mg/L对茎尖不定芽的诱导效果较好;生根培养基1/2 MS,生根率100%。
- 姚焱汪珍春王小兰张平田长恩
- 关键词：何首乌道地药材快繁
- 褐飞虱诱导的水稻RH3基因的克隆及其表达特性被引量：2
- 2003年
- 组蛋白H3基因的表达与个体发育、细胞组织特异性以及胁迫反应等相关.在褐飞虱取食后的水稻cDNA差减文库中筛选到编码水稻组蛋白H3(RH3)的EST(GenBank登录号:BU572343),以该EST为探针,从褐飞虱取食后的水稻CDNA文库中分离到RH3基因的全长。DNA.该基因编码一个含136个氨基酸残基的H3蛋白,与以前克隆出的一种抗病相关蛋白基因(GenBank登录号:AF467728)只有1个碱基的差异,蛋白质的氨基酸序列第 126位上由赖氨酸取代了天冬氨酸.应用 Northern blot技术,研究了褐飞虱取食后不同时间段水稻RH3基因的表达水平,同时分析了植物激素、干旱、盐胁迫及机械损伤等因素对其转录水平的影响.结果表明,褐飞虱取食8 h后 RH3基因表达开始增强,96 h后达到峰值.干旱处理和稻瘟病菌接种能诱导RH3基因的表达增强,而脱落酸处理则对该基因的表达起负调控作用.利用 RNA原位杂交技术,对接种褐飞虱48 h后水稻的茎叶切片进行了 RH InRNA的原位定位.结果显示,在褐飞虱取食后,RH3基因的转录本在维管束及短细胞中的积累尤其明显.水稻组蛋白H3基因的表达与水稻对褐飞虱的应激反应相关.
- 王小兰翁清妹游艾青祝莉莉何光存
- 关键词：水稻克隆基因表达防卫反应组蛋白H3
- DNA条形码快速鉴定广州常见菊花蚜虫被引量：5
- 2013年
- 为了探讨DNA条形码技术在花卉害虫防治时用于蚜虫物种的快速、准确鉴定的可行性,本研究利用条形码通用引物扩增了危害广州市常见菊花品种的2种蚜虫,桃蚜Myzus persicae（Sulzer）和棉蚜Aphis gossypii Glover的DNA条形码。通过分析获取的2种43个样本的线粒体细胞色素C氧化酶亚基I（mitochondrial cytochrome c oxidase subunit I,COI）基因658 bp序列后发现,碱基平均含量为39.8%T,14.3%C,35.3%A,10.6%G,其中A＋T含量为75.1%,C＋G含量为24.9%,存在明显的A、T碱基偏好性,符合昆虫线粒体基因碱基组成的基本特征;有保守位点551个,可变位点62个,简约位点56个,单个突变位点6个。序列饱和性检验分析结果显示该序列转换与颠换未达到饱和,因此可以进行基于Kimura双参数模型的种内种间遗传距离分析。所有样品的种内平均差异为0.08%（0.00%~1.20%±0.18%）,种间平均序列差异为9.69%（9.60%~10.30%±0.13%）。同时,邻接法（neighbor-joining,NJ）构建的系统发育树显示采自不同地区不同菊花品种上的桃蚜和棉蚜分别聚为一支。因此,本研究证明应用基于COI基因片段的DNA条形码进行花卉常见蚜虫类害虫的快速鉴定具有可行性。
- 汪珍春王小兰郑毅胜周伯春姜立云
- 关键词：蚜虫DNA条形码线粒体COI菊花
- 拟南芥光敏色素A反义RNA载体的构建及转化被引量：1
- 2009年
- 光敏色素A是植物远红光信号的关键受体,在植物光信号转导途径中起重要作用。一些具有重要功能的基因(如生长素反应因子8:auxin response factor 8,ARF8)受到PhyA调控。本实验拟通过构建PhyA基因反义株系,研究PhyA调控ARF8等重要功能基因表达的机理。以培养7 d的拟南芥幼苗为材料提取RNA,利用RT-PCR技术扩增出PhyA的全长CDS,将其反向插入表达载体pMD1得到反义表达载体pMD1-PhyA CDSR,并通过农杆菌介导转化拟南芥,经卡那霉素抗性平板筛选和PCR鉴定得到13个PhyA转基因株系。pMD1-PhyA CDSR及其转基因株系的获得为研究PhyA调控ARF8等基因表达的机理奠定了材料基础。
- 王海王小兰周玉萍段俊田长恩
- 关键词：反义表达载体拟南芥
- 用物性分析仪检测鸭梨和京白梨果实采后质地的变化被引量：6
- 2013年
- 采用物性分析仪测定鸭梨（Pyrus bretschneideri Rehd.‘Yali’）和京白梨（Pyrus ussuriensis Maxin.‘Jingbaili’）果实质地参数的变化,分析其质地构成和变化特性。结果表明：硬度、破裂力、弹性、咀嚼性、粘附性和内聚性参数可较好地评价梨果实质地构成和变化。鸭梨果实各质地参数值变化很小,硬度与破裂力极显著正相关,二者均与咀嚼性极显著正相关,其它参数间的相关性均未达到显著水平。京白梨果实各质地参数值变化较大,硬度与破裂力极显著正相关,二者均与粘附性呈极显著负相关,与弹性和咀嚼性显著正相关;咀嚼性与粘附性亦显著正相关。硬度、破裂力、弹性和咀嚼性是评价质地的主要参数,粘附性和内聚性则反映了质地的细微变化。
- 刘顺枝黄忠胡位荣江月玲王小兰
- 关键词：果实
- At3g13600截短型蛋白的原核表达载体的构建被引量：1
- 2011年
- 拟南芥基因At3g13600编码一种钙调素结合蛋白,序列分析表明,该基因cDNA序列全长1 818 bp,编码一个具有606个氨基酸残基的多肽,推测分子量为68.9 kD;在At3g13600蛋白的N端存在IQ钙调素结合构象.为了从实验上进一步研究该蛋白的钙调素结合特性,通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增含IQ序列与否的不同长度的编码区cDNA序列,构建到原核表达载体pET32 a+中.测序结果表明:目的序列已正确克隆到表达载体上,为进一步表达目的蛋白及研究其功能奠定了基础.
- 王小兰周宇彭慧峰刘顺枝田长恩
- 关键词：钙调素结合蛋白表达载体构建
- 八氢番茄红素合成酶(PSY2)基因果实特异表达载体的构建被引量：1
- 2010年
- 八氢番茄红素合成酶是番茄红素合成的关键酶,通过PCR法获取PSY2基因和E8启动子序列,将目的基因和E8启动子序列构建到植物表达载体pBI101.2中,构建了果实特异表达启动子的八氢番茄红素合成酶基因植物表达载体。并采用PCR、限制性内切酶酶切和序列测定分析法,对重组质粒进行鉴定。结果表明,番茄果实特异性表达PSY2蛋白的重组质粒构建成功;通过农杆菌直接转化技术将其成功转入转化农杆菌LBA4404、EHA105,为下一步PSY2蛋白在番茄果实中特异表达奠定了基础。
- 刘顺枝朱雪娇杨礼香王小兰
- 关键词：果实特异性启动子
- 水稻OsWRKY78与GFP融合基因的拟南芥转化及亚细胞定位
- 2012年
- [目的]确定OsWRKY78蛋白在植物中的定位。[方法]根据GenBank数据库中OsWRKY78全序列设计引物,进行OsWRKY78的RT-PCR扩增,克隆了OsWRKY78基因,将该片段与带绿色荧光蛋白(GFP)基因的质粒载体pBinGFP重组,并对重组载体进行菌液PCR和酶切验证,最后利用农杆菌介导的花蕾浸泡法将重组载体转化到拟南芥中,对其亚细胞定位进行研究。[结果]试验克隆得到了pBinGFP-OsWRKY78重组载体,经菌落PCR与酶切检测表明构建的表达载体正确,其转化到拟南芥中后得到了转基因植株,荧光显微镜检测结果表明,OsWRKY78基因表达产物主要定位在细胞核中。[结论]该研究结果为深入研究OsWRKY78基因的功能及其在相关信号传导中的作用奠定了基础,也为进一步研究OsWRKY78基因与褐飞虱之间的关系提供了理论依据。
- 刘顺枝张美唐馨王小兰
- 关键词：绿色荧光蛋白基因亚细胞定位
- 水稻OsWRKY17基因定位表达载体的构建(英文)
- 2012年
- [目的]研究水稻OsWRKY17基因的生理生化特性,确定OsWRKY17蛋白在植物中的定位。[方法]根据GenBank数据库中OsWRKY17全序列设计引物,进行OsWRKY17的RT-PCR扩增,克隆了OsWRKY17基因,将该片段与带绿色荧光蛋白(GFP)基因的质粒载体pBinGFP重组,将构建正确的表达载体pBinGFP-OsWRKY17通过农杆菌介导的花蕾浸泡法转化到拟南芥中。[结果]经菌落PCR与酶切鉴定表明成功构建了Os-WRKY17基因与GFP融合的植物表达载体pBin-GFP/OsWRKY17,并成功将OsWRKY17基因整合到拟南芥的基因组中,获得了抗性植株。[结论]OsWRKY17基因表达载体的构建为研究该基因的生理生化特性奠定了基础。
- 王小兰唐馨刘忠渊
- 关键词：GFP基因
- 炔诺酮暴露下斑马鱼候选生物标志物筛选研究
- 2023年
- NET(炔诺酮,Norethindrone)是一种人工合成的孕激素,被广泛应用于医学和畜牧养殖。近年来国内外不断报道的从环境中检测到的NET对鱼类的肝脏和内分泌均产生干扰效应。为了寻找水环境中的NET对鱼类影响的生物标志物(Biomarkers),以成年雌性斑马鱼为动物模型,暴露于500 ng·L^(-1)NET后60 d,采集肝脏,运用非靶向HPLC-TOF-MS的方法,分析了斑马鱼肝脏代谢物在负离子模式条件下的变化。结果表明:(1)经500 ng·L^(-1)NET暴露的处理组与0 ng·L^(-1)的对照组在PCA分析中分别聚集并明显分开,说明NET对斑马鱼的肝脏代谢存在明显干扰作用。(2)代谢通路分析说明NET暴露显著影响了斑马鱼肝脏的硫胺素代谢、甘油磷脂代谢和花生四烯酸代谢过程;另外,差异代谢物网络关系图也显示磷脂和脂肪酸成分影响较大,这与代谢物磷脂成分(PA、PC和PI等)和溶血磷脂(LysoPC)在NET处理后发生显著性变化的结果相一致,推测NET可能影响了生物膜系统的结构和功能。(3)对鉴定的差异代谢物以VIP>1作为潜在标志物的筛选依据,发现有代谢物3-甲基硫代丙酸和LysoPC(14:1(9Z))可能是NET对斑马鱼肝脏影响的潜在生物标志物。本研究为评价NET的生态风险提供了数据支持。
- 谭芷晴桂林李新昌王小兰
- 关键词：炔诺酮斑马鱼代谢组学生物标志物
