王家传
- 作品数：7 被引量：31H指数：3
- 供职机构：安徽医科大学病原生物学教研室安徽省基因研究重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 日本血吸虫酪氨酸羟化酶基因的克隆和序列分析被引量：2
- 2005年
- 目的 克隆并鉴定日本血吸虫酪氨酸羟化酶(TH)基因,探讨其他信号蛋白在信号传导中对TH的调节及其之间的分子作用机制,从而为血吸虫新型疫苗的设计和药物开发开辟新的途径。 方法 以曼氏血吸虫的 TH cDNA为模板设计引物,以日本血吸虫成虫mRNA为模板逆转录合成cDNA链,将扩增出的日本血吸虫TH蛋白编码基因序列,克隆入 pGEM T easy载体,用单酶双切法和DNA测序进行鉴定,并与曼氏血吸虫的TH基因序列进行同源性比较。 结果 自日本血吸虫RNA经逆转录得到一长度为 480 bp的 DNA片段,经测序与曼氏血吸虫 TH的同源性为 87%。结论 成功扩增出日本血吸虫TH的中间编码区域,为进一步扩增日本血吸虫TH基因全长以及后续实验奠定了基础。
- 胡元生沈继龙汪学龙钟政荣沈继录李小月王家传江宝玲倪婧
- 关键词：酪氨酸羟化酶基因克隆信号转导
- 重组日本血吸虫26ku谷胱甘肽-硫-转移酶的表达、纯化及其免疫特性分析用于急性血吸虫病免疫诊断被引量：15
- 2005年
- 目的将日本血吸虫(中国大陆株)26ku谷胱甘肽硫转移酶(26kuSjGST)基因克隆入pET28a(+)并诱导表达26kurSjGST蛋白,纯化并用于急性血吸虫病免疫诊断。方法构建重组质粒pET28aSjGST,转化到E.coliBL21,经IPTG诱导表达并进行SDS变性蛋白质电泳,以小鼠抗GST单克隆抗体为一抗,进行Westernblot分析。用His·BandPurificationKit亲和层析纯化重组蛋白,以此重组蛋白作为抗原,用ELISA法检测急性血吸虫患者血清和非流行区正常人血清。结果成功地构建了重组质粒pET28aSjGST,SDS变性蛋白质电泳显示可见一与预期分子量大小相符的特异蛋白条带的表达。Westernblot分析表明,该重组蛋白能被小鼠抗GST单克隆抗体识别。ELISA结果表明,rSjGST用于急性血吸虫患者血清中抗体检测的阳性率为92.3%。结论rSjGST得到表达和纯化,该重组蛋白用于急性血吸虫患者血清中抗体的检测具有良好的免疫反应性,为进一步探讨其在血吸虫病诊断中的应用奠定了基础。
- 罗庆礼沈继龙汪学龙刘淼胡元生钟政荣王家传袁小松
- 关键词：谷胱甘肽转移酶
- 一个弱毒株弓形虫新基因的发现
- 弓形虫是细胞内的寄生原虫,对免疫功能受损者和孕妇造成危害严重,而在免疫功能正常的人群感染后多呈无症状的带虫状态。免疫血清诊断是当前弓形虫感染实验室诊断的主要手段,目前尚无实用的分子疫苗。有关弓形虫强毒RH株的抗原及抗感染...
- 王家传蒋作君沈继龙汪学龙
- 关键词：弓形虫弱毒株CDNA文库
- 文献传递
- 日本血吸虫病多价混合疫苗研究进展被引量：5
- 2004年
- 血吸虫病是严重危害人类健康的人兽共患性寄生虫病,流行亚洲、非洲、拉丁美洲的75个国家,世界上约有2亿人受到感染,5-6亿人受到威胁.目前虽有化疗药物吡喹酮应用于临床,且有很强的杀灭成虫作用,但吡喹酮治疗不能阻断血吸虫的传播,无法降低再感染率,需要进行反复的化疗.而长期反复的化疗不但费用较高,而且有引起血吸虫产生抗药性的危险.疫苗作为化疗的辅助手段在血吸虫病防治上起到很重要的作用,是当前血吸虫病防治研究的重点内容.
- 王家传沈继龙蒋作君
- 关键词：日本血吸虫病疫苗研究多价血吸虫病防治吡喹酮治疗化疗药物
- 弓形虫RH株速殖子cDNA文库的构建、免疫学筛选及阳性克隆鉴定
- 目的:构建弓形虫RH株速殖子cDNA文库并用慢性感染的小鼠血清对其进行免疫学筛选,以寻找有效的疫苗候选分子和早期诊断弓形虫病的试剂。方法:收集、纯化弓形虫RH株速殖子,提取总RNA,逆转录生成cDNA,PCR合成cDNA...
- 王家传
- 关键词：弓形虫CDNA文库免疫学筛选
- 文献传递
- 重组人14-3-3zeta亚型单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用被引量：3
- 2005年
- 目的制备重组人14-3-3zeta亚型单克隆抗体(McAb),并检测14-3-3蛋白在人体组织器官的分布。方法将筛选出分泌抗人14-3-3zeta的杂交瘤细胞注射入BALB/c小鼠腹腔,制备腹水McAb,用辛酸-饱和硫酸铵沉淀法纯化,并鉴定其效价、纯度、浓度、特异性以及与天然抗原的亲和力,再用此单抗检测14-3-3蛋白在人体组织器官的分布。结果腹水及纯化后的单克隆抗体的效价分别为1∶107和1∶106。纯化后的纯度达97%,浓度为5mg/ml,能识别天然的人14-3-3蛋白,并能有效地识别兔和鼠脑组织的14-3-3蛋白。在人脑、肾、肺、肝、胃、卵巢、乳腺、结肠、胰腺等组织器官中,均检出14-3-3蛋白。结论已成功制备出重组人14-3-3zeta亚型单克隆抗体,并应用于实际检测,为研究14-3-3蛋白在机体生理和病理情况下的作用机制奠定了基础。
- 钟政荣沈继龙汪学龙胡元生沈继录王家传李小月
- 一个具有诊断价值的弓形虫基因的发现被引量：6
- 2005年
- 目的用弓形虫成囊株感染的小鼠血清筛选弓形虫RH株速殖子cDNA文库,以寻找诊断弓形虫病的抗原基因。方法收集成囊株(Prugniaud株)慢性感染的小鼠血清,经滤膜吸附法去除大肠杆菌抗体,筛选弓形虫RH株速殖子cDNA文库。对3次复筛得到的阳性克隆进行插入片段的核苷酸序列测定,结果送GenBank进行同源性分析。根据序列测定结果,选取其中1个具有完整开放阅读框架的基因进行分析。结果获得4个持续阳性反应克隆。测序和同源性分析显示,WT1为弓形虫P30基因;WT4为弓形虫N-乙酰磷酸丙糖转移酶基因;WT9与已知的基因无同源性。WT12克隆基因与一未知的弓形虫基因有很高的同源性,且具有1个513bp大小的完整开放阅读框架,其蛋白质结构和功能预测可能是个跨膜信号蛋白。结论筛选得到的1个阳性克隆有望成为早期诊断抗原基因,值得进一步研究。
- 王家传蒋作君沈继龙汪学龙
- 关键词：弓形虫CDNA文库免疫学筛选
