王向柳
- 作品数:3 被引量:3H指数:1
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- 牛源无乳链球菌CAMP因子(cfb)的克隆及原核表达被引量:1
- 2009年
- 提取能产生CAMP反应的牛源无乳链球菌山东分离株的基因组DNA,PCR扩增CAMP因子基因,重组到pMD18-T载体中。测序结果表明,扩增片断含有768 bp的ORF,可编码含255个氨基酸的成熟蛋白,与已报道的无乳链球菌CAMP因子蛋白的氨基酸组成相比,第8位Tyr→Cys,第95位Pro→Ser,第126位Thr→Ala的3个氨基酸发生了点突变,同源性为98.4%。成功构建原核表达载体pET32a+/cfb,SDS-PAGE分析蛋白质表达水平,IPTG诱导后表达的融合蛋白分子量为48 kD,表达量占菌体总蛋白的52.7%。这为进一步研究其致病与免疫机理、疫苗设计提供了条件。
- 王向柳王长法杨宏军阿合买提·买买提高运东仲跻峰
- 关键词:无乳链球菌克隆
- 无乳链球菌CAMP因子(cfb)的克隆及原核表达质粒的构建被引量:1
- 2008年
- 提取无乳链球菌的基因组DNA,PCR扩增CAMP因子基因,重组到PMD18-T载体中。测序结果表明,扩增片断含有768bp的ORF,可编码含256个氨基酸的成熟蛋白,与已报道的无乳链球菌CAMP因子蛋白的氨基酸组成同源性为98.4%。挑选阳性菌落经PCR鉴定和酶切鉴定后表明成功构建原核表达载体pET32 a+/cfb。这为进一步研究其致病与免疫机理、疫苗设计提供了条件。
- 王向柳王长法杨少华杨宏军阿合买提.买买提高运东仲跻峰
- 关键词:无乳链球菌克隆
- 奶牛乳腺炎三联苗田间试验及牛源无乳链球菌CAMP因子的克隆表达
- 用筛选到的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌疫苗株甲醛灭活后,选用合适的佐剂制备乳腺炎三联苗,经过理化性质鉴定、无菌检验和安全检验。对小鼠免疫三次后采血,用全菌包被ELISA试验检测鼠血清抗体,结果表明采用油佐剂制成的...
- 王向柳
- 关键词:三联灭活疫苗田间试验克隆表达
- 文献传递