王兴冈
- 作品数：10 被引量：14H指数：3
- 供职机构：复旦大学附属中山医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金上海市自然科学基金更多>>
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- 髓系触发受体-1在柯萨奇病毒B3导致的炎症反应及心肌细胞损伤中作用的实验研究被引量：4
- 2012年
- 目的通过体外观测柯萨奇病毒B3（CVB3）感染后髓系触发受体-1（TREM-1）在巨噬细胞中的表达，进一步探讨病毒性心肌炎炎症损伤的作用机制。方法CVB3感染巨噬细胞后，按感染时间进行分组，检测各组TREM-1mRNA的转录情况（具体分为0h、1h、4h、8h和12h组），免疫印迹法检测TREM-1及其下游分子DAP-12蛋白的表达（具体分为0h、16h、24h和48h组），用LP-17阻断TREM-1作为干预组，与单纯CVB3感染组（24h）和不感染CVB3的对照组比较，酶联免疫吸附法检测巨噬细胞分泌蛋白肿瘤坏死因子α（TNF—α）的量，用CCK8和AnnexinV-FITC观察与巨噬细胞上清共培养后的心肌细胞的活力和凋亡。结果CVB3感染后4h组TREM-1mRNA表达量高于0h组（但差异无统计学意义），8h组和12h组则显著高于0h组（P均〈0．01），16h组和24h组TREM-1蛋白表达水平显著高于0h组（P均〈0．01）。CVB3感染24h组和48h组TREM-1的下游信号分子DAP-12的蛋白表达也显著高于0h组（P均〈0．01）。LP-17干预组巨噬细胞分泌的TNF-α的量明显少于CVB3感染组（24h）（P〈0．01）。LP-17干预组心肌细胞的活力显著高于CVB3感染组（24h）（P〈0．01），细胞凋亡少于CVB3感染组（24h）（P〈0．01）。结论CVB5通过诱导巨噬细胞中TREM一1的表达产生过度的炎症反应，进一步引发心肌细胞的间接损伤是急性病毒性心肌炎的发病机制之一。
- 张娴王兴冈解玉泉谢烨卿刘旭杰李明辉虞勇郭棋陈瑞珍
- 关键词：心肌炎巨噬细胞
- 心脏微血管内皮细胞在病毒性心肌炎向心肌病转化中的作用
- 目的反复的病毒感染促进了心肌炎向心肌病转化,柯萨奇病毒(CVB3)目前是最常导致心肌炎的一种病毒。CVB3感染后进入血液循环,再由心脏微循环透过心脏微血管内皮细胞,而感染心肌细胞。本研究探讨了首先感染CVB3病毒的微血管...
- 谢烨卿陈瑞珍李明辉张娴解玉泉王兴冈虞勇郭棋陈灏珠
- 文献传递
- 病毒性心肌炎心肌细胞凋亡研究进展被引量：4
- 2009年
- 王兴冈陈瑞珍
- 关键词：病毒性心肌炎心肌细胞凋亡病例对照研究柯萨奇病毒发病早期心血管
- Calpain通过调节Th1细胞、Th17/Treg细胞、NKT细胞功能促进CVB3致病毒性心肌炎
- 虞莹虞勇王兴冈李明辉刘桂剑陈瑞珍
- 柯萨奇B组病毒实时荧光定量PCR标准品
- 本发明公开了一种柯萨奇B组病毒实时荧光定量PCR标准品，其为通过将SEQ ID NO:1连接在T载体上得到的重组质粒。该重组质粒具有较高的稳定性和重复性，作为标准品绘制的RT PCR标准曲线具有较高的扩增效率和良好的线性...
- 陈瑞珍虞勇虞莹王兴冈邹云增葛均波
- 文献传递
- microRNA在柯萨奇B3病毒诱导的心肌微血管内皮细胞凋亡中的差异表达被引量：4
- 2014年
- 目的本研究通过体外培养心脏微血管内皮细胞(CMVECs),经柯萨奇B3病毒(CVB3)感染后,利用miRNA寡核苷酸基因芯片技术筛选差异表达的miRNAs,进一步探讨miRNA在CVB3诱导CMVECs凋亡中的潜在作用机制。方法原代分离培养大鼠CMVECs细胞,以100TCID50CVB3病毒感染48 h后检测Caspase-3活性和细胞凋亡;提取CMVECs细胞RNA,用Agilent大鼠miRNA寡核苷酸基因芯片进行检测,并通过TargetScan、miranda、mirbase和mirdb数据库选取出差异表达明显并与心血管疾病相关的miRNA,经qPCR对其进行验证,通过生物信息学分析预测其调控靶基因;合成miRNA21 mimics转染CMVECs细胞,同时合成miRNA21 inhibitor,与CVB3共转染CMVECs细胞,检测各组细胞Caspase-3活性变化和细胞凋亡。结果 CVB3感染CMVECs细胞48 h后与正常对照组比较Caspase-3活性显著上调(P<0.01),细胞凋亡明显增加;通过基因芯片检测及生物信息学分析后发现,与心血管系统疾病密切相关的miRNA为miRNA21,经qPCR验证结果一致,预测其靶基因为PDCD4;miRNA21mimics转染CMVECs细胞后与正常对照组相比Caspase-3活性显著上调,细胞凋亡增加(P<0.05);而miRNA21 inhibitor与CVB3共转染CMVECs细胞后与CVB3感染组相比Caspase-3活性显著下调,细胞凋亡明显减少(P<0.05)。结论 miRNA21在CVB3感染的CMVECs细胞中的表达有显著变化,并与CMVECs细胞凋亡密切相关,提示miRNA21在CVB3诱导的病毒性心肌炎发病过程中可能起着重要作用。
- 虞勇虞莹王兴冈邹云增陈瑞珍
- 关键词：柯萨奇B3病毒心脏微血管内皮细胞
- Calpain在柯萨奇B3病毒导致心肌纤维化发生过程中的作用
- 李明辉王兴冈解玉泉张娴陈瑞珍
- 鞘磷脂酶在柯萨奇病毒B3感染心肌细胞中的作用被引量：2
- 2010年
- 目的检测柯萨奇病毒B3(CVB3)感染心肌细胞后鞘磷脂酶活性的变化、鞘磷脂酶mRNA、CVB3RNA的表达、病毒滴度的变化及心肌细胞表型的变化。初步探讨鞘磷脂酶在CVB3感染的心肌细胞中的作用。方法 CVB3感染心肌细胞后不同时间点,用薄层色谱法(TLC)检测鞘磷脂酶活性;用Real time-PCR检测心肌细胞中鞘磷脂酶mRNA与CVB3RNA的表达;同时取细胞培养上清液检测CVB3滴度。用Annexin V-FITC,PI双染法观察心肌细胞表型变化。设正常心肌细胞对照组,每个时间点设三个复孔。结果病毒感染组与正常心肌细胞相比,酸性鞘磷脂酶在4h、12h时活性有升高,其mRNA表达在2h时有升高趋势(P<0.05);中性Mg2+非依赖性鞘磷脂酶活性在4h时有明显升高,在12h时活性下降,而其mRNA表达在20h时升高(P<0.05);中性Mg2+依赖性鞘磷脂酶活性于病毒感染后4h、12h无明显变化,其mRNA表达在各组间也无明显变化。心肌细胞内病毒RNA表达在4h时有升高趋势,8h后开始明显升高(P<0.01)。CVB3病毒滴度在2h时明显升高(P<0.05)。心肌细胞在病毒感染2h后早期凋亡及坏死开始增加,4h时凋亡坏死增加更明显,到24h时坏死心肌细胞明显增多。以上实验均重复3次。结论中性Mg2+非依赖性鞘磷脂酶与酸性鞘磷脂酶在CVB3侵入心肌细胞及病毒的扩散增殖过程中可能起重要作用;而中性Mg2+依赖性鞘磷脂酶在此过程中可能不起作用。
- 王兴冈李明辉虞勇刘旭杰谢烨卿解玉泉张娴郭棋宿燕岗陈瑞珍
- 关键词：柯萨奇病毒B3心肌细胞
- 柯萨奇B3病毒诱导的心肌微血管内皮细胞凋亡中差异表达的microRNA初步筛选
- 目的:柯萨奇B3病毒(CVB3)感染是病毒性心肌炎的最常见原因.近期研究发现,CVB3等致病因子在攻击靶器官之前,诱导心肌微血管内皮细胞(MMVECs)凋亡,穿越受损心肌微血管向心肌组织迁移.通过初步筛选正常培养的MMV...
- 虞勇虞莹王兴冈邹云增陈瑞珍
- 鞘磷脂酶在柯萨奇病毒B3感染心肌细胞中的作用研究
- 病毒性心肌炎（viral myocarditis, VMC）是心血管系统常见病,多发病。虽然大多数预后良好,但约25%-30%的心肌炎患者仍可演变为扩张型心肌病（dilated cardiomyopathy, DCM）,...
- 王兴冈
- 关键词：CVB3心肌细胞病毒复制凋亡ERK
- 文献传递
