王佳鸣
- 作品数：12 被引量：27H指数：4
- 供职机构：张家港市崇实初级中学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 多参数复合分选表皮干细胞的初步实验研究被引量：4
- 2006年
- 目的探索多参数分选,以获得高纯度表皮干细胞(humanepidermalstemcells,hESCs)方法的可行性。方法收集3岁～6岁健康幼儿包皮,以DispaseⅡ和Tropsin分离、收集原代表皮细胞(5例),利用流式细胞仪(FACS)分别进行多种参数分选,即:CD49f+/CD71-表型的细胞分选;直径小于10微米的细胞分选。以及多参数复合分选,即:CD49f+/CD71-且细胞直径小于10微米细胞。对各组分选细胞及未分选细胞进行克隆形成率、细胞最大扩增能力、克隆形成面积的检测比较。计算各种分选方法所对应的细胞回收率。结果单参数分选的两组细胞之间在克隆形成率、细胞最大扩增能力、克隆形成面积三方面无统计学差异(p>0.05)。多参数分选得到的细胞与通过单参数分选的两组细胞均存在统计学差异(p<0.05)。结论利用多参数分选,能获得纯度更高的干细胞表型的表皮细胞。
- 邓辰亮王佳鸣崔磊杨光辉刘伟曹谊林
- 关键词：细胞分选表皮干细胞克隆形成率表皮细胞单参数细胞表型
- 组织工程化表皮膜片修复裸鼠创面的实验研究被引量：9
- 2004年
- 目的 构建组织工程化表皮细胞膜片并应用于修复裸鼠全层皮肤缺损创面。方法体外分离、培养、扩增人类表皮细胞,与壳聚糖-明胶膜构建表皮细胞膜片,用于修复裸鼠背部全层皮肤缺损创面,以单纯壳聚糖/明胶膜作为对照;术后行大体、组织学观察及免疫组织化学检测。结果 表皮细胞可以壳聚糖-明胶膜作为载体在体外培养,达到60％-70％亚融合状态时,移植人表皮细胞/壳聚糖-明胶膜到裸鼠全层皮肤缺损创面,人表皮细胞可以在创面存活并继续增殖分化,形成连续的表皮覆盖创面。结论人表皮细胞/壳聚糖-明胶膜是一种理想的组织工程表皮替代物。
- 杨光辉杨军邓辰亮王佳鸣崔磊刘伟曹谊林
- 关键词：表皮细胞创面愈合壳聚糖皮肤缺损
- 氨对人表皮角质细胞生长和代谢的影响被引量：6
- 2007年
- 目的了解人表皮角质细胞培养过程中,氨对细胞生长和代谢的影响。方法收集3～6岁健康幼儿包皮,以DispaseⅡ分离、收集原代细胞,角质化细胞专用无血清培养基(Keratinocyte-SFM)培养。待细胞培养至第4代,更换含不同氨浓度的培养基,考察细胞生长和代谢的变化。结果氨抑制了细胞的生长,当氨的浓度为9.23mmol/L时,脉冲培养结束时的活细胞密度(0.84×105个/ml)进一步下降,细胞存活率下降至54.5%;氨对细胞生长的抑制作用遵循二级抑制模型,其模型常数Ka为4.46(mmol/L)2,即当氨的浓度为2.11mmol/L时,细胞的比生长速率下降到最大比生长速率的50%。当氨浓度从1.23mmol/L增加到1.73mmol/L,细胞对葡萄糖的得率系数下降了48.0%,葡萄糖的比消耗速率上升了14.8%;与氨浓度为1.23mmol/L相比,9.23mmol/L的氨使乳酸对葡萄糖的得率系数增加了12.0%,乳酸的比生成速率增加了53.3%。氨浓度的增加明显改变了细胞的代谢,促进了细胞对葡萄糖的利用,消耗的葡萄糖更倾向于乳酸的生成。当氨浓度为9.23mmol/L,谷氨酰胺的比消耗速率和氨的比生成速率分别是氨浓度为1.23mmol/L的20.2%和6.2%。氨抑制了谷氨酰胺的消耗,谷氨酰胺在生成谷氨酸后经过脱氢途径的流量减少,更多地向转氨途径,即低效率的产能途径偏移。结论在人表皮角质细胞的培养过程中,应尽量减少氨的积累。
- 黄剑峰王佳鸣崔磊
- 关键词：代谢角蛋白细胞
- 好的开始是成功的一半——浅谈新课改形势下的地理课堂新课导入
- 2012年
- 一堂课的前一两分钟,学生还不能完全把注意力集中到课堂教学内容上来,这时,如果直接讲解新知识,将很难取得最佳效果。为了能给学生一种强烈的刺激,将他们极度兴奋的精神状态转移到最佳的学习状态上来,就要充分调动学生学习积极性,在新课导入这一环节就扣住学生的"心弦"。本文主要从新课导入的作用和特点出发,针对人教版初中地理教科书的不同章节,运用多种新课导入方法,说明新课导入对激发学生学习兴趣的重要性。
- 王佳鸣
- 关键词：新课导入方法
- 组织工程皮肤的基础和应用研究
- 曹谊林刘伟崔磊杨光辉杨军刘德莉邓辰亮王佳鸣
- 该项目从组织工程皮肤的种子细胞、生物材料、细胞-材料相容性以及组织工程皮肤的冷冻保存、临床应用等多个方面，系统进行了皮肤组织工程的研究与开发。在建立了人表皮角质形成细胞标准化体外培养扩增体系的基础上，系统研究了表皮角质形...
- 关键词：
- 关键词：皮肤基础和应用研究
- Y染色体ZFY基因检测在组织工程中的应用被引量：1
- 2005年
- 目的探讨人的Y染色体ZFY基因诊断在组织工程中的应用。方法对两种人的组织工程皮肤“替代物”进行RT-PCR检测,从mRNA水平检测Y染色体ZFY基因表达。用三条引物同时扩增,Y染色体可产生两个片断,X染色体产生一个片断。结果取男性细胞构建的表皮膜片修复女性皮肤缺损区的少量组织,可以检测到494bp和294bp两个条带;女性则494bp一个条带。检出率达100％(16／16)。用男性包皮角质干细胞构建的复合皮肤修复雌鼠全层皮肤缺损,取植入处少量组织检测到人的Y染色体494bp和294bp两个条带,且维持创面修复时间长达8个月。结论Y染色体ZFY基因诊断可作为组织工程皮肤替代物性别标记,且可以跟踪检测,具有特异、准确之优点。
- 刘德莉程新建杨军张杰王佳鸣吴娟娟刘伟
- 关键词：RT-PCR
- 培养在壳聚糖-明胶膜片材料上人黑色素细胞的生物学特性初步研究
- 2005年
- 目的研究培养在壳聚糖-明胶膜片材料上黑色素细胞的生物学特性。方法取幼儿包皮,酶消化成单细胞悬液,接种后在黑色素细胞条件培养液中静置培养。黑色素细胞纯化、扩增后接种于壳聚糖-明胶膜片上。定期观察细胞形态变化及生长增殖情况,应用MTT测定、黑色素瘤抗体(Melan-A)免疫荧光染色、DOPA反应以判断黑色素细胞在壳聚糖-明胶膜片上的增殖及分化情况。结果分离、纯化的黑色素细胞接种于壳聚糖-明胶膜片上生长良好,Melan-A免疫荧光染色及DOPA反应为阳性。结论壳聚糖-明胶膜片是支持人黑色素细胞生长的良好材料,这一体系为色素脱失症的治疗提供了新的途径。
- 王佳鸣杨光辉杨军邓辰亮崔磊刘伟曹谊林
- 关键词：黑色素细胞壳聚糖明胶
- 含黑色素细胞的表皮替代物构建及对色素脱失的疗效被引量：2
- 2008年
- 目的联合应用黑色素细胞和表皮细胞构建组织工程化表皮替代物,并应用于色素脱失治疗。方法利用幼儿包皮分离、培养和扩增出表皮细胞和黑色素细胞,接种于壳聚糖明胶膜,构建成含黑色素细胞的表皮膜片。建立裸鼠动物模型,将含黑色素细胞的表皮膜片移植于治疗组的受区,同时设立表皮细胞膜片为对照组。术后定期行大体观察、组织切片HE染色、抗S-100蛋白免疫组化染色,以检测黑色素细胞在创面的成活情况。结果联合应用人黑色素细胞和表皮细胞接种于壳聚糖/明胶膜能够构建出含黑色素细胞的表皮替代物,并应用于动物实验,检测出黑色素细胞成活良好。结论联合应用人黑色素细胞和表皮细胞接种于壳聚糖/明胶膜的表皮替代物能使色素脱失的动物模型恢复色素功能,对色素脱失具有良好的治疗效果。
- 沈海燕王佳鸣邓辰亮杨光辉张余光钱云良曹谊林崔磊杨军
- 关键词：表皮替代物黑色素细胞色素脱失
- 点滴渗透 培养中学生良好的行为习惯
- 2013年
- 中学生处于人生的关键时期,可塑性强,这时期习惯一旦养成,就会成为支配人生的一种力量,它决定了一个人的命运。班主任责任重大,几乎每天都埋在繁琐的事情堆里,如果不注意调整思路,往往力不从心,焦头烂额。养成良好的行为习惯,需要班主任在日常生活中点滴渗透,寓教育于生活。
- 王佳鸣
- 关键词：班主任
- 构建含黑色素细胞组织工程表皮的实验研究被引量：5
- 2008年
- 目的将黑色素细胞和表皮角质形成细胞,接种于壳聚糖-明胶薄膜材料上,构建含黑色素细胞的组织工程表皮。方法从小儿包皮分离黑色素细胞和表皮角质形成细胞,分别对黑色素细胞和表皮角质形成细胞进行鉴定,并进行不同代次细胞生长动力学检测。将黑色素细胞和表皮角质形成细胞接种于壳聚糖-明胶薄膜上,进一步检测两种细胞在材料上的生长情况。结果分离培养黑色素细胞和表皮角质形成细胞,经鉴定两者分别表达S-100和角蛋白。接种于壳聚糖-明胶薄膜上的黑色素细胞和表皮角质形成细胞能成功构建组织工程化表皮替代物。两种细胞在材料上生长状态良好,分布均匀,并表达各自特异性标志物。结论以壳聚糖-明胶薄膜材料作为支架材料,成体黑色素细胞和表皮角质形成细胞为种子细胞,能有效地构建含黑色素细胞的组织工程表皮。
- 张菊芳沈海燕王佳鸣杨军
- 关键词：黑色素细胞表皮角质形成细胞
