梁雪云
- 作品数：46 被引量：75H指数：4
- 供职机构：宁夏医科大学总医院更多>>
- 发文基金：宁夏回族自治区自然科学基金国家自然科学基金宁夏高等学校科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 嗅球和嗅黏膜来源的嗅鞘细胞对脊髓损伤小鼠的治疗效果比较被引量：6
- 2014年
- 目的体外分离、培养不同来源的嗅鞘细胞,并鉴定其生物学特性,比较不同来源的嗅鞘细胞生物活性,评价其对脊髓损伤模型小鼠的疗效的差异。方法差速贴壁法分别培养嗅球和嗅黏膜来源的嗅鞘细胞,免疫荧光染色检测该细胞特异性蛋白S100、P75的表达,并对二者生长曲线及在不同代次、不同浓度梯度条件下神经营养因子分泌情况进行检测,实时定量PCR(qRT-PCR)鉴定二者脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)、神经营养因子3(NT-3)、神经营养因子4(NT-4)、轴突膜蛋白生长相关蛋白43(GAP-43)、微管相关蛋白(MAP-2)基因表达,并分别将两种细胞移植入脊髓横断小鼠模型中,以小鼠神经功能评分及脊髓内移植细胞分布情况进行评估。结果所获得不同来源的嗅鞘细胞呈双极、三极样形态生长,且S100、P75蛋白表达均为阳性,嗅黏膜来源细胞不表达MAP-2,高表达GAP-43,嗅球来源的细胞低表达MAP-2和GAP-43,嗅球来源细胞生长活性大于嗅黏膜来源的细胞,其中嗅黏膜细胞来源分泌营养因子高于嗅球来源的细胞,小鼠神经功能评分显示嗅黏膜来源细胞治疗脊髓损伤模型效果明显高于嗅球来源的嗅鞘细胞。结论两种来源的嗅鞘细胞存在生物学差异,嗅黏膜来源细胞治疗脊髓损伤效果高于嗅球来源的嗅鞘细胞,可以作为临床应用的种子细胞。
- 王立斌杨萍梁雪云马丽君魏军
- 关键词：嗅鞘细胞嗅球嗅黏膜脊髓损伤
- 氧化苦参碱改善缺氧缺血引起的HaCaT细胞氧化应激损伤被引量：4
- 2021年
- 目的探讨氧化苦参碱(OMT)对缺氧缺血环境下角质形成细胞损伤的保护作用。方法选择体外培养的人角质形成细胞系HaCaT细胞,分为正常对照组(NC组)、模型组(HI组)、OMT低剂量组(0.05 g/L OMT组)、OMT高剂量组(0.1 g/L OMT组)4组。采用活细胞数量检测试剂盒CCK8检测HaCaT细胞增殖抑制率和活力,磷脂结合蛋白V(Annexin V)染色检测凋亡率,线粒体膜电位探针JC-1检测HaCaT细胞线粒体膜电位变化,2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)荧光探针法检测HaCaT细胞活性氧(ROS)水平,比色法检测HaCaT细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和总抗氧化能力(T-AOC)活力,Western blotting检测凋亡基因天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase 3)、Cleaved-Caspase 3、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)及TGF-β1/SMAD3通路蛋白的表达量。结果与NC组相比,HI组HaCaT细胞Ki67阳性率[(13.52±2.89)%,P<0.001)[和线粒体膜电位降低(0.54±0.03,P<0.001),凋亡细胞数量(13.83±0.81,P<0.001)、ROS水平(164.31±16.93,P<0.001)升高,细胞中GSH-Px(0.96±0.05,P<0.001)、SOD(0.67±0.06,P<0.001)和T-AOC(1.90±0.02,P<0.001)水平下降。0.05 g/L OMT干预后,HaCaT细胞Ki67阳性率[(57.98±9.81)%,P<0.001)]和线粒体膜电位升高(0.81±0.04,P<0.001),凋亡细胞数量(8.10±0.53,P<0.001)、ROS水平(175.94±15.75,P<0.001)降低,细胞中GSH-Px(1.04±0.05,P<0.001)、SOD(0.86±0.04,P<0.001)和T-AOC(2.08±0.03,P<0.001)水平升高;Western blotting结果显示:HI处理使HaCaT细胞中TGF-β1信号通路蛋白TGF-β1(1.15±0.14,P=0.010)、p-SMAD3(0.13±0.03,P=0.112)表达上调,凋亡信号蛋白Caspase-3(0.37±0.045,P=0.001)、Cleaved-Caspase 3(0.54±0.03,P=0.108)蛋白相对表达量较正常培养组均上调;添加0.05 g/L OMT处理后,与HI模型组相比,HaCaT细胞中TGF-β1(0.69±0.13,P=0.005)、p-SMAD3(0.07±0.01,P<0.001)、Caspase-3(0.21±0.041,P=0.006)、Cleaved-Caspase 3(0.29±0.054,P=0.016)蛋白相对表达量均下降,Bcl-2蛋白相对表达量升高(0.35±0.013,P=0.0
- 刘淑丹张飞燕郭松林梁雪云陈冬梅
- 关键词：氧化苦参碱角质形成细胞氧化应激
- 胎儿卵巢组织玻璃化冻存效果的研究被引量：4
- 2007年
- 目的探讨玻璃化冻存法对胎儿卵巢组织形态和功能的保存效果。方法采用改良EG5.5/30玻璃化液冻存胎儿卵巢皮质片,解冻后观察卵巢组织学变化,卵巢皮质片异种异位移植后,观察受体鼠动情周期恢复率、恢复时间、卵泡发育状况。结果实验组与新鲜培养后移植组、添加抗氧化剂培养后移植组相比动情周期恢复率差异无统计学意义(P>0.05),但高于新鲜移植组(P<0.005);动情周期恢复需要的天数接近于新鲜移植组,明显短于两种培养组(P<0.05);在卵泡计数上,实验组每高倍视野的卵泡计数明显高于新鲜移植组(P<0.005),与培养后移植组间的差异无统计学意义(P>0.05)。移植后18周,组织学观察见大量窦卵泡,而培养组仅偶见窦卵泡。结论玻璃化冻存法可有效冻存胎儿卵巢组织,且不影响卵泡继续发育的潜能。
- 王国平蔡玉芳王红燕梁雪云王燕蓉崔岫
- 关键词：胎儿卵巢组织玻璃化冻存
- 不同年龄人角化细胞的衰老特征评价被引量：1
- 2018年
- 目的评价年龄对衰老细胞模型的影响,以建立体外培养的衰老细胞模型。方法本研究根据供者年龄分为4组,每组3例生物学重复,<10岁、10～20岁、20～30岁和>30岁组。酶消化法体外分离培养不同年龄供体的表皮角化细胞。体外培养至P2代,进行以下检测:β-半乳糖苷酶染色鉴定衰老细胞数量;CCK-8和克隆形成试验检测细胞生长和增殖能力;磷酸化γ-H2A.X免疫荧光染色检测细胞DNA损伤;Western blot法检测分析细胞中周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白表达。结果各组衰老细胞数占总细胞数百分比分别为0.864%、0.789%、5.472%、8.765%,差异有统计学意义(P=0.000)。随着年龄的增加,HKCs细胞倍增能力下降,倍增时间延长。<10岁组中细胞核Phospho-Histone H2A.X表达细胞数量少,>30岁组人正常角化细胞内DNA双链断裂大量产生。同时,细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白2A(CDKN2A/p16^(INK4a))、p21、p53的表达随年龄增加而上调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论正常人角化细胞的增殖与衰老与人类年龄呈显著正相关,可以作为研究人类衰老的细胞模型。
- 杨婷婷陈冬梅刘淑丹马海滨马晓娜梁雪云
- 关键词：角化细胞细胞模型DNA损伤
- 短暂性脑缺血对C57BL/6小鼠海马区神经发生的影响被引量：1
- 2018年
- 目的:利用小鼠急性全脑缺血模型观察急性脑缺血对海马神经发生的影响。方法:将C57BL/6雄性小鼠(6~8周)随机分为脑缺血组和假手术组。采用双侧颈动脉结扎法建立短暂性全脑缺血模型;利用HE染色观察脑缺血后不同时间(1周,2周)海马区形态学变化;采用免疫组织荧光染色观察缺血后海马区caspase-3表达变化;利用Ed U染色观察缺血3 d、7 d、14 d和28 d后,海马区神经干细胞增殖变化;利用免疫组织荧光染色观察缺血3 d、7 d、14 d和28 d后,海马区nestin、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及少突胶质细胞特异蛋白(OSP)等蛋白表达变化,判断脑缺血对海马区神经干细胞分化的影响。结果:脑缺血7 d后,小鼠海马CA1区神经元数目减少,caspase-3阳性细胞增加(P<0.05)。海马DG区Ed U阳性细胞数量在第3 d开始增加(P<0.05),第1周达到峰值(P<0.05);海马CA1区Ed U阳性细胞数量在缺血后1周开始增加(P<0.05),缺血2周后逐渐降低。海马DG区nestin、GFAP及OSP阳性细胞数量均在缺血3 d后开始增加(P<0.05),缺血1周后达到峰值(P<0.05),2周后逐渐降低。海马CA1区GFAP及OSP阳性细胞数量在缺血3 d后开始增加(P<0.05),缺血1周后达到峰值(P<0.05),2周后逐渐降低。结论:脑缺血激活了海马DG区神经干细胞,使干细胞增殖,并向神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞分化,同时逐渐向CA1区迁移。
- 孙文青姚子昂金毅然马海滨牛建国何仲义梁雪云
- 关键词：脑缺血神经干细胞神经发生海马神经干细胞分化
- microRNA-451a在人结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞增殖的影响被引量：4
- 2018年
- 目的研究microRNA-451a(miR-451a)在结直肠癌中的表达并观察其对结直肠癌细胞增殖的影响。方法荧光定量PCR检测miR-451a在24例新鲜的结直肠癌组织样本及4株结直肠癌细胞系HCT116、LoVo、LS174T及SW480中的表达;将miR-451a及NC病毒转染HCT116细胞,荧光定量PCR检测转染后HCT116细胞中miR-451a的表达及细胞增殖、细胞周期相关基因的表达情况;CCK-8及平板克隆形成实验检测HCT116-451a和HCT116-NC细胞的生长增殖情况。结果与正常结直肠组织比较,miR-451a在结直肠癌组织中表达下调,与正常结直肠细胞系CCD-18Co相比,miR-451a在4株结直肠癌细胞系HCT116、LoVo、LS174T及SW480中表达均下调(P均<0.05)。CCK-8结果显示转染miR-451a的HCT116细胞增殖能力低于NC组,平板克隆形成实验显示与HCT116-NC比较,HCT116-451a组克隆数减少(P<0.05)。与HCT116-NC比较,HCT116-451a组增殖细胞核抗原Ki-67及细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达降低,细胞周期素依赖性激酶抑制因子(p21)表达增高(P<0.05)。结论 miR-451a在结直肠癌中低表达,上调miR-451a的表达可抑制结直肠癌细胞HCT116的生长增殖。
- 严秀蕊马海滨贾元元梁雪云
- 关键词：结直肠癌细胞增殖
- 解偶联蛋白2基因-866G/A,Ala55Val及Ins/Del多态性对宁夏回族人群血清抗氧化物质含量的影响分析被引量：1
- 2017年
- 目的以宁夏地区回族人群为研究对象,分析UCP2基因多态性对血清抗氧化物质含量的影响。方法收集宁夏地区回族正常人群及回族脑缺血患者外周血样本,提取外周血基因组DNA,采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性方法检测各样本UCP2基因-866G/A、Ala55Val及Ins/Del多态性,利用试剂盒检测血清抗氧化物质SOD、TAOC、GSH含量。结果宁夏地区回族健康人群中,UCP2基因-866位点GA基因型血清GSH值(125.78±4.55)U/L低于GG野生型基因型GSH值(130.35±10.68)U/L(P<0.05);脑缺血患者中Ins/Del位点组Ins/Ins基因型血清GSH值(108.71±8.30)U/L低于Del/Del基因型血清GSH值(116.43±8.24)U/L(P<0.05)。结论在一定条件下,UCP2基因-866G/A,Ins/Del多态性可能影响宁夏地区回族人群血清GSH值。
- 梁雪云姚子昂马斌武金毅然韩怀钦牛建国何仲义
- 关键词：解偶联蛋白2回族人群抗氧化物质
- 两种玻璃化法冻存小鼠卵巢的研究被引量：4
- 2008年
- 目的:探讨2种玻璃化法对小鼠卵巢组织、器官形态和功能保存作用的影响。方法:以改良的DMEM-F12为玻璃化液,分别采用常规玻璃化法(A组)和超速玻璃化法(B组)冻存小鼠卵巢组织及器官,解冻后通过组织学观察、卵巢组织异体、卵巢器官自体肾被膜下移植,观察动情周期恢复率、恢复时间、卵泡发育状况,并分别以新鲜卵巢组织异体移植、卵巢器官自体移植(C组)为对照,评价2种玻璃化法的冻存效果。结果:①A组、B组、C组卵巢组织异体移植小鼠动情周期出现率为100%,出现动情周期分别10.5±5.4d、8.0±2.2d、6.3±1.0d。A组与C组比,差异显著(P<0.05);B组与C组无差异,A组与B组间也无差异(P均>0.05)。②A组、B组、C组卵巢器官自体移植小鼠动情周期出现率为100%,出现动情周期分别为9.4±0.9d、6.9±1.1d、6.1±1.1d,A组与B、C组相比有统计学差异(P<0.05),而B组与C组间无差异(P>0.05)。移植存活的卵巢组织、器官内均可见不同发育阶段的卵泡,形态正常。结论:2种玻璃化法可有效地冻存卵巢组织及器官,但超速玻璃化法效果较优。
- 王国平王燕蓉梁雪云王红燕崔岫
- 关键词：卵巢器官玻璃化冷冻小鼠
- 不同冷冻方法对胎儿卵巢组织早期卵泡的影响被引量：1
- 2008年
- 目的观察不同冷冻方法对胎儿卵巢组织早期卵泡的影响。方法分别采用程序冷冻法(PFG)、快速冷冻法(RFG)、玻璃化冷冻法(VG)冻存胎儿卵巢组织,解冻后进行光镜、电镜观察。结果光、电镜组织形态学观察发现冻后各组卵泡结构均存在一定程度的冷冻损伤。冷冻后的胎儿卵巢内形态正常的卵泡数明显下降,在2 mm×2 mm×1 mm的卵巢皮质内,形态正常的卵泡数在PFG、RFG、VG及新鲜对照组(FCG)中分别为(992.3±618.2)个、(542.8±202.5)个、(1604.8±964.0)个和(1888.2±645.3)个。RFG卵泡数显著低于FEG与VG(P<0.05),但与PFG间差异无统计学意义(P>0.05)。结论三种冷冻方法均可有效冻存胎儿卵巢组织,其中玻璃化法对卵巢内早期卵泡的损伤最小,单位体积内保存的卵泡数最多。
- 王国平王燕蓉梁雪云崔岫孙静
- 一种低免疫原性组织工程皮肤构建方法
- 本发明公开了一种低免疫原性组织工程皮肤构建方法，属于生物工程技术领域，该方法方法采用人表皮干细胞和胎儿来源的胎盘间充质干细胞作为种子细胞，以牛I型胶原构建的3D基质作为支架，利用气液界面分离培养法复合构建为一种有活性的低...
- 陈冬梅杨银学魏军刘晓明刘淑丹梁雪云杨婷婷张耀林马晓娜马海滨严秀蕊刘婷
- 文献传递
