栾治东
- 作品数:5 被引量:23H指数:2
- 供职机构:辽宁医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金辽宁省科学技术计划项目辽宁省科技厅基金更多>>
- 相关领域:生物学文化科学农业科学医药卫生更多>>
- PBL教学在生物化学与分子生物学双语教学中的研究与应用被引量:18
- 2015年
- 生物化学与分子生物学是一门重要的基础医学课程。为了提高教师的教学水平与学生的学习兴趣,进而从整体上提升该课程的教学质量,我们尝试将PBL教学模式应用到生物化学与分子生物学双语教学中。通过研究实践发现这种教学模式不仅提高了学生的学习积极性,还提高了学生的自主学习与独立思考能力,加深了对学习内容的理解与掌握程度。
- 刘超栾治东王顺肖建英
- 关键词:生物化学与分子生物学PBL双语教学
- 苯丙氨酸羟化酶在日本刺沙蚕脑内的表达分析
- 2016年
- 苯丙氨酸羟化酶(PAH)是芳香族氨基酸羟化酶家族(AAAHs)的一员,催化苯丙氨酸(Phe)转化为酪氨酸(Tyr)。运用Western blotting技术检测沙蚕PAH免疫原性。制作沙蚕头部石蜡切片,运用免疫组织化学技术,检测PAH蛋白表达定位情况。解剖剥离沙蚕脑组织,提取总RNA,运用RT-PCR技术克隆pah基因片段,构建质粒并转化入大肠杆菌中扩增,挑单一均匀菌落培养,双酶切鉴定后测序并比对同源性。Western blotting结果表明pah表达的蛋白存在于沙蚕脑内,免疫组化标记技术结果表明苯丙氨酸羟化酶主要分布在日本刺沙蚕前脑中腹侧、中脑背侧和两侧。RT-PCR结果表明沙蚕脑内存在苯丙氨酸羟化酶基因,且与多种动物pah具有同源性。在蛋白质和核酸水平鉴定了低等环节动物日本刺沙蚕脑组织内苯丙氨酸羟化酶的存在,为进一步研究无脊椎动物中枢神经系统内芳香族氨基酸羟化酶的基因分化奠定基础。
- 任桂敏董哲刘超刘乙蒙栾治东刘琪暴学祥王顺
- 关键词:日本刺沙蚕苯丙氨酸羟化酶免疫组织化学RT-PCR
- 酵母双杂交技术筛选与蛋白激酶Wee1相互作用的蛋白被引量:5
- 2016年
- 目的应用酵母双杂交技术筛选出与Wee1蛋白激酶相互作用的候选分子,为进一步研究Wee1的分子功能提供理论基础。方法利用分子克隆的方法重组酵母双杂交质粒p GBKT7-Wee1,并验证其在酵母中的毒性、自激活能力和表达。利用酵母双杂交技术从人卵巢c DNA文库中筛选出与Wee1蛋白相互作用的蛋白,并在酵母中重新验证其相互作用。结果成功构建p GBKT7-Wee1诱饵质粒,验证了其无毒性及自激活能力,且可以在酵母中表达,可进一步进行酵母双杂交的筛选工作。结论利用酵母双杂交系统筛选出与Wee1相互作用的候选分子30个,为揭示蛋白激酶Wee1可能通过与其他蛋白相互作用进而调控细胞周期进程。
- 刘超刘乙蒙栾治东任丽莉孟智超肖建英
- 关键词:酵母双杂交
- 基因家庭Pax7与Ubc9基因编码蛋白相互作用研究
- 2014年
- 目的了解Pax7的重要生物学功能,筛选并验证与其相互作用的Ubc9基因编码蛋白,并明确Pax7与小泛素相关修饰蛋白(SUMO)的关系,为进一步研究Pax7的作用机制奠定基础。方法酵母双杂交系统筛选出与Pax7相互作用的基因Ubc9;GST-pull down方法验证Pax7与Ubc9在体外相互作用;Western blot方法检测Pax7的SUMO化状态;免疫共沉淀方法验证Pax7与SUMO的关系。结果 Pax7和Ubc9在酵母中存在相互作用;Pax7和Ubc9在体外可特异性结合;在Ubc9存在的条件下,Pax7呈现SUMO化状态,且可与SUMO相互作用;Pax7在鸡胚胎中也呈现SUMO化状态。结论 Pax7可以与Ubc9相互作用,且这种作用与SUMO有关。
- 刘乙蒙栾治东刘超李明洋肖建英
- 关键词:UBC9
- Ubc9对鸡胚神经嵴细胞发育的影响
- 2014年
- 目的探索Ubc9和SUMO通路对鸡胚神经嵴细胞发育的影响。方法 1)采集鸡胚,通过免疫荧光实验和原位杂交实验来检测SUMO结合酶Ubc9及神经嵴细胞标志基因的表达情况。2)设置对照组(非特异性吗啉代处理)和Ubc9-吗啉代组来处理各组8期鸡胚,随后通过原位杂交实验检测Snail2,Sox9和Fox D3等神经嵴细胞晚期标志基因的表达情况。结果 1)Ubc9与标志基因Pax7共表达于4、6和8期鸡胚神经嵴细胞前体。2)与对照组相比,Ubc9-吗啉代组鸡胚单侧上Snail2(P<0.05),Sox9(P<0.01)和Fox D3(P<0.05)的mRNA水平均有下降。结论Ubc9表达于4、6和8期鸡胚的神经脊细胞前体,鸡胚神经嵴细胞的形成需要SUMO通路参与。
- 李明洋刘乙蒙刘超李淑玲栾治东
- 关键词:鸡胚神经嵴细胞UBC9