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小分子硫醇对延边黄牛体细胞核移植重组胚发育的影响: 2010年; 探讨了在延边黄牛体细胞核移植重组胚早期培养液中添加L-半胱氨酸和β-巯基乙醇(β-ME)两种小分子硫醇类抗氧化剂,对其后续发育的影响,以期筛选出最佳的体外培养条件。结果表明:适合延边黄牛体细胞核移植重组胚后期发育的L-半胱氨酸和β-巯基乙醇的最佳浓度分别为0.6 mmol/L和50μmol/L。; 金花子尹多林涛韩岩李钟淑方南洙; 关键词：小分子硫醇延边黄牛体细胞核移植胚发育巯基乙醇

延边黄牛卵母细胞激活后第二极体排出的研究被引量：3: 2008年; 用乙醇激活不同卵龄(22 h,24 h,26 h,28 h,30 h)的延边黄牛卵母细胞,对第二极体的排出、鉴别以及核物质与第二极体位置关系进行了研究。结果:(1)延边黄牛卵母细胞第二极体排出率随卵龄的增加而增多,而且激活后培养3 h第二极体出现率最高。(2)第二极体的鉴别:根据第一极体退化残留物或第一极体分裂为2个小极体来鉴别第二极体;当2个极体同时存在时,第二极体体积略小、形状不规则。(3)通过Hoechst33342染色观察,核物质与第二极体几乎全部相邻。; 林涛李晓霞刁云飞祖晶方南洙; 关键词：延边黄牛卵母细胞

氨基酸对延边黄牛体细胞克隆重组胚发育的影响: 目的本次试验研究了培养液中添加氨基酸对延边黄牛体细胞克隆胚发育的影响,以期提高克隆重组胚的体外发育率。方法①在体外培养液中分别添加0 mmol/L,0.5 mmol/L,1.0 mmol/L,2.0mmol/L的谷胺酰胺...; 韩岩尹多林涛李钟淑方南洙; 关键词：延边黄牛克隆氨基酸; 文献传递

孕马血清促性腺激素对狗卵母细胞体外核成熟的影响被引量：6: 2008年; [目的]研究孕马血清促性腺激素(PMSG;eCG)对狗卵母细胞体外成熟效果的影响。[方法]采用切割法收集卵巢表面卵丘卵母细胞复合体(COCs),并且随机分为4组,在添加不同浓度的PMSG的基础培养液(含有10%胎牛血清的DMEM)中,5%CO2,38.5℃培养箱内培养48 h。在含有0.1%透明质酸酶的D-PBS中用细小玻璃管剥离卵丘细胞从而获得裸卵,为了鉴别核成熟期,用4%甲醛溶液固定裸卵15 min,然后用10μg/ml Hoechst33342染色、压片,荧光显微镜下观察核形态。[结果]体外培养48 h后,添加PMSG处理组卵丘扩散明显,但发育到MⅠ-MⅡ的比率都没有显著差异(P(0.05)。100 IU/ml PMSG处理组GVBD期率显著低于对照组。[结论]添加PMSG改善了卵丘扩散的效果,但是没有提高核成熟率,需进一步改进狗卵母细胞体外成熟率的培养体系。; 王坤林涛赵明辉高威威尹熙俊; 关键词：卵母细胞孕马血清促性腺激素

末期去核在牛体细胞核移植中的应用: 2009年; 受体卵母细胞的去核对核移植的效率起决定性作用。很多去核方法已经应用到体细胞核移植当中,并且成功地产生了核移植胚胎。通常我们使用第二次减数分裂中期(MⅡ期)的卵母细胞作为受体细胞进行去核,但是去核效率很低。虽然使用荧光染料和紫外线的照射来完成去核程序可以提高去核效率,但是这些措施有损害细胞质的危险。所以,一种避免使用DNA染料和紫外线照射又能提高去核效率的末期去核方法被发展起来了。本文详述了牛卵母细胞末期去核方法在体细胞核移植中的应用,为从事哺乳动物克隆研究的学者提供参考。; 林涛胡艳明祖晶李钟淑方南洙; 关键词：体细胞核移植卵母细胞

挤压去核法和盲吸去核法在延边黄牛体细胞核移植中的对比研究被引量：5: 2009年; 分别采用挤压去核法和盲吸去核法对延边黄牛卵母细胞进行去核处理,之后进行核移植,培养观察,比较两种去核方法对延边黄牛体细胞核移植效率的影响。挤压法的操作成功率和去核率明显高于盲吸法,盲吸法操作程序耗时比挤压法长,但是差异不显著。两种方法获得了相近的卵裂率和囊胚率,但挤压法构建的重组胚在囊胚数上高于盲吸法。挤压法在延边黄牛体细胞核移植上比盲吸法更有效。; 林涛方南洙宋君博孙焕林李钟淑; 关键词：核移植卵母细胞去核方法延边黄牛

牛卵母细胞显微操作机械去核方法的比较: 2009年; 分别采用挤压去核法、盲吸去核法和点击去核法对延边黄牛卵母细胞进行去核操作,在操作时间、成功率、去核率及重组胚后期发育等方面进行比较.结果表明,去核率上,盲吸法低于其他2种方法;去核成功率上,挤压法和点压法高于盲吸法;操作耗时上,挤压法和盲吸法耗时较短;3种方法所构建的重组胚卵裂率以及囊胚发育率均差异不显著.因此,挤压去核法是一种较适合延边黄牛卵母细胞去核的有效方法.; 姜成国林涛尹多李钟淑方南洙; 关键词：卵母细胞去核方法核移植

不同来源的牛皮肤成纤维细胞原代培养效果对核移殖胚发育的影响被引量：1: 2009年; 培养延边黄牛不同部位(耳部和腹部)和不同品种(黑白花、利木赞、延边黄牛)耳部的皮肤成纤维细胞,观察原代培养效果并用其核移植,探讨原代培养效果与囊胚发育率的关系。以组织块贴壁率、组织块发育率、组织块的细胞贴壁率作为原代培养效果的衡量标准;传3～5代后进行核移植,分别统计囊胚发育率。结果表明:延边黄牛腹部皮肤的生长效果明显好于耳部皮肤,并且囊胚发育率高于耳部皮肤。利木赞牛皮肤生长效果明显好于延边黄牛和黑白花,延边黄牛与黑白花差异不显著。与之对应,利木赞囊胚发育率显著高于延边黄牛与黑白花,延边黄牛与黑白花差异不显著。; 孙焕林方南洙胡艳明林涛刘佳丽孔金超李钟淑; 关键词：原代培养成纤维细胞核移植

抗氧化剂对牛重组胚发育的影响: 氧或含氧的高反应活性分子统称为活性氧(ROS)。虽然氧对一切需氧生物是不可或缺的,但是高浓度氧会引起氧中毒。氧中毒是由于氧在机体内大量地被转变为活性氧自由基,后者可以进攻和损坏细胞膜、蛋白质、酶和DNA等,最终导致细胞损...; 尹多林涛韩岩李钟淑方南洙; 关键词：抗氧化剂延边黄牛体细胞核移植; 文献传递

末期去核在延边黄牛体细胞核移植中的应用研究: 【目的】通常我们利用第二次减数分裂中期（MII）的卵母细胞进行去核操作，这种方法去核是盲目的，需要借助DNA染色和荧光紫外线的照射才能完成去核，为了提高延边黄牛体细胞核移植卵母细胞去核效率，我们采用末期（TII期）去核方...; 林涛; 关键词：卵母细胞延边黄牛体外成熟; 文献传递

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林涛