李茂中
- 作品数:4 被引量:6H指数:2
- 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金:黑龙江省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 汉坦病毒L基因的分段克隆及原核表达被引量:2
- 2012年
- 为原核表达汉坦病毒(HV)L蛋白,本研究根据HV 76-118株全长L基因序列分段设计合成了6对引物。通过RT-PCR方法分段扩增L基因的6个片段,分别克隆于原核表达载体pET-30a中,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。SDS-PAGE分析表明,获得与预期分子量一致的特异的目的蛋白。Western blot检测表明,重组蛋白与小鼠抗His标签单克隆抗体发生特异性反应。
- 李茂中刘家森郭东春姜骞林欢曲连东
- 关键词:汉坦病毒原核表达
- 人工感染兔出血症病毒兔肝脏的蛋白质组学分析
- 兔出血症(Rabbit hemorrhagic disease, RHD)是由兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic diseasevirus, RHDV)引起的兔的一种急性、败血性、高度接触性传染病,本病毒...
- 李茂中
- 关键词:蛋白质组学兔出血症病毒Α1抗胰蛋白酶VP60蛋白
- 文献传递
- 感染兔出血症病毒兔肝组织蛋白表达差异研究
- 提取感染组和对照组的兔肝脏总蛋白,采用双向凝胶电泳技术比较分析差异表达蛋白;经MALDI-TOF-TOF质谱分析,搜索蛋白质数据库,获得差异蛋白质的信息。经过初步筛选和质谱分析,共获得60个具有统计学意义的表达差异蛋白点...
- 李茂中刘家森王泽祥孙宏勇郭东春姜骞林欢曲连东
- 关键词:兔出血症病毒肝组织蛋白表达双向凝胶电泳
- 文献传递
- 兔出血症病毒衣壳蛋白VP60与兔肝脏细胞中相互作用蛋白的初步筛选被引量:2
- 2011年
- 为鉴定兔出血症病毒(RHDV)在感染兔肝脏过程中与肝细胞膜表面相互作用的靶蛋白,本研究利用SMART文库构建技术构建了兔肝脏细胞的真核表达cDNA重组质粒文库,将其转染SP2/0细胞,经嘌呤霉素筛选表达兔肝细胞蛋白的阳性SP2/0细胞。以RHDV-VP60蛋白作为固相包被抗原,经筛选,获得能够与VP60蛋白相互结合的表达性阳性SP2/0细胞克隆。测序表明26个克隆与兔的一些功能性蛋白有较高的同源性,其中包括代谢酶类13个、免疫信号通路受体蛋白5个以及其他细胞膜蛋白等。本研究鉴定的与RHDVVP60具有结合性的细胞蛋白为RHDV感染机制的研究奠定了基础。
- 穆亚芳刘家森郭东春李茂中原冬伟姜骞林欢曲连东
- 关键词:兔出血症病毒文库构建