李良菊
- 作品数：24 被引量：54H指数：4
- 供职机构：江苏大学药学院更多>>
- 发文基金：江苏省社会发展科技计划国家自然科学基金江苏省科技厅基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 幽门螺杆菌Ⅳ型分泌系统cagT基因的克隆表达及其重组蛋白对SGC-7901细胞增殖和分泌细胞因子功能的影响被引量：3
- 2008年
- 【目的】初步研究幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，H．pylori）NCTC 11637 cagT（HP0532）基因对SGC-7901细胞增殖和白细胞介素-8（IL-8）分泌的影响。【方法】应用PCR技术从H．pylori基因组DNA中扩增cagT编码基因片段，将其定向插入pQE30载体中，双酶切鉴定筛选阳性克隆。测序分析确认后，IPTG诱导表达，表达蛋白以Ni^2＋-NTA柱进行纯化，并经Western blot鉴定，纯化的蛋白作用于SGC-7901细胞，提取细胞总RNA，RT-PCR扩增IL-8，并用MTT法检测蛋白对细胞增殖的影响。【结果】成功克隆了cagT基因，全长843bp（GenBank登录号为EF114758），编码280个氨基酸，与GenBank公布的其他H．pylori菌株基因序列的核苷酸同源性为97％-99％。工程菌诱导后SDS-PAGE显示新生表达蛋白带，相对分子质量约为32kDa，经Ni^2＋-NTA柱纯化后可获得纯度为98％重组蛋白。经透析复性后的蛋白（终浓度10μg／mL）作用于SGC-7901细胞后，可诱导细胞因子IL-8在mRNA水平上的表达。不同浓度CagT蛋白与SGC-7901细胞作用，细胞增殖的程度随着蛋白浓度的增加逐渐降低，细胞的增殖受到抑制。【结论】CagT蛋白可刺激SGC-7901细胞IL-8的表达，并抑制细胞增殖，为进一步研究其生物学功能奠定了基础。
- 崔蕾蕾邵世和李良菊王华母润红鞠小丽董苏荣钟桥
- 关键词：幽门螺杆菌白细胞介素-8
- 幽门螺杆菌47kDa微孔蛋白基因的克隆表达及特性鉴定
- 2007年
- 目的对人幽门螺杆菌（H．pylori）编码47kDa外膜微孔蛋白基因omp47克隆表达及特性鉴定，探索研制H．pylori疫苗的新途径。方法培养和收集H．pylori标准菌株NTTCll637及临床菌株，采用酚：氯仿抽提、纯化基因组DNA。设计上下游引物，并以该基因组为模板，采用聚合酶链反应（PCR）扩增omp47基因片断。将目的基因和与克隆载体PGEM-T连接后，转化至EcoliDH5a及BL21，碱裂解提取质粒经BamHl和Xhol双酶切鉴定并进行序列分析。重组蛋白采用IPTG诱导表达后，经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）鉴定、镍亲和层析纯化检测抗原活性。结果经酶切、测序分析表明，插入的基因片断为1284bp，编码427个氨基酸。与GenBank公布的H．pylori标准株26695、43504及J99序列比对，核苷酸同源性高达94%～96％，编码氨基酸同源性96%～99%。经SDS-PAGE检测，电泳图谱上显示一条相对分子量为47kda的新生蛋白带。Westernblot检测表明重组蛋白有较好的抗原性。结论成功克隆了外膜微孔蛋白OMP47的编码基因，为H．pylori疫苗的研制和试剂盒的开发奠定了良好的基础。
- 郝渭滨邵世和鞠小丽李良菊王华
- 关键词：幽门螺杆菌蛋白纯化
- 微生物学及其检验实验课教学改革初探被引量：2
- 2004年
- 微生物学及其检验是医学检验专业的一门重要专业课程,实验教学对于培养学生的实践能力和创新精神起着重要的作用。我们对原有的实验教学内容和教学方法进行了改革,在教学中开展了系列实验,采用了以模拟标本为形式的综合性实验,收到了较好的效果,从而提高了学生运用微生物学知识解决临床医学检验中实际问题的能力。
- 李良菊王胜军成静黄锡全
- 关键词：微生物学医学检验专业实验课教学改革模拟标本
- 幽门螺杆菌cag致病岛的研究进展被引量：2
- 2005年
- 王华邵世和李良菊
- 关键词：幽门螺杆菌CAG致病岛
- 甘氨酸补充对一次性力竭运动小鼠运动能力和免疫功能的影响被引量：8
- 2008年
- 为探讨甘氨酸补充对运动能力及免疫功能是否具有调节作用,将30只小鼠随机分成力竭游泳运动组(E1)、甘氨酸补充后力竭游泳组(E2)和静息正常对照组(S),每组10只。在E2组补充甘氨酸,其余两组给予生理盐水,处理4周后,E1组和E2组均做力竭性游泳运动。采用微量CH50溶血法分析补体活性,采用MTT法定量分析脾脏淋巴细胞增殖能力。结果显示,与E1组比较,E2组游泳至力竭的时间显著延长(P<0.01)。E1组血清总补体活性显著低于S组(P<0.01),E2组显著高于E1组(P<0.01),但仍显著低于S组(P<0.05)。在脾脏淋巴细胞增殖试验中观察到,E1组显著低于S组,E2组显著高于E1组但仍显著低于S组。结果表明,补充甘氨酸可提高运动能力;力竭游泳可降低血清补体活性及T细胞免疫功能,补充甘氨酸可部分地阻抑这些变化。
- 樊晓飞李良菊肖德生徐姿马斌
- 关键词：甘氨酸淋巴细胞
- 大鼠局部淋巴结刺激对免疫功能影响的初步研究
- 2004年
- 刘欣李良菊陈淼陆荣柱许化溪刘永义包亚军徐晔
- 关键词：免疫功能溶血性链球菌感染扁桃体炎
- 树突状细胞在抗原特异性皮炎中的作用被引量：1
- 2002年
- 目的 :观察树突状细胞 (DC)捕获抗原后的移行、抗原提呈方式及其在抗原特异性皮炎中的作用。方法 :利用异硫氰酸荧光素 (FITC)的可显示性 ,将其作为抗原皮内免疫CBA小鼠 ,测定局部淋巴结的淋巴细胞、DC总数并作淋巴细胞增殖试验 ,用FACS分析DC携带抗原。结果 :皮肤经FITC刺激后 ,局部淋巴结的树突状细胞及淋巴细胞数明显高于对照组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ;淋巴细胞增殖试验亦有明显差异 (P <0 .0 5 ) ;FACS分析的结果表明 ,局部淋巴结内的树突状细胞百分率及荧光强度均明显提高 ;荧光显微镜观察呈现不均一的膜荧光 ,提示该细胞抗原提呈方式为膜结合型。经病理切片观察 ,再次注射抗原的局部皮肤明显有单核、淋巴细胞浸润为主的皮肤迟发型超敏反应的病理变化。结论 :FITC所引起的抗原特异性皮炎是一种细胞介导的迟发型超敏反应 ,DC在致敏过程中起了重要的作用。
- 李良菊许化溪马斌王胜军曹友清
- 关键词：树突状细胞小鼠抗原皮炎
- 食管癌组织中端粒酶mRNA的原位表达与临床相关性意义
- 2003年
- 目的:研究端粒酶活性在食管癌、癌旁组织、正常粘膜组织中的表达情况及与食管癌的临床病理联系,探讨食管癌组织中端粒酶活性在食管癌的发生、发展中的作用。方法:运用原位杂交技术检测端粒酶mRNA的表达。结果:在30例食管癌中,端粒酶mRNA的阳性表达率为93.3％,明显高于癌旁组织(阳性表达率为13.3％)和正常粘膜组织(阳性表达率为0％)(P<0.001).端粒酶活性的表达强度与肿瘤的分化程度、浸润深度、临床分期及有无淋巴结转移有显著性相关(P<0.05),与性别、年龄无相关性。结论:端粒酶的激活及表达强度对食管癌的诊断、治疗及预后判断有意义。
- 成静李良菊钱晓彬
- 关键词：端粒酶食管癌MRNA
- T细胞疫苗抑制自身免疫性甲状腺炎的发生
- 2004年
- 目的 研究T细胞疫苗 (TCV)在小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎 (EAT)发生中的阻断作用及可能机制。方法 磁珠分离CD4 + T细胞 ,体外活化 ,戊二醛处理获得T细胞疫苗 ,体内接种EAT小鼠。通过EAT评价、细胞因子测定及细胞增殖试验了解TCV对EAT的阻断作用 ;流式细胞术测定小鼠CD4 + CD2 5 + T细胞百分率。结果 TCV接种后小鼠体内自身抗体水平明显下降 ,甲状腺无明显病理变化 ,IL 2和IFN γ水平以及Tg刺激的淋巴细胞增殖能力均显著降低 ,同时CD4 + CD2 5 + T细胞百分率较EAT组有明显增高。结论 TCV接种能明显抑制小鼠EAT的发生 ,可能与机体内CD4 + CD2 5 +
- 王胜军许化溪邵启祥王永忠李良菊
- 关键词：T细胞疫苗甲状腺炎调节性T细胞
- 甘氨酸补充对力竭性运动小鼠部分生化指标的影响被引量：3
- 2015年
- 目的探讨甘氨酸补充对一次力竭性运动小鼠部分生化指标的影响。方法将雄性昆明小鼠分为3组,每组10只:力竭性游泳运动组(E组),甘氨酸补充后力竭性游泳组(G组)及静息正常对照组(S组)。G组小鼠采用甘氨酸灌胃处理4周,其余两组给予生理盐水。4周后,E组和G组均做力竭性游泳运动。采样后进行补体溶血活性测定,并测定血清中部分生化指标的水平。结果与E组比较,G组的力竭性游泳运动时间显著延长(P<0.01)。力竭性游泳后,E组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、尿素氮、血清铁(Fe3+)和补体溶血活性(CHA)的水平较S组发生了显著性的变化(P<0.01),与E组比较,G组小鼠血清中上述生化指标得到了显著改善(P<0.01),其中ALP和LDH的水平可以恢复到与S组相当的水平(P>0.05)。结论力竭性游泳小鼠血清部分生化指标异常,甘氨酸预补充对这些异常有明显的改善作用,可以一定程度地提高小鼠的运动能力。
- 曹进樊晓飞李良菊徐姿
- 关键词：甘氨酸力竭性游泳生化指标
