李玲玲
- 作品数：5 被引量：7H指数：2
- 供职机构：南华大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省大学生研究性学习与创新性实验计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 结肠癌术后早期腹腔循环热灌注化疗联合静脉化疗的疗效分析
- 目的： 观察结肠癌患者手术后常规的静脉化疗与早期行腹腔循环热灌注化疗联合静脉化疗的疗效差异;比较两种治疗方法对结肠癌患者免疫功能的影响，以此为这一治疗方法的推广及进一步开展提供临床依据，为结肠癌寻求更为合理的综合治疗方...
- 李玲玲
- 关键词：结肠癌静脉化疗毒副作用疗效分析
- 文献传递
- 利用膜蛋白酵母双杂交系统构建人尿道上皮细胞cDNA文库
- 2018年
- 利用基于分离的泛素介导的膜蛋白酵母双杂交技术,构建人永生尿道上皮细胞(SV-HUC-1) cDNA文库。Trizol法提取人尿道上皮细胞总RNA,并分离纯化其mRNA;以mRNA为模板,合成cDNA第一链、第二链;通过T4 DNA聚合酶将DNA链两端加上5'接头;并将其大于1 kbp的片段与膜蛋白酵母双杂交载体p PR3-N连接,经电转化大肠杆菌感受态细胞,以构建基于分离的泛素介导的膜蛋白酵母双杂交cDNA文库,并检测文库的库容量和随机性。本研究成功构建了人尿道上皮细胞的基于分离的泛素介导的膜蛋白酵母双杂交cDNA文库,为进一步研究泌尿生殖道感染病原体与宿主尿道上皮细胞的相互作用奠定了实验基础。
- 李玲玲余敏君邓湘赢戴佩朱翠明罗丹廖雅婷曾焱华
- 关键词：CDNA文库
- 生殖支原体MgPa经CypA-CD147-ERK诱导人尿道上皮细胞分泌促炎症因子
- 研究背景：生殖支原体(Mycoplasma genitalium, Mg)是由Tully等[1]于1981年分离到的一种支原体。它是一类缺乏细胞壁但能够自我复制的最小原核细胞型微生物[2]。Mg经由其膜蛋白结合在宿主细胞...
- 李玲玲
- 关键词：促炎症因子
- 利用酵母双杂交技术筛选与生殖支原体黏附蛋白(MgPa)相互作用的宿主蛋白被引量：2
- 2019年
- 从利用基于分离的泛素介导膜蛋白酵母双杂交系统构建的人尿道上皮细胞cDNA文库中筛选生殖支原体(Mg)黏附蛋白(MgPa)的互作蛋白。以pET30a-MgPa为模板,经PCR扩增MgPa基因,将其分别连接到pBT3STE和pBT3SUC载体以构建诱饵质粒pBT3STE-MgPa和pBT3SUC-MgPa;将诱饵质粒分别转化到酵母菌株NMY32内,检测其毒性和自激活活性;将人尿道上皮细胞cDNA文库质粒pPR3-N-207-Zeng转入到含pBT3SUC-MgPa诱饵质粒的酵母菌株中,筛选阳性克隆。检测阳性克隆LacZ报告基因的活性。提取阳性克隆质粒进行DNA测序与BLAST分析。结果显示,成功构建的诱饵质粒pBT3STE-MgPa和pBT3SUC-MgPa两者都没有自激活功能,且pBT3SUC-MgPa的活性强于pBT3STE-MgPa。用pBT3SUC-MgPa转化NMY32酵母作为受体酵母细胞。经DNA测序与BLAST分析结果表明筛选到的28个阳性克隆归属于23个不同的蛋白。从利用分离的泛素介导膜蛋白酵母双杂交系统构建的人尿道上皮细胞cDNA文库中筛选到23个与MgPa相互作用的蛋白,为阐明MgPa的功能及Mg可能的致病机制提供参考。
- 王磊李冉辉李冉辉戴佩戴佩李玲玲罗丹
- 关键词：生殖支原体黏附蛋白酵母双杂交CDNA文库
- 从T7噬菌体展示cDNA文库筛选生殖支原体黏附蛋白的互作蛋白被引量：2
- 2018年
- 目的:从人尿道上皮细胞(SV-HUC-1)T7噬菌体展示cDNA文库筛选生殖支原体黏附蛋白(MgPa)的互作蛋白。方法:以原核表达、纯化的重组生殖支原体黏附蛋白(r Mg Pa)为靶分子,对人尿道上皮细胞T7噬菌体展示cDNA文库进行4轮生物淘选,采用T7特异性引物扩增阳性克隆的插入片段,PCR产物测序后进行BLAST分析,间接ELISA、斑点免疫印迹和Far-western blot检测阳性噬菌体与rMgPa的特异结合。结果:经过4轮生物淘选,噬菌体克隆富集明显;DNA测序后经BLAST比对分析,结果表明随机挑取的32个阳性克隆包括7种不同序列,其中以RPL35重复次数最多;间接ELISA、斑点免疫印迹和Far-western blot结果表明7个代表性噬菌体均能与rMgPa特异结合。结论:60S核糖体蛋白L35(RPL35)可能是MgPa的互作蛋白,为深入了解MgPa的生物学功能以及生殖支原体的致病机制奠定了实验基础。
- 戴佩邓湘赢余敏君李玲玲罗丹龙娴曾焱华
- 关键词：生殖支原体
