李林俐
- 作品数：6 被引量：7H指数：1
- 供职机构：四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室更多>>
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- 聚乙二醇化黑曲霉脂肪酶的性质分析
- 2014年
- 目的用聚乙二醇对脂肪酶进行化学修饰,以提高酶的物化特性。方法选择20 kD(mPEG)2-Lys-NHS作为修饰剂,实验条件下与黑曲霉脂肪酶发生化学修饰反应;采用Sephacryl S-200凝胶层析法分离聚乙二醇化脂肪酶,利用SDSPAGE法测定分子量,采用常规酶学方法分析比较脂肪酶经聚乙二醇化前后的酶学动力学行为。结果经SDS-PAGE检测获得的脂肪酶为两条带:mPEG2-lipase-Ⅰ、mPEG2-lipase-Ⅱ(分子量分别约105.2、88.7 kD);修饰后脂肪酶的活性保留69%,修饰度50%。以p-NPP为底物,在pH6、50℃条件下比较修饰前后脂肪酶的酶学性质表明:lipase和mPEG2-lipase的Km值分别为21.6、24.8 mmol·L-1,最适反应温度均为50℃,mPEG2-lipase的最适反应pH5,比lipase向碱性方向移动了1个单位,修饰后热稳定性和pH稳定性有了大幅度提高;mPEG2-lipase在4℃下保留6个月,而未修饰酶的活性减少20%;修饰后脂肪酶在有机试剂中耐受性略微提高。结论研究确定了黑曲霉脂肪酶经过聚乙二醇修饰后部分酶学性质,优化了脂肪酶的物化性能,为脂肪酶在食品、化妆品、化工、医药等行业的应用提供了理论依据。
- 李林俐李刚锐范翔孟延发
- 关键词：黑曲霉脂肪酶聚乙二醇修饰酶学性质
- 天花粉蛋白的制备及其性质被引量：5
- 2014年
- 目的采用两步层析法快速制备天花粉蛋白(TCS),并验证其SOD活性。方法粉碎栝楼块茎并抽提,经硫酸铵分级沉淀,再经Blue-Sepharose CL 6B和SP-Sepharose两步层析,可获得TCS纯制剂;采用SDS-PAGE和PAGE鉴定其均一性;用MTT法检测TCS对Hela细胞的抑制作用;采用PAGE-NBT活性染色法与邻苯三酚自氧化法相结合检测了TCS的SOD活性。结果用两步层析法可获得高纯度和高收率的TCS;经SDS-PAGE和PAGE鉴定,均为单一蛋白质着色带;TCS对Hela细胞增殖具有明显抑制作用,呈时间和浓度依赖关系;TCS不具有SOD活性。结论所用TCS纯化方法简单、快速、收率高,可大量制备具有生物活性的TCS,同时也首次证明了TCS不具有SOD活性。
- 杨烨范翔李刚锐李林俐栗克喜孟延发
- 关键词：天花粉蛋白SOD活性核糖体失活蛋白栝楼
- 溶胶凝胶法固定化黑曲霉脂肪酶的性质研究被引量：1
- 2014年
- 近年来溶胶．凝胶法固定脂肪酶已成为研究热点。选用TMOS、MTMS、ETMS和PTMS4种硅烷试剂对黑曲霉脂肪酶进行了固定化研究。固定化的最佳配方为ETMS／TMOS=5：1、水与硅烷试剂分子比为8；固定化脂肪酶的固定率为80．2％、相对活性为136．3％；以乳化橄榄油作为底物，在50℃和pH4．0的条件下，固定化脂肪酶与游离脂肪酶Km分别为1．899×10^-4 M和2．789×10^-4 M；最适反应pH均为pH4．0，固定化脂肪酶在pH4．0～pH5．5之间其活性能保持95％以上；固定化脂肪酶最适反应温度为60℃，较游离脂肪酶提高了10℃；固定化脂肪酶的酸碱稳定性和热稳定性较非固定化酶有显著的提高。固定化脂肪酶的使用寿命和保存稳定性良好，使用12次后仍能够保留71．7％活性，在室温避光条件下保存180天后仍可保留79．2％活性。
- 李刚锐李林俐范翔孟延发
- 关键词：脂肪酶溶胶-凝胶固定化黑曲霉
- 二十世纪六七十年代英美派和法国派女性主义文学批评的比较被引量：1
- 2010年
- 在女性主义文学批评蓬勃发展的二十世纪六七十年代,英美派和法国派都取得了重要成就。前者重经验论阐述,后者则重理念论的阐述。但一般的教材往往武断地贬低后者。本文将二者进行比较,并对法国派的理论建树进行肯定。
- 李林俐
- 关键词：英美派女性主义文学批评
