- 原癌基因HER2/neu表达产物p185蛋白免疫原性研究被引量：4
- 1998年
- 用表达ｐ１８５蛋白ＨＥＲ２／ｎｅｕ转基因３Ｔ３－ＨＥＲ２／ｎｅｕ细胞裂解物免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，经３次免疫后，免疫小鼠脾细胞对表达ｐ１８５蛋白的３Ｔ３－ＨＥＲ２／ｎｅｕ细胞呈现较强的增殖反应（平均刺激指数分别为ＳＩ＝３．１５±１．８８），而对未转染ＨＥＲ２／ｎｅｕ基因的３Ｔ３细胞的应答较弱（ＳＩ＝１．１４±０．９７）。并检测到１号免疫鼠脾细胞对３Ｔ３－ＨＥＲ２／ｎｅｕ细胞有特异杀伤作用。免疫鼠血清中出现高水平的抗ｐ１８５抗体（ＯＤ均值＝１．０２±０．１６），较正常对照组（ＯＤ均值＝０．３６±０．１０）有显著差异（Ｐ＜０．００１），表明ＨＥＲ２／ｎｅｕ表达产物ｐ１８５蛋白具有免疫原性，用于免疫小鼠可诱导出对ｐ１８５蛋白的特异免疫应答反应。
- 李晓华秦慧莲何球藻
- 关键词：肿瘤免疫原癌基因HER2/NEUP185蛋白免疫原性
- p185抗体可致小鼠流产的研究被引量：2
- 1998年
- 目的通过体内实验进一步验证ｐ１８５蛋白的免疫原性，旨在研究该蛋白作为肿瘤疫苗的可能性。方法用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ２００层析柱分离的ｐ１８５蛋白组分与佐剂混合免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，经ＥＬＩＳＡ验证血清中出现ｐ１８５抗体后与健康的同品系雄性鼠交配，以阴栓形成提示交配成功，观察雌鼠产仔率，子宫形态及免疫病理。结果免疫鼠产仔率明显低于仅用佐剂免疫的对照组（Ｐ＜０．０５），子宫内发现胚胎坏死，病检显示子宫组织有弥散性中性粒细胞浸润和局灶性坏死，并有免疫复合物沉积，提示ｐ１８５免疫能诱导小鼠流产。结论这一实验结果从体内进一步证实ｐ１８５的免疫原性。为该蛋白作为肿瘤疫苗提供实验资料。
- 李晓华秦慧莲何球藻
- 关键词：P185蛋白流产肿瘤细胞胚胎抗原免疫原性
- 系统性红斑狼疮中的细胞因子异常被引量：12
- 1995年
- 人类系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）有多种细胞因子异常。ＩＬ—２和ＩＬ—６及两者的受体，ＩＦＮ─γ、ＩＬ—１、ＩＬ─４、ＢＣＧＦ、ＴＮＦ、ＩＣＡＭ—１、ＢＧＥＦ均高，在ＳＬＥ的发生发展及其转归中起重要作用，从而对ＳＬＥ发病机理的认识及防治赋予新的启示。
- 李晓华
- 关键词：红斑狼疮细胞因子异常白细胞介素
- 用细胞-ELISA法检测抗P185抗体被引量：4
- 1997年
- 以高表达P185蛋白的人乳腺癌细胞（SKBR-3）作为抗原,用固相-ELISA法检测抗P185单抗和免疫小鼠抗血清。比较了不同方法处理的固相细胞和待测血清经低表达P185的人乳腺癌细胞（MCF-7）吸收与未吸收对实验的影响。结果显示:待测样本用MCF-7预吸收后及用1％乙醛处理固相细胞组所得结果较理想。
- 江雅芳李晓华何曦
- 关键词：ELISA
- 细胞因子与系统性红斑狼疮的研究进展被引量：5
- 1994年
- 人类系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）是一种自身免疫病，多种细胞因子参与其免疫病理损伤过程，其中ＩＬ－１，ＩＬ－２，ＩＬ－４，ＩＬ－６，ＩＦＮ－γ，ＴＮＦ，ＩＣＡＭ－１和ＢＧＥＦ在ＳＬＥ的发生发展及其转归中起重重作用。这些研究将对ＳＬＥ发病机理的认识及防治赋予新的启示，本文将对有关问题作一综述。
- 李晓华
- 关键词：细胞因子红斑狼疮
- 肿瘤抗原p185蛋白免疫鼠脾细胞的抗瘤效应研究
- 2000年
- 目的 研究肿瘤抗原p185蛋白作为肿瘤疫苗所诱导的抗肿瘤效应。方法 亲和层析纯化的p185蛋白皮下注射正常BALB c小鼠 ,取脾细胞分别与p185蛋白、3T3 neu细胞体外共培养 ,以单独佐剂注射组的小鼠脾细胞为对照 ,观察其培养上清中IFN γ和TNF α活性。将免疫鼠脾淋巴细胞经p185抗原和低剂量的IL 2体外培养 1周后 ,再用CD3抗体刺激扩增 ,用流式细胞仪分析其细胞表型。 3T3 neu和 3T3细胞分别接种于裸鼠腋窝皮下验证其致瘤性。选择具有致瘤性的 3T3 neu细胞与经抗CD3抗体扩增的免疫鼠脾细胞体外混合后 (1 9)接种于裸鼠腋窝皮下 ,以 3T3 neu细胞单独或与CD3抗体活化的正常鼠脾细胞 (CD3 AK)混合后 ,同法接种于裸鼠腋窝皮下观察其成瘤时间和带瘤宿主的存活期。结果 免疫鼠脾细胞培养上清中IFN γ活性为 40 .2 7± 9.6U ml,也具有产生较高TNF α能力。对照组未能检测出有IFN γ活性 ,其TNF α活性也较低。裸鼠体内实验证实 ,2 .5× 10 5的 3T3 neu细胞在裸鼠体内即可成瘤 ,而对照组的 3T3细胞无致瘤性。 3T3 neu细胞与体外扩增的免疫鼠脾细胞混合后接种裸鼠 ,瘤结节形成时间平均为 5 2 .5d ,存活期平均为 5 5 .3d(其中 5只动物至6 0d尚未成瘤 ,按 6 0d计算 ) ,而对照组瘤结节形成时间平均分别为 12 .5和 9.
- 李晓华秦慧莲何球藻
- 关键词：肿瘤疫苗P185蛋白
- 肿瘤抗原p185蛋白的纯化及其鉴定被引量：3
- 2000年
- 目的：从转染HER2／neu基因的3T3／neu细胞中纯化p185蛋白，研究其免疫原性和作为肿瘤疫苗的可能性。方法：采用溴化氰活化的Sepharose4B为基质，通过交联520C9单克隆抗体（杂交瘤腹水中沉淀γ-球蛋白），用亲和层析的技术纯化p185蛋白。经梯度盐溶液解离与抗体结合的p185蛋白，收集到蛋白洗脱峰，用ELISA检测p185的免疫反应性，并经SDSPAGE和WesternBlot进一步鉴定。结果：经过亲和层析所收集的蛋白吸收峰与p185活性峰重合，SDS-PAGE和WesternBlot进一步证实纯化蛋白的分子量约为185kD，是HER2/neu编码的肿瘤抗原。从肿瘤细胞中纯化p185肿瘤抗原的收获率约为1．129×10-5）mg／mg蛋白浓度的细胞裂解上清。结论：从转基因细胞中成功获取p185肿瘤抗原，将用于后续研究。
- 李晓华秦慧莲何球藻
- 关键词：亲和层析法肿瘤抗原P185蛋白纯化
- B细胞刺激因子(BSF)和性激素与系统性红斑狼疮(SLE)发病学的关系
- 2001年
- 1.主要研究成果:(1)活动性SLE的外周血单个核细胞(PBMC)已被活化,主要表现为:淋巴细胞自发增生增高;膜表面IL-2受体和IL-10mRNA自发表达增高;IgG和抗双链(ds)DNA抗体自发增高;IL-2、IL-6、IFN等自发分泌增高.这一工作与文献结论相同,只是我们的指标较为全面.
- 吴厚生王美英李晓华夏金华邵洪波
- 关键词：系统性红斑狼疮发病学B细胞刺激因子性激素
- IL－10mRNA在SLE患者外周血单个核细胞上的表达被引量：8
- 1996年
- 采用随机引物标记法将ＩＬ－１０ｃＤＮＡ标记地高辛甙元（Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ，ＤＩＧ）作为探针，用点杂交检测正常人和ＳＬＥ患者ＰＢＭＣ表达ＩＬ－１０ｍＲＮＡ量，经图象分析和计算机处理发现ＳＬＥ患者ＩＬ－１０ｍＲＮＡ表达量明显高于正常对照组（０．３３５５±０．０９２／０．１３６２±０．０５３５；Ｐ＜０．００１）。同时我们用ＰＨＡ和ＬＰＳ体外激活正常人ＰＢＭＣ，发现激活的ＰＢＭＣ表达ＩＬ－１０ｍＲＮＡ的量显著高于未经激活的对照组（０．４３８２±０．０７０７／０．１３６２±０．０５３５；Ｐ＜０．００１）。由此推论ＳＬＥ患者体内单个核细胞在体内已被激活，且通过产生ＩＬ－１０来调节患者免疫应答，这一作用可能与ＳＬＥ患者病情的发展有一定的关系。
- 李晓华王美英吴厚生
- 关键词：系统性红斑狼疮白细胞介素10MRNA
- HER2/neu抗体对SKBR3乳腺癌细胞株酪氨酸磷酸化及细胞增殖的影响被引量：5
- 1998年
- 目的研究抗ＨＥＲ２／ｎｅｕ胞外区的特异性抗体对ＳＫＢＲ３乳腺癌细胞株酪氨酸磷酸化及细胞增殖的影响。方法Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法及抗体介导的特异性细胞增殖试验；筛选乳腺癌病人抗ＨＥＲ２／ｎｅｕ抗体阳性血清ＩｇＧ的ＥＬＩＳＡ方法。结果试验发现单抗ｃ－ｎｅｕ－５对ＳＫＢＲ３细胞ｐ１８５酪氨酸磷酸化有明显促进作用，但对细胞增殖的影响不明显；而单抗ｃ－ｎｅｕ－２对ＳＫＢＲ３细胞ｐ１８５酪氨酸磷酸化及细胞增殖均有明显作用。在此基础上，收集乳腺癌病人血清１４份，分离纯化其血清ＩｇＧ，并经ＥＬＩＳＡ方法筛选出５份乳腺癌病人抗ＨＥＲ２／ｎｅｕ抗体阳性血清ＩｇＧ。细胞增殖试验发现该５份标本中有３份对ＳＫＢＲ３细胞增殖有明显抑制作用。选其中１份抑制增殖的阳性血清ＩｇＧ进一步研究其对ＳＫＢＲ３细胞ｐ１８５酪氨酸磷酸化的影响，结果发现该病人血清ＩｇＧ对细胞酪氨酸磷酸化也有抑制作用。结论抗ＨＥＲ２／ｎｅｕ的特异性抗体可能通过抑制细胞的信号传递系统而抑制肿瘤生长。
- 邵红霞秦慧莲李晓华谢琪
- 关键词：酪氨酸磷酸化细胞增殖抗体
