李宁一
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：北京军区总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金“重大新药创制”科技重大专项更多>>
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- 幽门螺杆菌黏附素A抗原H-2d（I-A）限制性免疫优势Th表位的筛选与鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的鉴定幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)黏附素A抗原(HpaA)H-2d限制性免疫优势Th表位,为H.pylori表位疫苗的研究提供候选表位。方法采用体外扩增的HpaA抗原特异性T细胞和步移重叠合成肽筛选鉴定HpaA抗原的免疫优势Th表位,再利用抗体阻断实验对其H-2d限制性进行分析。结果 18mer氨基酸肽段筛选发现肽段H154-171、H184-201、H190-207、H202-219和H220-237能够激发HpaA特异性CD4+T细胞产生γ-干扰素。其中H154-171激发的应答最强。13mer氨基酸短肽鉴定结果显示:仅H158-170能刺激产生强于18mer氨基酸短肽H154-171的应答反应。同时,抗体阻断试验结果表明:抗H-2d(I-A)抗体能有效阻断该表位激发的应答。结论 H154-171、H184-201、H190-207、H202-219和H220-237是HpaA的小鼠H-2d限制性Th表位,其中H154-171为免疫优势表位肽,该表位的核心氨基酸序列为H158-170,并存在H-2d(I-A)限制性。该研究将为H.pylori表位疫苗研究提供了可能的候选分子。
- 杨武晨郭红陈立李滨李宁一章金勇何亚非胡健吴超
- 关键词：CD4+T细胞
- 幽门螺杆菌抗原特异性 CD4＋T 细胞体外扩增及其在 Th 表位筛选中的初步应用被引量：2
- 2014年
- 目的：建立幽门螺杆菌（ Helicobacter pylori，H．pylori）抗原特异性CD4＋T细胞体外扩增方法，并在Th表位筛选中初步应用。方法从H．pylori感染阳性患者中分离外周血单个核细胞（PBMC），以重组黏附素抗原（HpaA）进行体外刺激，分别摸索不同血清培养基、抗原刺激浓度、培养时间等体外扩增条件，并通过细胞内因子染色和流式细胞技术检测HpaA特异性CD4＋T细胞产生IFN-γ应答水平，从而建立H．pylori感染者抗原特异性CD4＋T淋巴细胞的体外扩增方法。同时，结合合成重叠肽技术，对抗原HpaA中可能的Th表位进行初步筛查。结果在含人AB血清的1640培养基中培养的抗原特异性CD4＋T细胞的扩增效率优于含胎牛血清的1640培养基； HpaA抗原初刺激浓度为0．2μmol/L时，抗原特异性CD4＋T细胞的比例最高；在抗原刺激浓度0．2μmol/L条件下，细胞培养9 d时出现特异性CD4＋T细胞应答，且在第15天时达到高峰值；以不同肽段对特异性CD4＋T细胞的IFN-γ应答水平检测分析中显示：针对本研究H．pylori感染个体，HpaA抗原中可能存在一个优势应答的Th细胞表位（HpaA220-237）。结论在人AB血清的1640培养基，0．2μmol/L为抗原刺激浓度，连续15 d扩增等培养条件下，在体外成功扩增出H．pylori抗原特异性CD4＋T淋巴细胞，可用于H．pylori抗原中Th表位的筛选和鉴定，为表位疫苗研究奠定实验基础。
- 李晓阳郭学青李宁一陈立吴超
- 关键词：幽门螺杆菌CD4+T细胞表位
- HLA-DRB1等位基因多态性与幽门螺杆菌感染及胃部疾病的相关性研究
- 背景 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，H.pylori)是一种定植于人的胃粘膜的微需氧、螺旋状的革兰阴性杆菌。H.pylori感染普遍存在，已造成全球50%以上的人口感染，尤其在中国等发展中国家，...
- 李宁一
- 关键词：幽门螺杆菌胃部疾病人类白细胞抗原多态性分析HLA-DRB1等位基因
- 重庆地区汉族人群HLA-DRB1等位基因多态性研究被引量：2
- 2012年
- 目的了解中国重庆地区汉族人群人类白细胞抗原HLA-DRB1基因多态性及其分布特点。方法应用自行建立的聚合酶链式反应-测序为基础的分型方法(PCR-SBT)对190例重庆地区汉族人群进行HLA-DRB1基因分型和多态性分析。结果共检测出13种HLA-DRB1等位基因,20种等位基因型。其中,HLA-DRB1*09:01(29.1%)等位基因频率最高,其次为HLA-DRB1*04:05(12.2%)、HLA-DRB1*08:03(9.3%),基因频率最低的是HLA-DRB1*12:01、HLA-DRB1*12:02、HLA-DRB1*14:05和HLA-DRB1*15:02,各占1.26%。此外,检出的20种HLA-DRB1等位基因型在男女性别间无显著差异。结论成功建立并优化了HLA-DRB1的PCR-SBT基因分型方法;重庆地区汉族人群HLA-DRB1等位基因呈现多态性,为群体遗传和疾病关联的研究提供了可靠的遗传学数据。
- 李宁一陈立李滨杨武晨章金勇毛旭虎吴超邹全明
- 关键词：HLA-DRB1PCR-SBT基因多态性汉族
