李宁
- 作品数：9 被引量：12H指数：3
- 供职机构：吉林大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金广西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 肝X受体激动剂抑制NLRP3炎性体活化被引量：1
- 2014年
- 为探讨肝X受体激动剂对NLRP3配体ATP诱导小鼠巨噬细胞炎性复合体活化的影响,应用荧光定量PCR方法测定肝X受体激动剂对LPS诱导的Pro-IL-1β、NLRP3等基因表达的影响,并用免疫蛋白印迹的方法检测Caspase-1的活化片段。结果证明,肝X受体(LXRs)激动剂能抑制NLRP3炎性体的活化。LXRs激动剂T0901317和GW3965显著抑制LPS联合ATP诱导的Caspase-1剪切成熟和IL-1β分泌,并且LXRs激动剂对NLRP3炎性体的抑制作用,部分源于其抑制NLRP3和IL-1β的基因转录。
- 胡啸竹李宁杜崇涛崔治华韩文瑜杨勇军陈巍
- 关键词：肝X受体激动剂小鼠巨噬细胞
- 血清稀释液的筛选及犬抗狂犬病病毒血清抗体正常值范围的确定
- 2010年
- 应用间接ELISA法进行抗体检测是评价狂犬疫苗免疫效果的一种快捷有效手段。首先筛选得到一种灵敏、特异的血清稀释液;然后应用其对采集自不同地区的812份未免疫犬血清稀释并进行间接ELISA检测;以OIE标准阴、阳性犬血清为对照,随机选取不同A450范围的犬血清应用RFFIT进行检测;以RFFIT效价低于0.1 IU/ml的犬血清,计算阴性血清正常值范围和95%的可信区间,并建立标准品的回归方程。结果显示：所筛选到的血清稀释液灵敏、特异,有756份血清样品的效价低于0.1 IU/ml,犬抗狂犬病抗体阴性血清的正常值范围为0.127 3±0.059 8,95%的可信区间为0.078 1-0.172 3。应用OIE犬阳性血清标准品建立了A450和抗血清效价的回归方程：A=1.139 IU＋0.470。该试验结果为犬狂犬病防制以及犬狂犬病抗体ELISA检测试剂的研制奠定了基础。
- 刘红全单晶辉李宁孟锐奇何秀苗卢强张西臣张茂林何静李瑞友伍少团韦锋锐
- 关键词：正常值范围犬血清狂犬病病毒抗体
- 一种稳定、灵敏且适用于ELISA的四甲基联苯胺底物被引量：3
- 2011年
- 目的评价一种适用于酶联免疫吸附试验(ELISA)的即用型自制四甲基联苯胺(TMB)底物的特性。方法比较1-Step Turbo TMB底物、A/B两组分混合物底物和自制底物与不同稀释度酶标抗体的反应性及其对包被抗体的检测敏感性,对1-Step Turbo TMB底物和自制底物进行稳定性比较。结果 3种底物的吸光度(A)值均随着酶标抗体稀释度的增大而显著下降;当酶标抗体稀释度相同时,自制底物的A值显著高于另外2种底物(P<0.05);在直接ELISA条件下,自制底物对包被抗体的检测敏感性可达15.63 ng/mL;自制底物37℃贮存60 d后的A值仍高于1-Step Turbo TMB底物37℃贮存5 d的A值。结论该即用型自制TMB底物在检测敏感性及稳定性上优于1-Step Turbo TMB底物。
- 单晶辉李宁关振宏段铭卢强刘红全孟锐奇张茂林
- 关键词：酶联免疫吸附试验
- RCAN1抑制小鼠腹腔巨噬细胞NLRP3炎性体的活化被引量：3
- 2016年
- 为探讨RCAN1对NLRP3炎性体活化的影响,分离培养了野生型小鼠和RCAN1基因缺失小鼠的腹腔巨噬细胞,应用LPS联合ATP处理细胞,分别收集细胞培养上清和细胞裂解液。采用Western blot和ELISA方法,分别检测IL-1β、caspase-1的剪切成熟以及IL-1β和TNF-α的分泌。结果显示:相比来源于野生型小鼠的腹腔巨噬细胞,RCAN1基因缺失能够显著促进ATP介导的caspase-1的剪切成熟和IL-1β的分泌,而不影响TNF-α的分泌。以上结果表明,RCAN1能够负向调控NLRP3炎性体活化信号,抑制IL-1β的分泌。
- 雷倩倩于水星李宁胡桂秋韩文瑜杜崇涛陈巍杨勇军
- 关键词：NLRP3腹腔巨噬细胞
- 猪瘟病毒E2抗原在不同酶标板上包被效果的比较
- 2011年
- 为比较杆状病毒表达的猪瘟病毒(CSFV)E2抗原在不同酶标板上的包被效果,本研究应用2μg/mL的CSFV E2分别包被Nunc Maxisorp、Cosar StripWell和JET FEP-101-896 3种酶标板,以Flyer Liquid Plate Sealer(FLPS)进行封闭,通过比较猪瘟阳性血清的OD450nm值,筛选包被性能最佳的酶标板。对FLPS、含10%FCS的PBST和含1%BSA的PBST的封闭效果进行比较。并比较FLPS在相同抗原条件下重复使用2次和3次对于CSFV阳性血清检测结果的影响。结果显示,在CSFV E2抗原包被的3种酶标板上,CSFV阳性血清的OD450nm值均存在显著差异(p<0.05),其中以Cosar酶标板OD450nm值最高;在Costar板上,3种封闭液间及FLPS重复使用对于CSFV阳性血清的检测结果无显著差异(p>0.05)。
- 宋艳单晶辉张茂林段铭关振宏李宁卢强涂长春
- 关键词：酶标板
- 京尼平抑制细菌鞭毛蛋白引起的小鼠肺炎
- 2015年
- 为探究京尼平对细菌鞭毛蛋白介导的小鼠肺炎是否具有缓解或治疗作用,将C57BL/6J小鼠随机分为对照组、细菌鞭毛蛋白组和京尼平治疗组。用ELISA和免疫组织化学方法检测肺部炎性因子分泌和炎性细胞浸润,并评价京尼平对细菌鞭毛蛋白引起的肺组织病理变化的作用。结果表明,京尼平可以显著抑制肺组织中IL-1β与KC的分泌和中性粒细胞的浸润,同时缓解鞭毛蛋白导致的肺泡出血、肺泡间质增厚,提示京尼平能够显著地抑制细菌鞭毛蛋白引起的小鼠肺炎。
- 于水星雷倩倩张晓静李宁杜崇涛戚帅胡桂秋周敏宋佩烜韩文瑜陈巍杨勇军
- 关键词：肺炎京尼平
- poly(dA:dT)促进体外培养的人绒毛组织AIM2炎性体活化被引量：3
- 2015年
- 目的:在妊娠过程中,胎盘可能暴露于多种病原微生物,威胁胎儿正常生长发育。为探讨人胎盘绒毛组织是否表达AIM2炎性体成员基因以及人胎盘组织的AIM2炎性体的活化形式。方法:以THP-1细胞来源的RNA和蛋白作为阳性对照,分别应用RT-PCR和Western blot方法检测人早孕期胎盘绒毛组织中AIM2炎性体两个相关基因AIM2和ASC的表达。分离和体外培养人胎盘绒毛膜组织,并用不同浓度的poly(d A:d T)进行转染,处理24小时后,分别收集组织培养上清和蛋白裂解液,Western blot检测蛋白裂解液中caspase-1的活化,ELISA检测培养上清中IL-1β的分泌。结果:RT-PCR和Western blot结果均显示人早孕期胎盘绒毛组织组成性表达AIM2炎性体相关基因AIM2和ASC。同时,体外培养的人胎盘绒毛组织在转染5μg/m L poly(d A:d T)后,caspase-1剪切片段p10显著增多,培养上清中IL-1β分泌也显著增多(P<0.01)。结论:人胎盘绒毛组织存在功能性的AIM2炎性体,能够被胞内双链DNA活化。
- 周敏李宁付艳杜崇涛陈巍杨勇军
- 关键词：CASPASE-1
- 小鼠原代神经元细胞狂犬病病毒滴度测定被引量：1
- 2011年
- 目的探索利用小鼠原代神经元细胞测定狂犬病病毒(rabies virus,RV)滴度的可行性。方法分离培养小鼠大脑皮质原代神经元细胞,接种100小鼠脑内接种半数致死量(MICLD50)的标准攻击强毒(CVS)毒株,通过免疫荧光和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测其感染性,并在此基础上在原代神经元细胞上进行了该毒株的细胞半数感染量(CCID50)测定。结果成功制备了小鼠大脑皮质原代神经元细胞;原代神经细胞培养物接种CVS 96h后,用抗微管相关蛋白质(MAP2)抗体和抗RV阳性血清作为一抗并经荧光抗体染色后,在胞体和突起上均有神经元特异性和RV特异性着染;在共聚焦显微镜下,当相同的细胞部位上出现红色和绿色交迭时呈现粉色斑点,免疫荧光证实原代神经细胞可被CVS感染,同时RT-PCR得到1 770 bp左右的目的条带,说明其被CVS感染;该原代细胞上所测定的CVS病毒滴度为104.5CCID50/0.1 mL,而该病毒的原始滴度为104.5MICLD50/0.03 mL。结论小鼠脑原代神经元细胞上测定的CVS株的病毒滴度与通过脑内接种法测定的滴度相同。
- 单晶辉王心蕊关振宏李宁宋艳张茂林
- 关键词：狂犬病病毒
- 狂犬病毒作为神经示踪剂的研究进展被引量：1
- 2011年
- 狂犬病毒是仅有的完全特异的示踪剂,因为它能逆向通过化学突触进行神经示踪且不改变神经细胞的代谢,可以逐级的,时间依赖的方式感染大量的突触联系的神经网络。根据狂犬病毒的特性解释该病毒作为神经示踪剂的优势,总结狂犬病毒跨神经进行示踪的方法,并对基因修饰的狂犬病毒的新兴技术进行讨论和展望。
- 宋艳李宁黄飞单晶辉张茂林段铭关振宏
- 关键词：狂犬病毒
