李俊彬 作品数:11 被引量:88 H指数:5 供职机构: 中南林业科技大学 更多>> 发文基金: 国家科技部农业科技成果转化资金 国家科技支撑计划 湖南省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 更多>>
湖南银杏细胞培养高产黄酮苷细胞系选育 被引量:1 2007年 为了选育生产黄酮苷能力强且性状稳定的细胞系,采用高效液相色谱仪对8个银杏品种细胞悬浮培养得到的黄酮苷进行测定,找到了适合不同品种悬浮培养的最佳培养基。以8个品种中细胞黄酮苷含量较高的邵2-3为材料,对影响黄酮苷生成的因素:培养基、温度以及激素进行了系统研究,找到了适合该品种悬浮培养高产黄酮苷的最佳条件。结果表明,在M S液体培养基中,温度为24℃的条件下,激素质量浓度为NAA 1.0 m g/L或6-BA 1.0 m g/L时,悬浮培养邵2-3得到的黄酮苷含量最高,分别是4.22 m g.g-1和6.84 m g.g-1。 李永欣 王义强 舒甫恩 李俊彬关键词:银杏 黄酮苷 灰毡毛忍冬DNA不同提取方法的比较试验 被引量:1 2008年 以灰毡毛忍冬新品种——金翠蕾为试验材料,比较分析了SDS法、CTAB法、改良CTAB法对金银花总DNA提取的效果。结果表明:利用以上3种方法均能提取出完整的金银花基因组DNA,而DNA提取量从大到小依次为SDS法、改良CTAB法、CTAB法,DNA纯度依次为CTAB法、改良CTAB法、SDS法。CTAB法是灰毡毛忍冬DNA提取的适宜方法。 李俊彬 王晓明 王平 李永欣 曾慧杰 吴玲娜关键词:灰毡毛忍冬 DNA提取 ISSR-PCR 蚬壳花椒组培苗的生根试验 被引量:19 2007年 以蚬壳花椒无菌组培苗为试材,采用单因子、双因子以及正交试验研究IBA、NAA、IAA、活性炭、基本培养基(大量元素、微量元素、有机质)对组培苗生根的影响。试验结果表明,基本培养基、IBA、NAA对不定报的分化有较大影响,蚬壳花椒组培苗适宜的生根培养基为1/3MS+IBA 0.3 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1.生根率达78%,移栽成活率可达95%。 王丽萍 王平 王晓明 王海霞 李俊彬蚬壳花椒叶片不定芽诱导与内源激素的变化规律 被引量:17 2008年 目的建立蚬壳花椒离体再生体系并测定其内源激素量的变化。方法以蚬壳花椒组培苗叶片为外植体,接种在附加不同激素组合的MS培养基上,诱导愈伤组织不定芽的分化。同时,采用酶联免疫吸附法(ELISA)对愈伤组织分化过程中赤霉素(GA3)、生长素(IAA)、脱落酸(ABA)、玉米素核苷(ZR)4种内源激素的量进行测定。结果蚬壳花椒叶片不定芽诱导的最适培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L,诱导率最高可达61%。内源激素测定发现,分化过程中ZR、IAA的量相对较高,ABA量一直保持较低的水平,GA3在分化前期和中期均呈上升趋势。结论ZR、IAA是蚬壳花椒叶片愈伤组织不定芽分化的主要因素,培养基中适当添加GA3可能有利于提高芽的分化率;ABA可能是此过程中的负调控因子。 王平 王海霞 马英姿 王晓明 左之文 李俊彬关键词:叶片 不定芽 内源激素 华中五味子的愈伤组织诱导 被引量:4 2007年 为建立完善的华中五味子组培快繁体系,以嫩叶为外植体,探讨了不同因素对华中五味子组织培养中愈伤组织诱导的影响。结果表明:75%酒精浸泡10 s和0.1%升汞消毒4 min组合的灭菌效果较好;最适培养基为MS培养基,附加2,4-D 0.5 mg/L、NAA 0.1 mg/L、6-BA 1.0 mg/L时,诱导愈伤组织的效果较好,诱导率高达96.7%,且愈伤组织呈淡绿色,质地致密,生长旺盛。 吴玲娜 谢碧霞 邓白罗 刘伟 李永欣 李俊彬关键词:嫩叶 愈伤组织 外植体 金银花ISSR分子标记 金银花是名贵的中药材之一,有着十分重要的开发利用价值。但金银花优良品种较少,各地栽培品种混杂,分类不清,对金银花种质资源的遗传关系缺乏全面的了解,严重影响金银花新品种的推广及整个产业的良性发展,也制约了金银花良种选育的研... 李俊彬关键词:金银花 ISSR 聚类分析 文献传递 外源激素对美洲冬青组织培养的影响 被引量:11 2010年 以美洲冬青Illex verticillata带腋芽的茎段为外植体,通过附加一定种类和质量浓度的外源激素,找到美洲冬青诱导、增殖和壮苗以及生根的理想培养基,建立美洲冬青组织培养再生体系。结果表明,美洲冬青较理想的各种培养基为:①腋芽诱导:MS+BA0.5 mg.L-1+IBA 0.1 mg.L-1,其诱导率为95.5%;②丛芽增殖:MS+CPPU(氯吡笨脲)1.0 mg.L-1+NAA 0.5 mg.L-1,增殖系数为11;③壮苗:MS+BA2.0 mg.L-1+NAA 0.2 mg.L-1;④生根:1/2MS+IBA2.0 mg.L-1,生根率达到99.9%,根长3.4 cm。 李永欣 王晓明 陈明皋 曾慧杰 李俊彬关键词:激素 增殖 金银花多胺高效液相色谱法测定体系的建立 被引量:3 2007年 以金银花新品种‘金翠蕾’为材料,对金银花中多胺高效液相色谱法测定的技术体系进行了优化。结果表明:重蒸水配制各种溶液和流动相比超纯水的杂峰少。样品上清液过ODS-C18固相萃取柱2次可有效纯化。苯甲酰化反应以加苯甲酰氯7μL,反应后再用乙醚萃取吹干2次为宜。适宜的色谱分析条件是:流动相为甲醇和水(64:36),检验波长230nm,流速0.7mL/min,柱温为30℃。可在15min内将腐胺、亚精胺、精胺完全分离并可进行定量测定,线性关系良好(r值大于0.99)。该方法简洁、快速、灵敏度高、重现性好,可有效分析金银花中微量多胺的含量。 王晓明 李俊彬 李永欣关键词:金银花 多胺 高效液相色谱法 金银花ISSR分子标记及遗传多样性分析 被引量:24 2008年 以湖南、山东、河南的22个金银花主要栽培品种为材料,利用ISSR分子标记对22个金银花品种进行了遗传多样性分析.结果表明:从100条ISSR引物中筛选出10条能够扩增出清晰、稳定条带的引物;这10条引物对22个金银花品种基因组DNA扩增,共扩增出108条带,其中多态性条带96条,多态性条带比率为88.89%;22个金银花品种间的遗传相似性系数范围在0.41~1.00,平均遗传相似性系数为0.68.利用UPGMA进行系统聚类分析,22个供试金银花品种划分为2大类,第1类为忍冬种群,第2类为灰毡毛忍冬种群,每一大类又分为北方种群与南方种群.而且主成分分析结果支持以上的聚类分析结果.可见,利用ISSR标记可有效地分析金银花种质资源的遗传多样性,为金银花品种鉴别、分类、种质资源的有效利用提供理论依据. 王晓明 谢碧霞 李俊彬 曾慧杰 李永欣关键词:经济林学 金银花 ISSR 聚类分析 金银花ISSR-PCR反应体系的建立与优化 被引量:10 2008年 以金银花叶片基因组DNA为模板,通过单因素试验,研究了退火温度、Taq DNA聚合酶的用量及模板DNA、引物、dNTPs、Mg2+浓度等6种因素对ISSR-PCR扩增的影响,建立了适合于金银花IS-SR-PCR反应体系和扩增程序,即在20μl反应体系中,内含1×PCR反应缓冲液(Mg2+free)、1.5UTaq DNA聚合酶、0.15mmol/L dNTPs、0.4μmol/L引物、1.5mmol/LMgCl2、60ng模板DNA。确定了适宜的退火温度为49.9℃。扩增程序为94℃预变性5min;35个循环为94℃变性30s,49.9℃退火30s,72℃延伸1.5min;最后72℃延伸7min,4℃保存。利用优化反应体系,从100条ISSR引物中筛选出10条稳定性和重复性高的引物;以这10条引物对22个金银花品种基因组DNA扩增,共扩增出108条带,其中多态性条带96条,多态性条带比率为88.9%。金银花ISSR反应体系的建立为利用ISSR标记技术进行金银花品种鉴别、分类、种质资源遗传多样性分析奠定了良好基础。 王晓明 李俊彬 李永欣 曾慧杰关键词:金银花 ISSR