朱晓明
- 作品数：29 被引量：6H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一种发酵培养基及利用其生产黑色素瘤治疗性质粒DNA疫苗pSVK-CAVA的方法
- 本发明公开了一种发酵培养基及利用其生产黑色素瘤治疗性质粒DNA疫苗pSVK-CAVA的方法。每1L高产发酵培养基含：酪蛋白胨12g，酵母提取物16.61g，甘油3.05mL，NH<Sub>4</Sub>Cl1g，0.17...
- 于继云阎瑾琦王宇徐元基张巍吴昊张亮朱晓明
- 文献传递
- 萤光素酶表达质粒pEE14.1-luc的构建及表达
- 2014年
- 目的:为研究10 kb以上DNA疫苗质粒的体内电穿孔递送,构建萤光素酶报告基因表达质粒p EE14.1-luc,并验证其表达。方法:从质粒p GL3-CMV中通过酶切、补平和纯化的方法获得萤光素酶基因luc,克隆入p EE14.1载体,构建重组表达质粒p EE14.1-luc,瞬时转染293T细胞,采用Western印迹、流式细胞术和免疫荧光等方法对萤光素酶基因在体外的表达情况进行验证,并运用活体成像仪检测萤光素酶基因在小鼠活体内的表达。结果:经菌液PCR鉴定和测序验证,p EE14.1-luc与预期设计完全一致;流式细胞术检测luc阳性表达率为22.41%,免疫荧光检测可见绿色荧光表达,Western印迹检测在相对分子质量为62×103处显现目的蛋白条带;同时,利用活体成像技术也检测到萤光素酶基因在小鼠活体内的表达。结论:p EE14.1-luc表达质粒构建成功,为研究DNA疫苗体内表达机制和体内电穿孔递送条件优化奠定了基础。
- 朱晓明李盼王琳王宇张亮徐元基杜芝燕于继云阎瑾琦
- 关键词：萤光素酶活体成像
- 一种复制子DNA疫苗载体及其构建方法与应用
- 本发明公开了一种复制子DNA疫苗载体及其构建方法与其在制备复制子DNA疫苗中的应用。本发明具有卡纳霉素抗性的复制子DNA疫苗载体，是将复制子DNA疫苗载体pSCA1中的氨苄青霉素抗性基因置换为卡那霉素抗性基因后得到的，从...
- 于继云阎瑾琦贾锐张亮徐元基张巍王宇朱晓明
- 文献传递
- 大质粒DNA疫苗pSVK—CAVA高稳定性宿主菌的筛选与鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的：从多种大肠杆菌感受态细胞中筛选出适合该研究大分子质粒DNA疫苗的宿主菌，鉴定其达到中试要求。方法：将疫苗质粒pSVK—CAVA（14．7kb）转化4种大肠杆菌化学感受态细胞并提取质粒，通过琼脂糖凝胶电泳实验检测质粒的形态结构。对基因工程菌进行生化检测，并通过连续传代法和酶切鉴定进行稳定性检测，同时将质粒DNA瞬时转染至293T细胞中检测质粒表达能力。选取质粒含量最高和稳定性最好的宿主菌作为原始种子分装冻存，将原始种子库扩大培养，逐级建立好主种子库和工作种子库即三级种子库。通过摇瓶培养实验在4种常用基础培养基中挑选出最适合质粒生产的培养基。结果：确定了XL-10Gold作为质粒DNA疫苗pSVK—CAVA的宿主菌，基因工程菌传代稳定性和结构稳定性良好，质粒能在293T细胞中体外表达。筛选出TB培养基为基础培养基，质粒容积产量达到9．9mg／L，比LB培养基提高了接近1倍。结论：该研究筛选出大肠杆菌XL-10God作为质粒DNA疫苗的宿主菌，解决了大质粒在常用宿主菌中不稳定的难题，并对基础培养基进行了初步优化。
- 吴昊王宇朱晓明阎瑾琦张巍徐元基田仁礼殷小涛刘姣王琳于继云
- 关键词：宿主菌DNA疫苗高稳定性GOLD
- 老年人抗高血压治疗的挑战与展望
- 2017年
- 高血压疾病发病率日益增加,影响着全球人口的25%以上,其发病率随年龄增长而增加。动脉粥样随着衰老而发生,并导致收缩压增加和舒张压降低（BP）。在老年人群中,血压升高与心血管危险增加有关。对这个人群的试验对于控制发病率和病死率有益处。大多数老年高血压患者的管理指南指出将血压降低到150/90 mmHg。然而,进一步的BP降低是否可以提供有益结果？仍然存在不确定性。最近出版的SPRINT试验表明,在75岁以上的患者中,将SBP（收缩压）降低至120~125 mmHg可提高生存率。在各种抗高血压药物类别中,
- 王琳朱晓明邵新雯
- 关键词：高血压老年人
- 乙肝治疗性DNA疫苗工程菌的建立和发酵培养基的初步优化
- 本研究室前期自主研发了基于塞姆利基森林病毒(SFV)的复制子DNA疫苗载体系统(称为可复制型DNA疫苗)，已经应用于乙型肝炎、肿瘤等新型治疗性DNA疫苗的研究。可复制型DNA疫苗pSVK-HBVA是基于该系统构建的新型乙...
- 朱晓明
- 关键词：乙肝发酵培养基
- 文献传递
- 复方血栓通胶囊对急性脑梗死患者脑血液流变学及血清NSE、IGF-1的影响
- 2017年
- 目的观察复方血栓通胶囊对急性脑梗死患者血液流变学及血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胰岛素样生长因-1(IGF-1)的影响。方法选取医院收治的急性脑梗死患者52例,按入院顺序随机分为对照组和观察组,每组26例。对照组给予抗凝、溶栓等常规治疗,观察组在常规治疗的基础上加用复方血栓通胶囊治疗,共治疗4周。治疗前后分别检测2组血液流变学指标及血清NSE、IGF-1水平。结果治疗4周后,2组血液流变学指标均较治疗前明显降低,且观察组治疗后血液流变学指标较对照组下降明显(P<0.01或P<0.05);2组血清NSE水平均较治疗前明显降低,而血清IGF-1水平较治疗前则明显升高(P<0.01或P<0.05);观察组治疗后血清NSE水平较对照组下降明显,血清IGF-1水平较对照组则明显升高(P<0.05)。结论复方血栓通胶囊可明显改善急性脑梗死患者血液流变学,降低血清NSE水平,提高血清IGF-1水平,具有保护脑神经功能的作用。
- 王琳朱晓明邵新雯
- 关键词：脑梗死复方血栓通胶囊
- 基于载体pSVK的乙肝治疗性质粒DNA疫苗的发酵生产方法及其专用工程菌及高产发酵培养基
- 本发明公开了一种乙肝治疗性质粒DNA疫苗pSVK-HBV的发酵生产方法及其专用工程菌及高产发酵培养基。所述工程菌是转化有乙肝治疗性质粒DNA疫苗pSVK-HBV的大肠杆菌XL10-Gold，命名为E.coli XL10-...
- 于继云阎瑾琦王宇张巍徐元基张亮王琳朱晓明杜芝燕
- 文献传递
- 可复制型抗乙肝免疫基因治疗剂pSVK-HBVE的构建与表达
- 2014年
- 目的构建能同时表达抗体小分子靶向干扰素(dsFvα)和人白介素12(hIL-12)的可复制型抗乙肝免疫基因治疗质粒pSVK-HBVE。方法将pVAX-HBVE质粒双酶切,回收dsFvα-IRES-hIL12片段;将dsFvα-IRES-hIL12片段克隆入早期构建的pSVK载体,得到重组质粒pSVK-HBVE。将重组质粒瞬时转染到293T细胞,ELISA法检测目的基因表达;提取重组质粒pSVKHBVE,注射乙肝转基因小鼠腿部肌肉并采用电穿孔递送,定量PCR检测注射前后转基因小鼠体内HBV基因拷贝数的变化。结果pSVK-HBVE经酶切和测序分析与预期设计完全一致,显示重组质粒构建成功;ELISA检测显示dsFvα和IL-12基因在细胞上清中获得表达;注射重组质粒pSVK-HBVE 30μg仅1次即可使转基因小鼠体内的HBV基因拷贝数降低2个数量级。结论成功构建能够同时表达抗体靶向干扰素(dsFvα)和hIL-12的可复制型抗乙肝免疫基因治疗质粒,为慢性乙肝免疫基因治疗提供新的备选方案。
- 侯沙沙高燕王宇武帅朱晓明郭炳冉张巍徐元基阎瑾琦于继云
- 关键词：乙肝复制型IFN-Α
- 可复制型双质粒抗肾癌DNA疫苗及其构建方法与应用
- 本发明公开了一种抗肾癌双质粒可复制型DNA疫苗及其构建方法与应用。该双质粒DNA疫苗活性成分为pSVK-G250FGB与pSVK-CAVE，其能够诱导小鼠机体产生针对hG250及mVEGFR2抗原特异性的体液免疫和细胞免...
- 于继云阎瑾琦王宇殷小涛武帅朱晓明王籽橙杜芝燕
- 文献传递
