曾凤英
- 作品数:5 被引量:16H指数:3
- 供职机构:浙江大学医学院附属邵逸夫医院更多>>
- 发文基金:浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 淋病奈瑟菌外膜Porin I蛋白多价抗血清的黏附抑制功能被引量:3
- 2004年
- 岑建萍程浩曾凤英林洁张均张行叶俊芦桂青赵可佳
- 关键词:淋病奈瑟菌PORIN上皮细胞
- 淋病奈瑟菌外膜Porin I蛋白基因的构建、表达和鉴定被引量:10
- 2002年
- 目的构建、克隆淋病奈瑟菌外膜PorinI(PI)蛋白基因,并进行表达、纯化和鉴定。方法用PCR法克隆淋病奈瑟菌外膜PI蛋白基因,再与pGEX-4T-2载体连接成表达重组体pGEX-4T-2/PI;经大肠杆菌P2392表达后,用SDS-PAGE、切胶、电洗脱回收等方法纯化GST-PI融合蛋白;然后用特异性淋球菌外膜PI蛋白的单克隆抗体进行斑点免疫层析试验鉴定该蛋白。结果成功地获取了pGEX-4T-2/PI表达重组体,经诱导表达后能获得高表达的GST-PI融合蛋白,其相对分子质量为60000;斑点免疫层析试验显示其为淋病奈瑟菌外膜PI蛋白特异性的。结论本研究将有利于进一步研究淋病奈瑟菌外膜PI蛋白的功能。
- 岑建萍程浩曾凤英方永明周强叶俊高锦程王琦
- 关键词:淋病奈瑟菌基因构建淋病
- 淋球菌外膜Porin Ⅰ蛋白多价抗血清的制备及其临床应用初探被引量:2
- 2007年
- 目的制备淋球菌外膜GST-PⅠ融合蛋白多价抗血清,并探讨该多价抗血清与临床泌尿生殖道分泌物标本的结合情况。方法重组的淋球菌外膜GST-PⅠ融合蛋白免疫家兔,获得多价抗血清;并用双向免疫扩散法鉴定家兔多价抗血清的效价。家兔多价抗血清与临床泌尿生殖道分泌物标本的结合采用试管凝集法,出现棉絮状沉淀则为阳性;并把同一标本的试管凝集法结果与淋球菌培养结果相比较,观察两者的阳性符合率。同时以生理盐水和非淋菌性尿道炎患者的泌尿生殖道分泌物标本作为对照。结果成功免疫家兔并获得了PI蛋白多价抗血清,经鉴定多价抗血清的效价达1:8;淋球菌培养阳性的35例分泌物标本中,试管凝集法阳性23例,两方法结果符合率为65.71%。而对照组试管凝集法结果均为阴性。结论淋球菌外膜PI蛋白不仅具有一定的免疫原性,而且其免疫家兔产生的多价抗血清与淋病患者的分泌物标本有良好的结合率,特异性高。有望经纯化、标记后得到一种新的简单快速的淋病诊断试剂盒。
- 岑建萍程浩曾凤英郑磊卢忠明
- 关键词:奈瑟氏球菌抗血清
- 淋病奈瑟氏外膜PI蛋白基因的构建、表达和鉴定(英文)
- Objetive To construct, express, purify and authenticate the gene of the major outer membrane protein of Neisse...
- 岑建萍程浩曾凤英周强叶俊高锦程方永明王琦
- 文献传递
- 人乳头瘤病毒6b型E7基因的克隆和表达被引量:6
- 2003年
- 目的 克隆人乳头瘤病毒 6b型E7(humanpapillomavirus 6bE7)基因 ,构建原核表达载体 ,并进行蛋白表达和纯化。方法 将HPV 6bE7基因经PCR扩增和亚克隆 ,与GST原核表达载体pGEX 4T 2重组 ,转化E .coliP2 3 92 菌表达蛋白 ,经GlutathioneSepharose 4B亲和层析纯化GST HPV 6bE7融合蛋白。结果 限制性酶切和DNA测序表明 ,HPV 6bE7DNA正确克隆于 pGEX 4T 2多克隆位点。经IPTG诱导表达的GST HPV 6bE7融合蛋白主要存在于可溶性上清。经亲和层析 ,每升诱导菌回收 8.4mg融合蛋白 ,10 %SDS PAGE分析融合蛋白表观分子量约 3 7kDa。结论 成功构建了HPV 6bE7基因原核表达载体 ,并大量表达和纯化了GST HPV
- 周强程浩高锦程岑建萍叶俊曾凤英
- 关键词:克隆基因表达尖锐湿疣