徐军望
- 作品数：23 被引量：196H指数：9
- 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家转基因植物研究与产业化专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 豌豆核基质结合区的分离及其在转基因烟草中的功能分析被引量：10
- 2001年
- 从豌豆基因组中分离出一段具有核基质结合区（ｍａｔｒｉｘ ａｔｔａｃｈｍｅｎｔ ｒｅｇｉｏｎ， Ｍ－ＡＲ）特征的ＤＮＡ序列，与已知序列相比，获得的序列中部缺失了１１５ ｂｐ的重复序列．重复序列上、下游两段序列与已知序列相对应的序列有较高的同源性，并具有Ａ－ｂｏｘ，Ｔ－ｂｏｘ和ＴＡＴＡＡＡ等典型的ＭＡＲ序列特征．为验证此ＤＮＡ序列的功能，以β－葡糖醛酸酶（β－ｇｌｕｃｕｒｏｎｉｄａｓｅ，ＧＵＳ）基因（ｕｉｄＡ）作报导基因构建了植物表达载体，通过农杆菌介导转化了烟草．ＧＵＳ定量检测表明，由于此ＤＮＡ序列的存在，ｕｉｄＡ基因的平均表达水平提高了２倍，最高的单株可达６倍．上述结果表明，该ＤＮＡ具有ＭＡＲ序列的特征序列，并且具有增加转基因表达的功能．
- 李旭刚朱祯徐军望吴茜徐鸿林
- 关键词：核基质结合区转基因植物豌豆烟草外源基因表达烟草
- 玉米MAR序列的分离及其在转基因烟草中的功能研究被引量：1
- 2002年
- 从玉米基因组中分离了一段核基质结合区(MAR)序列,它位于乙醇脱氢酶1基因的5’端启动子区域.为研究此段MAR序列在转基因植物中的功能,将MAR构建在报告基因β-葡糖醛酸酶(GUS)基因(uidA)和植物选择标记新霉素磷酸转移酶Ⅱ基因(nptⅡ)的两侧形成植物表达载体,在载体中两段MAR之间的距离为6.2 kb.GUS活性检测表明,MAR序列对报告基因的表达水平没有影响.这一现象与MAR只构建在报告基因两侧形成小环时提高外源基因表达的结果不同,为进一步研究MAR作用机制提供了基础.
- 李旭刚陈松彪徐军望刘翔朱祯
- 关键词：玉米MAR序列转基因烟草基因表达
- 一种控制植物贮存淀粉发生改变的方法
- 一种控制植物贮存淀粉发生改变的方法,包括:(a)制备嵌合基因,它包括编码淀粉合成过程中的相关基因,该基因的上游端沿有义或反义方向可连接于一个具有启动子活性的核酸片段上,其下游连接于一种转录终止子。(b)用步骤(a)的嵌合...
- 朱祯徐军望
- 文献传递
- 利用PCR对PVX外壳蛋白基因进行同义密码子修饰
- 2003年
- 利用聚合酶链式反应 (PolymeraseChainReaction ,PCR)与限制性内切酶相结合的方法 ,设计 4条含有限制性酶切位点和相应突变的引物。以马铃薯X病毒 (PotatoVirusX ,PVX)外壳蛋白cp基因为模板 ,扩增出相应的片段 ,相应酶切后通过三片段连接构建到克隆载体pBlueKS(+/ - )上。随机挑选重组子测序表明 ,利用三片段拼接成功地在PVX外壳蛋白基因的不同部位产生了突变。实验结果说明利用三片段接可以大大提高筛选得到突变子的效率 ,从而节省人力、物力和时间。
- 冯德江徐军望路子显陈蕾徐鸿林李旭刚朱祯
- 关键词：PCRPVX外壳蛋白基因马铃薯X病毒
- 核基质结合区的研究进展
- 李旭刚徐军望朱祯
- 核基质结合区(Matrix attachment region， MAR)是真核生物染色质中可以与核基质结合的一段DNA序列。它能使染色质形成环状结构，还可以作为DNA复制的起始点或调控基因的转录。在基因工程研究中发现，...
- 关键词：
- 关键词：核基质结合区MAR调控基因表达
- 水稻EPSP合酶第一内含子增强外源基因的表达被引量：14
- 2003年
- 分离并克隆了水稻5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶基因的第一内含子(EPI)。序列分析表明,EPI长704bp,GC含量为36.2％。为进一步研究EPI序列在转基因植物中对外源基因表达水平的影响,将EPI序列插入CaMV35S启动子和报导基因β-葡糖醛酸酶(β-glucuronidase,GUS)基因(gus)之间。采用基因枪法转化烟草叶片,gus基因瞬时表达表明,EPI序列的存在可以使GUS的表达水平提高。利用农杆菌法转化烟草,获得了gus基因稳定表达的植株。GUS活性检测表明EPI内含子的存在可以显著提高GUS基因的表达(P<0.01)。Northern blot分析表明,在转录水平上gus基因在含EPI内含子的转基因植株中的表达高于不含EPIgus基因的表达,并且成熟的gus mRNA中EPI被正确剪取掉了,表明是一种非转译的内含子。GUS定量检测表明,EPI存在可以使GUS的平均表达水平提高3倍,最高单株可提高6倍。
- 徐军望冯德江宋贵生魏晓丽陈蕾伍晓丽李旭刚朱祯
- 关键词：水稻EPSP合酶第一内含子
- 农杆菌介导法获得转可溶性淀粉合成酶基因籼稻被引量：25
- 2003年
- 采用农杆菌介导法将胚乳特异性表达谷蛋白1(Glutelin1,Gtl)基因控制下的可溶性淀粉合成酶基因sss导入籼稻恢复系明恢86,共获得53个独立转化再生植株。PCR检测表明,sss基因已整合进水稻的基因组中。直链淀粉含量测定结果表明,转基因植株后代直链淀粉含量较对照有较大幅度的下降。
- 胡昌泉徐军望苏军陈在杰朱祯王锋
- 关键词：籼稻转基因农杆菌介导法直链淀粉含量
- 烟草tga1a基因的表达对外源基因在植物中表达的影响被引量：1
- 2002年
- 烟草DNA结合蛋白TGA1a可特异地作用于CaMV35S增强子的激活序列as-1（-83～-63）,并表现为转录激活功能.为了研究tga1a基因的表达对外源基因在植物中表达的影响,将它置于维管束特异性启动子rolC下游,并与CaMV35S启动子控制的报道基因串联成一种反式调控系统,构建了植物表达载体,同时,以CaMV35S和rolC分别控制的报道基因构建植物表达载体为阳性对照.通过农杆菌介导方法转化烟草和分子鉴定,证明报道基因存在于转化烟草基因组中,分别测定了不同转基因单株的GUS活性,结果表明:rolC控制下的tga1a的表达显著增强了CaMV35S控制下的报道基因表达,其GUS活性明显高于CaMV35S或rolC单独调控报道基因的转化植株,单株的最高GUS活性达到两个阳性对照的10倍以上.组织化学定位证实该串联系统使GUS蛋白主要集中在维管束组织.这一研究结果为提高外源基因在转基因植株中的表达水平和外源基因的组织特异性表达创立了一个新模式.
- 路子显常团结李旭刚徐军望李慧芬陈宛新冯德江肖桂芳朱祯
- 关键词：外源基因DNA结合蛋白植物转化报道基因植物基因工程
- 通过细胞内的靶向定位大幅度提高外源蛋白在转基因植株的积累水平(英文)被引量：9
- 2003年
- 通过体外操作,对豇豆胰蛋白酶抑制剂(cpti)基因进行修饰,获得了一个融合蛋白基因(sck)。该基因是在cpti基因的基础上,在其5'端添加了信号肽编码序列,在3'端添加了内质网滞留信号编码序列,旨在引导基因转译产物进入细胞内质网,并最终滞留在内质网及其衍生的蛋白体内。用sck基因转化烟草(Nicotiana tabacum L.),对获得的转基因植株进行ELISA检测。结果表明,含有修饰基因的转基因烟草CpTI蛋白含量有明显提高,比转未修饰cpti基因烟草平均高出2倍,最高单株可达4倍以上,同时转基因植株的抗虫性也有了显著的提高。结果表明,采用外源蛋白靶向定位的策略,可大幅度提高外源蛋白在转基因植物细胞内的积累量,在植物基因工程研究中具有广泛的借鉴意义。
- 邓朝阳宋贵生徐军望朱祯
- 关键词：转基因植物转基因烟草抗虫性
- 基因工程改良淀粉品质被引量：63
- 2000年
- 淀粉对人类生活十分重要，它不仅是人们的能量和营养来源，而且还是重要的工业原材料。对于淀粉合成过程及淀粉的加工、使用一直是淀粉研究的重点内容。淀粉的合成在最后阶段涉及到３个关键性的酶是：ＡＤＰＧ焦磷酸化酶、淀粉合成酶以及淀粉分支酶。它们分别催化ＡＤＰ－葡萄糖的形成、葡聚糖链的延伸以及分支链的形成。另外淀粉去分支酶对淀粉最终结构的形成也起到重要作用。本文将介绍上述４个酶近年来的生物化学和分子生物学研究进展，并在此基础上讨论利用基因工程改良淀粉品质的可能途径。
- 徐军望李旭刚朱祯
- 关键词：淀粉直链淀粉支链淀粉基因工程
