徐丽美
- 作品数：33 被引量：89H指数：6
- 供职机构：国家海洋局第三海洋研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家社会公益研究专项计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学天文地球医药卫生更多>>
- 对虾托拉病毒(TSV)RT-PCR快速诊断技术的研究
- 对虾托拉病毒(Taura Syndrome Virus，TSV)于1992年最早在太平洋白对虾(Penaeus．vannamei)体内发现，此病毒是对虾养殖业危害较严重的病毒之一。本文将该病毒基因组的一段序列克隆至转录载...
- 徐丽美吴成林邱名毅王海贵李丹萍杨丰
- 关键词：RT-PCR对虾养殖业
- 文献传递
- 一种白斑综合症病毒启动子及其应用
- 一种白斑综合症病毒启动子及其应用。涉及启动子及其应用，提供一种白斑综合症病毒启动子及其应用。含有白斑综合症病毒启动子表达载体的重组宿主细胞是通过在宿主细胞中转染含有白斑综合症病毒启动子的表达载体获得的，该重组宿主细胞能够...
- 林梵宇李钫徐丽美杨丰
- 对虾白斑综合征病毒结构蛋白基因vp95表达时序分析及其抗体的制备
- 2014年
- 对虾白斑综合征病毒（whitespotsyndromevirus，WSSV）是造成养殖对虾病害的主要病原，其300kb的双链环状DNA基因组共编码532个开放阅读框（openreadingframes，ORF）．蛋白VP95是WSSV的结构蛋白，在病毒囊膜蛋白和核衣壳中均有分布，由ORFwsv442编码，基因全长2400bp．首先对基因vp95的表达时序进行分析，证明该基因属于晚期基因．为了更深入地研究该结构蛋白的功能，选择中间编码200个氨基酸的片段（1051～1650nt）进行克隆表达．此片段被克隆到pET-His载体上，构建好的质粒转化入表达菌株大肠杆菌（Escherichiacoli）BL-21（DE3），经IPTG诱导后，收集细菌，超声破碎后，将含有可溶性表达重组蛋白的上清用Ni2＋ -NTAagaros纯化．纯化的重组蛋白HisVP95-M200免疫小鼠，制备抗血清．为了去除血清中的杂质，用HiTrapNHS-activatedHP（GEHealthcare）亲和层析纯化柱子纯化血清中抗蛋白VP95的抗体．Westernblot分析显示，未纯化的血清和纯化的抗体对病毒粒子中蛋白VP95都有很高的效价，并且具有严格的专一性．为进一步研究VP95蛋白在病毒粒子的包装中的作用，以及其在病毒的入侵过程中的功能奠定了良好的基础．
- 高美玲徐丽美李钫杨丰
- 关键词：对虾白斑综合征病毒转录分析多克隆抗体
- 耐热碱性磷酸酶(Tthxm－AP)基因及其编码蛋白的应用
- 本发明从一株高温菌Thermus thermophilus XM基因组中克隆了一耐热碱性磷酸酶基因，该基因所编码的活性多肽(酶)或者基因工程改造酶能广泛应用于诊断学、免疫学、生物化学和分子生物学的研究领域。本发明首先涉及...
- 徐丽美李建波杨丰
- 文献传递
- 温度影响对虾白斑综合症病毒增殖机制的研究被引量：9
- 2013年
- 已有文献报道温度是影响虾类感染对虾白斑综合症病毒(WSSV)的重要因素但并不清楚其机制.在本实验中我们通过定量检测病毒拷贝数后发现环境温度与病毒增殖速度有相关性.当温度在21～30℃之间时病毒增殖速度最快,病虾于感染后6～8 d全部死亡而高温(33℃)及较低温度(15～18℃)对病毒的增殖均具有一定的抑制作用,虾存活时间超过了14 d;当温度降至12℃或8℃时病毒增殖受到明显抑制,虾存活时间长达40 d.通过激光共聚焦显微镜观察进一步发现病毒进入宿主细胞的能力与温度密切相关,高温(33℃)和低温(12℃)下病毒进入细胞的数量明显比27℃时少;而通过对病毒ie1和vp28基因的转录分析发现与27℃相比,高温(33℃)和低温(12℃)明显改变了病毒基因的转录.本实验结果表明温度影响WSSV基因组的复制、转录及病毒入侵细胞的能力从而导致了病虾死亡时间上的差异.
- 李侃罗淑娅徐丽美
- 关键词：海洋生物学对虾白斑综合症病毒温度VP28
- 对虾白斑杆状病毒定量PCR检测研究
- 王玮徐丽美陈荣忠杨丰
- 对虾白斑杆状病毒（WSBV）是引起对虾病害的一种主要病原，是一种没有包涵体的新型杆状病毒，该病毒毒力强，宿主范围广，死亡率高，迄今为此没有有效的治疗方法，因此必须建立简便快速、有效的检测方法，通过早期诊断、及早预防，防止...
- 关键词：
- 关键词：对虾白斑杆状病毒定量PCR
- 海水养殖病害病原检测及防治的开发研究-对虾和大黄鱼等鱼类主要病原检测及防治的开发研究
- 陈新华杨丰徐洵彭宣宪关瑞章徐丽美王小文王三英黄文树
- 简要技术说明：该项目采用现代生物学技术对近年来严重危害我国大黄鱼养殖的虹彩病毒、对虾养殖的对虾托拉病毒（TSV）进行全面深入的研究，建立了特异性强、灵敏度高的大黄鱼虹彩病毒PCR检测技术、对虾托拉病毒RT-PCR检测技术...
- 关键词：
- 关键词：对虾大黄鱼病原检测
- 多种对虾病毒同步检测方法
- 本发明提供了一种多种对虾病毒同步检测方法，方便、快速、准确检测WSSV、MBV、IHHNV、HPV和TSV的方法，以期为对虾病原的检测提供科学依据。其最大的优点在于五种病毒PCR模板的制备采用同一个方法，即在同一个样品中...
- 徐丽美
- 文献传递
- 对虾桃拉病毒(TSV)RT-PCR快速诊断技术的研究被引量：7
- 2005年
- 对虾桃拉病毒(Taura Syndrome Virus,TSV)最早于1992 年在凡纳对虾(Penaeus vannamei)体内发现,此病毒是对虾养殖业危害较严重的病毒之一.将该病毒基因组的一段序列克隆至转录载体 pSP64(PolyA)上,经体外转录、磁珠法分离、纯化获得了人工的TSV RNA模板;用定量的TSV RNA阳性对照模板进行RT PCR条件优化,灵敏度检测以及样品制备方法等试验,结果表明:RT PCR检测的灵敏度可达到0.1 fg,相当于 100 个病毒粒子;所制备的样品对病毒 RNA的逆转录及扩增无抑制,适合于对虾桃拉病毒快速检测.
- 徐丽美吴成林邱名毅王海贵李丹萍杨丰
- 关键词：TSV凡纳对虾RT-PCR快速诊断技术RNA病毒
- 海水养殖病害病原检测及防治的开发研究
- 陈新华杨丰徐洵彭宣宪关瑞章徐丽美王小文王三英黄文树
- 该项目采用先进生物技术对近年来严重危害我国养殖对虾、大黄鱼和鳗鲡的主要病害、病原检测与免疫防治进行了深入的研究，首次证实引发我国大黄鱼大规模流行病的主要病原是一种虹彩病毒，测定病毒全基因组序列，建立大黄鱼虹彩病毒PCR快...
- 关键词：
- 关键词：大黄鱼对虾虹彩病毒
