张锦秀
- 作品数：15 被引量：59H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家高技术研究发展计划“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 检测猪圆环病毒2型抗体SPA胶体金免疫层析方法的建立
- 本研究采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒，并将其标记SPA，将金标SPA包被至玻璃纤维膜上，将PCV-2 Cap蛋白、抗SPA抗体分别包被至硝酸纤维素膜的检测线与质控线上，建立了一种检测PCV-2抗体的胶体金免疫层析方法...
- 范晓娟李刚史利军张锦秀李伟
- 关键词：猪圆环病毒病毒感染免疫学检验抗体测定
- 文献传递
- 检测猪圆环病毒2型抗体SPA胶体金免疫层析方法的建立
- 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,并将其标记SPA,将金标SPA包被至玻璃纤维膜上,将PCV-2 Cap蛋白、抗SPA抗体分别包被至硝酸纤堆素膜的检测线与质控线上,建立了一种检测PCV-2抗体的胶体金免疫层析方法。检测...
- 范晓娟李刚史利军张锦秀李伟
- 关键词：猪圆环病毒2型胶体金免疫层析抗体检测葡萄球菌蛋白A
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型间接ELISA抗体检测方法的建立与初步应用被引量：3
- 2009年
- 本研究利用原核表达的猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白作为标准抗原蛋白建立PCV2抗体检测方法,同时对建立的检测方法的相关条件进行了优化。通过优化确定抗原的最佳包被浓度为10μg/mL,血清的最佳稀释度为1∶160,最佳封闭试剂为10%牛血清,二抗的使用浓度为1∶1000,血清及二抗的最佳反应条件为37℃孵育60 min,底物的最佳反应条件为37℃反应10 min,cutoff值为0.25。通过批内及批间重复性的评价,变异系数均小于0.1,表明本检测方法具有较高的可重复性。与标准的检测试剂盒相比,检测临床样本时,本检测方法与对照试剂盒检测结果符合率为91.7%。结果表明,建立的检测方法可用于临床PCV2抗体的检测。
- 史利军张锦秀任林柱李刚
- 关键词：猪圆环病毒2型核衣壳蛋白间接酶联免疫吸附试验
- 小反刍兽疫快速诊断技术及其疫苗的研究进展被引量：33
- 2007年
- 小反刍兽疫（PPR）是一种感染家养和野生反刍类动物的急性传染病,它是由副粘病毒科麻疹病毒属的小反刍兽疫病毒（PPRV）引起的。本病没有有效治疗方法,只能预防,因此诊断监测技术是控制该病的重要手段。由于传统的血清学检测技术,如琼脂糖凝胶免疫扩散（AGID）、病毒中和试验（VNT）等存在诸多缺陷,难以用于大规模的疫情监控。目前国际上发展的主流是以分子生物学技术为基础的检测方法,如RT-PCR、PCR-ELISA等,这些新技术灵敏便捷,高通量,而且能够在野外进行。而疫苗以重组疫苗为研究方向。
- 李刚江彦增晁生玉张锦秀朱鸿飞时建忠
- 关键词：小反刍兽疫
- 猪圆环病毒Ⅱ型修饰Cap蛋白基因的原核表达及纯化
- 目的：本研究基于原核表达系统表达猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)Cap蛋白。 方法：PCV-2 ORF2基因编码的Cap蛋白含有能产生免疫反应的多个抗原表位,本研究针对Cap蛋白基因设计引物,去掉核定位信号肽的核苷酸...
- 张锦秀晁生玉史利军候绍华李刚
- 关键词：核衣壳蛋白原核表达蛋白纯化
- 文献传递
- 检测猪圆环病毒2型抗体SPA胶体金免疫层析方法的建立
- 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,并将其标记SPA,将金标SPA包被至玻璃纤维膜上,将PCV-2 Cap蛋白、抗SPA抗体分别包被至硝酸纤维素膜的检测线与质控线上,建立了一种检测PCV-2抗体的胶体金免疫层析方法。检测...
- 范晓娟李刚史利军张锦秀李伟
- 关键词：猪圆环病毒2型胶体金免疫层析法葡萄球菌蛋白A抗体检测
- 文献传递
- 猪圆环病毒Ⅱ型修饰Cap蛋白基因的原核表达及纯化
- 2009年
- 目的:本研究基于原核表达系统表达猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)Cap蛋白。方法:PCV-2ORF2基因编码的Cap蛋白含有能产生免疫反应的多个抗原表位,本研究针对Cap蛋白基因设计引物,去掉核定位信号肽的核苷酸序列克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,筛选重组菌并进行原核表达、鉴定及纯化。结果:纯化后的修饰Cap蛋白是能够与猪圆环病毒Ⅱ型的阳性血清发生特异性反应。结论:表达的重组修饰Cap蛋白可以作为标准抗原蛋白用于PCV-2的检测。
- 张锦秀晁生玉史利军候绍华李刚
- 关键词：核衣壳蛋白纯化
- 猪圆环病毒Ⅱ型修饰Cap蛋白基因的原核表达及纯化
- 目的:本研究基于原核表达系统表达猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)Cap蛋白.方法:PCV-2 ORF2基因编码的Cap蛋白含有能产生免疫反应的多个抗原表位,本研究针对Cap蛋白基因设计引物,去掉核定位信号肽的核苷酸序列克隆到...
- 张锦秀晁生玉史利军候绍华李刚
- 关键词：核衣壳蛋白纯化
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型LAMP检测方法的建立与评价被引量：6
- 2010年
- 根据猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)Rep和Cap基因保守区设计2对引物,1对外引物和1对内引物;利用设计的4条引物,在Bst大片段聚合酶的作用下,对PCV2 DNA进行恒温扩增;扩增条件为63℃恒温反应1h;建立了PCV2环媒恒温扩增技术(LAMP)检测方法。对检测方法特异性评价表明,检测方法只能检测PCV2 DNA,对猪圆环病毒1型(Porcine circovirus type 1,PCV1)、猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)及猪伪狂犬病病毒(Porcine pseudorabies virus,PRV)检测无交叉反应。灵敏度评价表明,该检测方法可以检测到样品中10个拷贝的PCV2 DNA含量。
- 史利军张锦秀章金刚李伟范晓娟李刚
- 关键词：猪圆环病毒2型
- PCV-2 Cap蛋白截短基因的表达及间接ELISA检测方法的建立
- 猪圆环病毒2型(Porcine circovirus-2,PCV-2)对猪有致病性,可引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(Postweaning multisystemic wasting syndrom,PMWS)。目前,该...
- 史利军李刚张锦秀
- 文献传递
