张祖兴
- 作品数：10 被引量：79H指数：6
- 供职机构：宁波大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划浙江省自然科学基金浙江省重点科技计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 大黄鱼血液基因组DNA的提取及其效果被引量：5
- 2006年
- 应用Sangon血液基因组DNA小量抽提试剂盒,提取大黄鱼血液组织的基因组DNA,并以所提取的DNA为模板进行RAPD扩增效果分析。结果显示,血液基因组DNA稳定性好、质量高,分子量大小在20kb左右;RAPD扩增条带清晰,能满足RAPD等一般分子实验对于模板DNA的质量要求。为大黄鱼的隔代连续研究和濒危鱼类分子实验所要求的活体基因组DNA的获得提供了一个可行的样本组织采集方法。
- 张祖兴李明云张春丹刘伟成管丹冬
- 关键词：大黄鱼RAPD
- 大黄鱼(Pseudosciaena crocea)转铁蛋白(Tf)基因克隆及序列分析被引量：6
- 2007年
- 提要应用RNeasy animal mini试剂盒抽提大黄鱼total RNA,逆转录合成模板cDNA;同时综合分析从GenBank数据库查询到已报道的转铁蛋白(Tf)基因序列,先设计并合成扩增引物扩增出大黄鱼转铁蛋白部分基因序列,再应用RACE技术,克隆出大黄鱼转铁蛋白全长cDNA基因,全长2461个核苷酸,编码661个氨基酸。应用WCG软件包,采用DNADIST和NEIGHBOR分析方法,构建了转铁蛋白系统进化树。树图显示与传统的分类地位大致相符,可以看出转铁蛋白在海水鱼和淡水鱼的进化上的差异,同时也显示大黄鱼Tf与真鲷的同源性最高。
- 李明云陈炯张祖兴管丹东张呈念
- 关键词：大黄鱼转铁蛋白系统发育
- 大黄鱼(Pseudosciaena crocea)热激蛋白的基因克隆、原核表达及抗血清的制备被引量：12
- 2006年
- 应用trizol裂解法提取象山港网箱养殖大黄鱼肝脏总RNA,采用RTPCR获得大黄鱼cDNA;通过设计特异引物进行PCR扩增,将PCR产物转化到质粒并直接测序,得到1.7kb的目的基因;同时将此目的基因连接到表达质粒pSBET中,在大肠杆菌BL21中进行诱导表达以及表达产物的分析。克隆基因的表达产物经SDSPAGE分析表明,HSP基因的蛋白分子量为60kDa左右,与阅读框的编码大小一致;表达蛋白经纯化后免疫小鼠制备抗血清。Westernblotting检测结果表明,制备的抗血清与HSP蛋白起较强的特异性反应。HSP基因的系统进化分析表明,大黄鱼与非洲爪蟾最为接近,从侧面印证了脊椎动物中两栖纲动物与鱼纲动物的亲源关系。通过大黄鱼HSP基因的提取和分析,可为以后制备出核酸探针、筛选和克隆出一批具有优良性状的基因、构建基因文库等研究工作奠定基础。
- 张祖兴李明云陈炯邬勇
- 关键词：大黄鱼热激蛋白基因原核表达抗血清
- 大黄鱼热激蛋白cDNA克隆及系统发育分析被引量：1
- 2007年
- 根据已报道的HSP基因序列(EMB登录号:AF506290),设计出特异引物,PCR扩增后测序,获得1.7 kb大小的大黄鱼热激蛋白cDNA基因序列。HSP氨基酸序列的系统进化分析表明:不同物种编码的HSP存在一些明显相关的群体,高等动物编码的HSP在进化上紧密相关,形成一个显著群体,大黄鱼编码的HSP蛋白位于高等动物群体中,这与大黄鱼的亲缘关系大致吻合,其中与非洲爪蟾的同源性最高(92.3%),也间接印证了脊椎动物中两栖纲动物与鱼纲动物的亲源关系。通过大黄鱼HSP基因的提取和分析,可为以后制备出核酸探针、筛选和克隆出一批具有优良性状的基因、构建基因文库等研究工作奠定基础,同时对大黄鱼的品质改良和良种的选育有重要意义。
- 李明云张祖兴邬勇陈炯史雨红
- 关键词：大黄鱼克隆系统发育
- 鮸鱼亲鱼培育及其人工繁殖的研究被引量：24
- 2005年
- 采用自然苗培育成的1龄(鱼免)鱼,通过'春肥、夏育、秋繁、冬保'8字方针培育成亲鱼,性成熟率达到95%.经LHRH-A3 0.8～1.8 μg /kg催产并放人产卵池自行产卵,获产率达到96.83%.获受精卵650万余粒,受精率达到52%.受精后21.8 h孵化出鱼苗,孵化率达到70%.
- 李明云郑忠明竺俊全徐万土邬勇黄福勇张祖兴刘伟成
- 关键词：亲鱼培育人工催产人工孵化
- Cu^(2+)、Zn^(2+)、Co^(2+)对雨生红球藻生长的影响被引量：7
- 2006年
- 以单细胞雨生红球藻为试验材料,以MAV为培养基通过单因子试验和正交试验研究了Cu2+、Zn2+、Co2+3种微量元素离子对雨生红球藻生长的影响。单因子试验结果表明,Cu2+、Zn2+、Co2+最佳质量浓度分别为2.0×10-7、3.4×10-7、9.0×10-7mol/L。正交试验结果表明,Cu2+的最适质量浓度是2.0×10-8mol/L;Zn2+的最适质量浓度是3.4×10-7mol/L;Co2+的最适质量浓度是6.0×10-7mol/L.。在这3种重金属离子的正交试验中在所研究的浓度范围内Cu2+和Co2+存在着较显著交互作用。
- 刘伟成李明云蒋霞敏张祖兴应仲富
- 关键词：雨生红球藻正交试验CU^2+ZN^2+CO^2+
- 大黄鱼种质资源研究进展被引量：21
- 2006年
- 张祖兴李明云
- 关键词：大黄鱼同工酶RAPD
- 大黄鱼优良品系选育研究
- 李明云竺俊全薛良义陈炯徐万土郑根兴张春丹张祖兴管丹东
- 该项目采用群体结合分子标记选育方法，建立了大黄鱼四个品系，选育出了性状优良的岱衢洋优良选育系和反交系；从群体中选育出具有优良性状的亲鱼5000余尾，共培育优良苗种1816万尾，提供养殖308万尾，放流1508万尾。平均催...
- 关键词：
- 关键词：大黄鱼优良品系选育养殖
- 大黄鱼mtDNA ND5和cytb基因的克隆与序列分析
- 通过设计特异性引物对大黄鱼线粒体DNA(mtDNA)辅酶5(ND5)和细胞色素b(cytb)基因进行PCR扩增.扩增产物经琼脂糖电泳检测、纯化后直接测序.结果得到ND5的序列1839bp和cytb基因序列382bp.应用...
- 李明云张祖兴朱俊杰
- 关键词：大黄鱼细胞色素B
- 文献传递
- 大黄鱼mtDNA ND5和Cytb基因的克隆与序列分析被引量：8
- 2006年
- 2004年4月,将采自浙江省象山港海区网箱养殖的大黄鱼样本,提取总DNA,通过设计特异性引物对大黄鱼线粒体DNA(m tDNA)的辅酶5(ND5)和细胞色素b(Cytb)基因进行PCR扩增。扩增产物经琼脂糖电泳检测、纯化后直接测序。得到ND5的序列1839 bp和Cytb基因序列382 bp。应用prim er prem ier5和MEGA3软件包所作的系统发育分析表明:依据大黄鱼ND5序列所作的进化树总体支持传统的分类地位,大黄鱼更接近塘鳢鱼科。而基于Cytb基因所作的分析表明,黑鳃梅童鱼是大黄鱼在石首鱼科中是遗传距离最小的。
- 张祖兴李明云朱俊杰
- 关键词：大黄鱼CYTB进化树
