张海峰
- 作品数：9 被引量：38H指数：4
- 供职机构：蚌埠医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省教委科研基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 纯化的结核杆菌多肽抗原刺激人γδT细胞的效应分析被引量：10
- 2004年
- 目的 :探讨从结核杆菌多肽抗原 (Mtb Ag)纯化的多肽 (C主肽 )对人新鲜外周血γδT细胞的促增殖效应以及对已活化扩增的T细胞再次刺激的激活效应。方法 :采用不同剂量的C主肽体外刺激健康人外周血PBMC ,培养 10天时经流式细胞仪检测细胞表型 ;另外以γδT细胞活化标志分子CD6 9的表达为指标 ,分析C主肽对已被Mtb Ag激活扩增 13天的γδT细胞再次刺激的激活效应。同时以MTT法检测C主肽的再刺激对已活化扩增的γδT细胞的促增殖活性。结果 :结核杆菌C主肽对人新鲜的γδT细胞具有显著扩增效应 ;当C主肽再刺激已经活化的γδT细胞时 ,可使其显著表达CD6 9分子 ,同时对γδT细胞具有显著促增殖活性。结论 :结核杆菌C主肽可能是Mtb
- 陈勇吕合作李柏青王伟张海峰
- 关键词：ΓΔT细胞结核杆菌多肽抗原增殖活性CD69
- 抗微生物肽——颗粒溶解素的研究进展
- 2002年
- 颗粒溶解素是新近发现的一种毒性分子,具有广谱的抗病原微生物及杀伤肿瘤细胞作用,其作用机制涉及神经酰氨和caspase依赖和非依赖途径,并与其二级结构及所带正电荷氨基酸相关。由于其广谱的抗病原微生物作用及对正常宿主细胞的低毒性,所以它在消除耐药性病原微生物方面是一种很有吸引力的生物制剂,已成为抗微生物肽研究的一个新热点。
- 张海峰
- 关键词：抗微生物肽基因结构分子结构
- 结核杆菌抗原激活γδT细胞后ZAP-70的活化规律
- γδT细胞大多数不表达CD4或CD8、识别抗原多为MHC非依赖性的,因此推测在抗原激活的信号传导过程,与αβT细胞会有所不同。已知在抗原激发普通αβT细胞的活化信号传导过程中,信号蛋白分子ξ链边接蛋白(ZAP-70)可迅...
- 吕合作陈勇张海峰侯彦强吴俊英李柏青
- 关键词：ZAP-70结核杆菌ΓΔT细胞磷酸化
- 文献传递
- 刺激人γδ^+ T细胞增殖的结核杆菌多肽抗原的纯化与活性鉴定被引量：14
- 2003年
- 目的:纯化可刺激人γδ+ T细胞增殖的结核杆菌耐热多肽抗 原。方法:采用快速蛋白液相色谱仪(FPLC)S-100分子筛层析柱,对结核杆菌耐热抗原(Mtb-Ag)初步分离。将获得的结核杆菌耐热Mr低的多肽抗原(Mtb-LW-Ag)洗脱峰,分别再经FPLC Mono Q离子交换层析柱进一步纯化,并且采用流式细胞仪对获得的Mtb-LW-Ag进行刺激γδ+ T细胞增殖活性的测定。结果:Mtb-Ag经FPLC S-100柱可分离出1个大分子蛋白峰A和3个M,低的多肽峰(B,C,D)。Mr低的多肽峰分别经Mono Q柱层析,鉴定出B峰含有6个主峰,C峰含有1个主峰,D峰含有8个主峰。对Mtb-LW-Ag及其纯化多肽进行活性检测,发现多肽峰B和C以及纯化多肽B-Ⅲ和C-主肽均可显著刺激γδ+ T细胞扩增。结论:利用FPLC法可快速高效地从Mtb-Ag中纯化出多种Mr低的多肽,而且其中的B-Ⅲ多肽和C-主肽可能是促进γδ+ T细胞活化增殖的主要多肽。
- 陈勇吕合作胡建国候彦强张海峰李柏青何海辉
- 关键词：结核杆菌多肽抗原纯化活性鉴定
- 人MtbAK细胞在裸鼠肿瘤模型中的抗肿瘤效应
- 近年来研究资料表明γδT细胞在抗感染及抗肿瘤免疫中可发挥着重要作用。本室最近用结核杆菌低分子多肽抗原(Mtb-Ag)体外刺激人PBMC,IL-2扩增后可获得富含γδT细胞的杀伤细胞,称Mtb-AK,在体外对多种肿瘤细胞株...
- 张海峰吕合作胡建国李柏青
- 文献传递
- 可激活人γδT细胞的结核杆菌耐热多肽抗原的初步纯化与活性鉴定被引量：12
- 2002年
- 目的 对结核杆菌耐热多肽抗原（Mtb-Ag）的蛋白组成进行定性分析,并观察Mtb-Ag及其纯化组分刺激人外周血rδT细胞和αβT细胞增殖反应的量效关系。方法 用快速蛋白液相色谱仪（FPLC）定性分析Mtb-Ag的蛋白组成,并用不同剂量的Mtb-Ag及其纯化组分体外刺激健康人外周血PBMC,培养9d后经流式细胞仪检测细胞表型。结果 Mtb-Ag经FPLC MonoQ离子交换柱分析存在20种蛋白成分。Mtb-Ag在合适刺激剂量时对人rδT细胞发挥优势扩增;当剂量过大则对αβT细胞发挥优势扩增;其分离纯化的含大分子蛋白的蛋白峰I随着刺激剂量增加而对αβT细胞的扩增表现显著增强趋势;而其分离的含低分子多肽的蛋白峰Ⅱ随着刺激剂量增加则对rδT细胞扩增表现显著增强趋势,并且其活性明显高于蛋白峰I,同时其对αβT细胞的扩增效应并不明显,并显著低于Mtb-Ag和蛋白峰I。结论 Mtb-Ag刺激rδT细胞扩增时应选择合适的刺激剂量,其所含的低分子多肽抗原能特异性激活rδT细胞,而其所含的大分子蛋白抗原则特异性激活αβT细胞。
- 陈勇胡建国吕合作侯彦强张海峰李柏青何海辉
- 关键词：结核杆菌ΓΔT细胞抗原
- 结核杆菌抗原激活的杀伤细胞内γδT细胞亚群变化的动态测定
- 近年研究发现,γδT细胞可能在抗肿瘤免疫方面有重要作用。本室最近研究工作表明,人PBMC经Mtb-Ag激活和扩增的杀伤细胞(MtbAK)中富含γδT细胞,具有较强瘤活性和较广的杀瘤谱,并发现Mtb-AgAK对低表达Fas...
- 陈勇张海峰吕合作李柏青
- 关键词：ΓΔT细胞结核杆菌抗原
- 文献传递
- 4-1BB(CD137)配体在几种肿瘤细胞株上的表达被引量：6
- 2003年
- 目的 :研究 4 1BBL在几种人肿瘤细胞株上的表达。方法 :用RT PCR法检测肿瘤细胞内 4 1BBLmRNA水平的表达 ;用流式细胞仪检测肿瘤细胞膜表面 4 1BBL的表达。结果 :4 1BBL在Jurkat细胞株上高表达 (98.97% ) ,在HL 6 0和K5 6 2上表达较低 (分别为 2 4 .77%和 19.2 3% ) ,而在HT 2 9细胞株上基本不表达 (2 .13% )。结论 :4
- 吴俊英钱峰张海峰吕合作李柏青
- 关键词：肿瘤细胞细胞株流式细胞仪
- 人颗粒溶解素cDNA克隆及在大肠埃希菌中的表达被引量：3
- 2003年
- 目的 :构建颗粒溶解素 (granulysin)cDNA原核表达载体并进行表达。 方法 :采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术获得颗粒溶解素cDNA ,克隆到pGEM T载体 ,测序正确后 ,再亚克隆到质粒 pGEX 4T1中 ,构建重组表达载体 pGEX 4T1 granulysin ,并转化大肠埃希菌DH5α,诱导GST granulysin融合蛋白表达。 结果 :诱导含重组表达载体pGEX 4T1 granulysin的大肠埃希菌DH5α后 ,免疫印迹显示出一条相对分子量 (Mr)为 4 4 0 0 0的蛋白条带。结论 :获得了颗粒溶解素与GST的融合蛋白 。
- 张海峰吕合作李柏青
- 关键词：RT-PCRCDNA融合蛋白原核表达
