张海峰
- 作品数：9 被引量：40H指数：4
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- 纯化的结核杆菌多肽抗原刺激人γδT细胞的效应分析被引量：10
- 2004年
- 目的 :探讨从结核杆菌多肽抗原 (Mtb Ag)纯化的多肽 (C主肽 )对人新鲜外周血γδT细胞的促增殖效应以及对已活化扩增的T细胞再次刺激的激活效应。方法 :采用不同剂量的C主肽体外刺激健康人外周血PBMC ,培养 10天时经流式细胞仪检测细胞表型 ;另外以γδT细胞活化标志分子CD6 9的表达为指标 ,分析C主肽对已被Mtb Ag激活扩增 13天的γδT细胞再次刺激的激活效应。同时以MTT法检测C主肽的再刺激对已活化扩增的γδT细胞的促增殖活性。结果 :结核杆菌C主肽对人新鲜的γδT细胞具有显著扩增效应 ;当C主肽再刺激已经活化的γδT细胞时 ,可使其显著表达CD6 9分子 ,同时对γδT细胞具有显著促增殖活性。结论 :结核杆菌C主肽可能是Mtb
- 陈勇吕合作李柏青王伟张海峰
- 关键词：ΓΔT细胞结核杆菌多肽抗原增殖活性CD69
- 抗微生物肽——颗粒溶解素的研究进展
- 2002年
- 颗粒溶解素是新近发现的一种毒性分子,具有广谱的抗病原微生物及杀伤肿瘤细胞作用,其作用机制涉及神经酰氨和caspase依赖和非依赖途径,并与其二级结构及所带正电荷氨基酸相关。由于其广谱的抗病原微生物作用及对正常宿主细胞的低毒性,所以它在消除耐药性病原微生物方面是一种很有吸引力的生物制剂,已成为抗微生物肽研究的一个新热点。
- 张海峰
- 关键词：抗微生物肽基因结构分子结构
- 结核杆菌抗原激活γδT细胞后ZAP-70的活化规律
- γδT细胞大多数不表达CD4或CD8、识别抗原多为MHC非依赖性的,因此推测在抗原激活的信号传导过程,与αβT细胞会有所不同。已知在抗原激发普通αβT细胞的活化信号传导过程中,信号蛋白分子ξ链边接蛋白(ZAP-70)可迅...
- 吕合作陈勇张海峰侯彦强吴俊英李柏青
- 关键词：ZAP-70结核杆菌ΓΔT细胞磷酸化
- 文献传递
- 刺激人γδ^+ T细胞增殖的结核杆菌多肽抗原的纯化与活性鉴定被引量：14
- 2003年
- 目的:纯化可刺激人γδ+ T细胞增殖的结核杆菌耐热多肽抗 原。方法:采用快速蛋白液相色谱仪(FPLC)S-100分子筛层析柱,对结核杆菌耐热抗原(Mtb-Ag)初步分离。将获得的结核杆菌耐热Mr低的多肽抗原(Mtb-LW-Ag)洗脱峰,分别再经FPLC Mono Q离子交换层析柱进一步纯化,并且采用流式细胞仪对获得的Mtb-LW-Ag进行刺激γδ+ T细胞增殖活性的测定。结果:Mtb-Ag经FPLC S-100柱可分离出1个大分子蛋白峰A和3个M,低的多肽峰(B,C,D)。Mr低的多肽峰分别经Mono Q柱层析,鉴定出B峰含有6个主峰,C峰含有1个主峰,D峰含有8个主峰。对Mtb-LW-Ag及其纯化多肽进行活性检测,发现多肽峰B和C以及纯化多肽B-Ⅲ和C-主肽均可显著刺激γδ+ T细胞扩增。结论:利用FPLC法可快速高效地从Mtb-Ag中纯化出多种Mr低的多肽,而且其中的B-Ⅲ多肽和C-主肽可能是促进γδ+ T细胞活化增殖的主要多肽。
- 陈勇吕合作胡建国候彦强张海峰李柏青何海辉
- 关键词：结核杆菌多肽抗原纯化活性鉴定
- 人MtbAK细胞在裸鼠肿瘤模型中的抗肿瘤效应
- 近年来研究资料表明γδT细胞在抗感染及抗肿瘤免疫中可发挥着重要作用。本室最近用结核杆菌低分子多肽抗原(Mtb-Ag)体外刺激人PBMC,IL-2扩增后可获得富含γδT细胞的杀伤细胞,称Mtb-AK,在体外对多种肿瘤细胞株...
- 张海峰吕合作胡建国李柏青
- 文献传递
- 可激活人γδT细胞的结核杆菌耐热多肽抗原的初步纯化与活性鉴定被引量：14
- 2002年
- 目的 对结核杆菌耐热多肽抗原（Mtb-Ag）的蛋白组成进行定性分析,并观察Mtb-Ag及其纯化组分刺激人外周血rδT细胞和αβT细胞增殖反应的量效关系。方法 用快速蛋白液相色谱仪（FPLC）定性分析Mtb-Ag的蛋白组成,并用不同剂量的Mtb-Ag及其纯化组分体外刺激健康人外周血PBMC,培养9d后经流式细胞仪检测细胞表型。结果 Mtb-Ag经FPLC MonoQ离子交换柱分析存在20种蛋白成分。Mtb-Ag在合适刺激剂量时对人rδT细胞发挥优势扩增;当剂量过大则对αβT细胞发挥优势扩增;其分离纯化的含大分子蛋白的蛋白峰I随着刺激剂量增加而对αβT细胞的扩增表现显著增强趋势;而其分离的含低分子多肽的蛋白峰Ⅱ随着刺激剂量增加则对rδT细胞扩增表现显著增强趋势,并且其活性明显高于蛋白峰I,同时其对αβT细胞的扩增效应并不明显,并显著低于Mtb-Ag和蛋白峰I。结论 Mtb-Ag刺激rδT细胞扩增时应选择合适的刺激剂量,其所含的低分子多肽抗原能特异性激活rδT细胞,而其所含的大分子蛋白抗原则特异性激活αβT细胞。
- 陈勇胡建国吕合作侯彦强张海峰李柏青何海辉
- 关键词：结核杆菌ΓΔT细胞抗原
- 结核杆菌抗原激活的杀伤细胞内γδT细胞亚群变化的动态测定
- 近年研究发现,γδT细胞可能在抗肿瘤免疫方面有重要作用。本室最近研究工作表明,人PBMC经Mtb-Ag激活和扩增的杀伤细胞(MtbAK)中富含γδT细胞,具有较强瘤活性和较广的杀瘤谱,并发现Mtb-AgAK对低表达Fas...
- 陈勇张海峰吕合作李柏青
- 关键词：ΓΔT细胞结核杆菌抗原
- 文献传递
- 4-1BB(CD137)配体在几种肿瘤细胞株上的表达被引量：6
- 2003年
- 目的 :研究 4 1BBL在几种人肿瘤细胞株上的表达。方法 :用RT PCR法检测肿瘤细胞内 4 1BBLmRNA水平的表达 ;用流式细胞仪检测肿瘤细胞膜表面 4 1BBL的表达。结果 :4 1BBL在Jurkat细胞株上高表达 (98.97% ) ,在HL 6 0和K5 6 2上表达较低 (分别为 2 4 .77%和 19.2 3% ) ,而在HT 2 9细胞株上基本不表达 (2 .13% )。结论 :4
- 吴俊英钱峰张海峰吕合作李柏青
- 关键词：肿瘤细胞细胞株流式细胞仪
- 人颗粒溶解素cDNA克隆及在大肠埃希菌中的表达被引量：3
- 2003年
- 目的 :构建颗粒溶解素 (granulysin)cDNA原核表达载体并进行表达。 方法 :采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术获得颗粒溶解素cDNA ,克隆到pGEM T载体 ,测序正确后 ,再亚克隆到质粒 pGEX 4T1中 ,构建重组表达载体 pGEX 4T1 granulysin ,并转化大肠埃希菌DH5α,诱导GST granulysin融合蛋白表达。 结果 :诱导含重组表达载体pGEX 4T1 granulysin的大肠埃希菌DH5α后 ,免疫印迹显示出一条相对分子量 (Mr)为 4 4 0 0 0的蛋白条带。结论 :获得了颗粒溶解素与GST的融合蛋白 。
- 张海峰吕合作李柏青
- 关键词：RT-PCRCDNA融合蛋白原核表达
