张志清
- 作品数:31 被引量:74H指数:5
- 供职机构:军事医学科学院卫生学环境医学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学环境科学与工程文化科学更多>>
- 协同伴侣分子CHIP的E3连接酶活性及其生物学意义被引量:3
- 2008年
- CHIP(carboxy terminus of Hsc70 interacting protein)是一种新发现的具有泛素化连接酶活性的协同分子伴侣,它N端有TPR(the tetratricopeptide repeat)结构,可以和分子伴侣结合,C端有U-box结构,具有E3酶功能。CHIP可以介导一系列重要蛋白质的泛素化降解,从而维持细胞内蛋白质的质量。现就CHIP的结构和功能、CHIP的底物特征、CHIP的生物学作用以及CHIP在疾病发生中的可能作用做一综述。
- 张志清钱令嘉
- 关键词:CHIP分子伴侣泛素化
- 去泛素化酶UCH-L1在血管平滑肌细胞迁移中的作用
- 目的:研究一种去泛素化酶——泛素C末端水解酶L1(UCH-L1)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)迁移的生物学作用,为深刻认识动脉粥样硬化等血管疾病的病理生理学机理提供新的科学依据。方法:1.采用组织块贴壁法体外培养健康雄...
- 刘晓华段梦张志清冷雪王立群吴磊
- 文献传递
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂对大鼠应激性心肌损伤的保护作用被引量:4
- 2015年
- 目的:观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂在应激性心肌损伤发生过程中的作用。方法:健康雄性Wistar大鼠随机分为3组(n=6),用束缚应激方法建立慢性应激性心肌损伤模型,采用组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)干预,观察TSA对应激性心肌损伤的保护作用。Western blot检测实验各组大鼠心肌的组蛋白乙酰化水平,采用分光光度法动态监测大鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶同工酶-MB(CK-MB)活性以及心肌组织Caspase 3活性,Nagar Olsen染色观察心肌的早期损伤。结果:束缚应激可以显著降低大鼠心肌的组蛋白乙酰化水平(P<0.05),而TSA干预可以抑制应激所致的心肌组蛋白乙酰化水平降低(P<0.05);束缚应激可以引起大鼠血清LDH和CK-MB活性、心肌组织Caspase 3活性显著升高(P<0.05),发生心肌早期损伤,而TSA干预可显著降低束缚应激引起的LDH(P<0.05)、CK-MB活性(P<0.05)、Caspase 3活性升高(P<0.05)。结论:组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA对应激性心肌损伤具有一定的保护作用。
- 武磊刘晓华王天辉段瑞峰周学思刘洪涛张志清
- 关键词:组蛋白去乙酰化酶抑制剂束缚应激心肌损伤
- 离体大鼠主动脉内皮细胞氧化应激损伤模型的建立及评价被引量:5
- 2016年
- 目的:建立离体大鼠主动脉内皮细胞氧化应激损伤模型,为细胞损伤及细胞凋亡的调控研究提供基础。方法:大鼠断头处死在无菌条件下开胸取主动脉,经组织块培养法后传代培养得到充足主动脉内皮细胞,接种于96孔板或爬片培养,每组设6个复孔,用于之后的各项试验检测。以不加H2O2的组作为对照组,以不同浓度的H2O2(100、200、300、400、500μmol/L)作用于内皮细胞相同时间12 h,来筛选最佳作用浓度;依据结果以相同浓度的H2O2(100和200μmol/L)分别作用不同时间(3、6、9、12及24 h),来筛选最佳作用时间。通过免疫荧光法鉴定、细胞存活率检测、生化指标(LDH-L、NO、MDA、SOD)检测及内皮细胞凋亡指数等变化,评价及验证模型的建立。结果:对细胞内Ⅷ型胶原抗原进行免疫荧光染色后鉴定血管内皮细胞培养成功;在12 h的相同作用时间下,随着H2O2浓度的加大,细胞存活率呈显著下降(77.63%±5.20%~40.90%±2.10%);相同浓度(100μmol/L组和200μmol/L组)随着作用时间的增加,细胞存活率呈显著递减(100μmol/L组为86.83%±12.11%~44.26%±5.70%,200μmol/L组为78.28%±11.98%~34.45%±5.87%);以H2O2浓度为100μmol/L作用3、6、9、12及24 h,培养液中生化指标在9 h后LDH-L与MDA呈显著递增,NO与SOD呈显著递减;在H2O2浓度为100μmol/L与作用时间12 h的条件下,流式检测结果显示内皮细胞凋亡率为16.92%±2.37%,显著高于对照组2.68%±0.47%(P<0.01);TUNEL检测内皮细胞凋亡指数为17.65%±2.36%,显著高于对照组的3.23%±0.57%(P<0.01)。结论:该方法成功建立了体外血管内皮细胞氧化应激损伤模型,探索了轻重适度的诱导细胞损伤和细胞凋亡的造模方法,可以成为开展多种血管内皮细胞损伤及凋亡调控机制研究的基础。
- 武磊周学思杲修杰杨苗苗张志清李景刚王天辉
- 关键词:内皮细胞氧化应激凋亡
- 现有室内微环境评价研究存在问题分析
- 追求良好的生存和生活环境、保护人体健康是人类社会发展的重要目标。20世纪以来,随着空调技术、建材和装修等行业发展以及现代人类生活方式的转变,现代社会的室内微环境领域出现许多始料未及的新问题,微环境与人体健康的矛盾日益突出...
- 张灿刘晓华冷雪陈明张志清杲修杰钱令嘉
- 关键词:室内微环境环境工程环境质量评价室内装修空调技术
- 文献传递
- 利用免疫共沉淀验证抗增殖蛋白与HSP70的相互作用
- 2010年
- 目的利用免疫共沉淀技术验证抗增殖蛋白(PHB)与HSP70间的相互作用,为研究应激时HSP70促进PHB进入线粒体的机制提供科学依据。方法采用Western blot方法检测HEK293细胞中PHB与HSP70的表达。构建抗增殖蛋白真核表达载体pEGFP-N1-PHB,经酶切鉴定正确后,将其转染HEK293细胞,采用荧光倒置显微镜观察转染效率。收集转染的HEK293细胞,利用免疫共沉淀技术验证PHB与HSP70之间的相互作用。结果在HEK293细胞中,HSP70具有较高的表达量,而PHB的表达量非常低。构建了抗增殖蛋白真核表达载体pEGFP-N1-PHB,转染HEK293细胞的效率达到90%以上。在抗体沉淀的PHB相互作用蛋白复合物中,可以检测到HSP70的存在。结论构建了抗增殖蛋白融合蛋白真核表达重组载体,在HEK293细胞中高表达抗增殖蛋白后,利用免疫共沉淀技术证实PHB与HSP70之间存在相互作用。
- 刘晓华张志清战锐王新兴王立群冷雪杲修杰钱令嘉
- 关键词:HSP70免疫共沉淀相互作用
- 泛素C端水解酶L1的RNA干扰载体的构建及效果评价
- 2013年
- 目的:获得抑制效果好的泛素C端水解酶L1(UCH-L1)基因小干扰RNA(siRNA)干扰载体。方法:根据Gen Bank中大鼠UCH-L1基因序列设计并合成4对siRNA寡核苷酸序列,将4对寡核苷酸序列退火成双链后分别插入siRNA表达载体pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR中构建4个siRNA表达质粒,测序鉴定后将4个siRNA表达质粒分别转染HEK293细胞,利用Western印迹和qPCR方法检测干扰效果;将干扰效果最好的质粒包装成腺病毒,感染大鼠血管平滑肌细胞(VSMC),并采用TNFα干预诱导UCH-L1表达升高,Western印迹验证干扰效果。结果:测序分析证实4对siRNA寡核苷酸序列分别插入siRNA表达载体pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR;qPCR检测与Western印迹均表明第3号siRNA表达载体对UCH-L1表达的抑制程度最高,将其包装成腺病毒并转染VSMC能显著抑制TNFα诱导的UCH-L1表达升高。结论:构建并筛选出干扰效果好的UCH-L1 siRNA干扰载体。
- 赵博刘晓华段梦张志清冷雪王立群武磊段瑞峰王广增张艳淑
- 关键词:RNA干扰HEK293细胞
- 醋甲唑胺治疗慢性高原病的疗效
- 目的:研究醋甲唑胺治疗慢性高原病的疗效.方法:30只雄性Wistar大鼠随机分为5组:常氧对照组、低氧对照组、3个醋甲唑胺药物治疗组(分别为5、10和30mg/kg).低氧对照组和药物治疗组动物进行8周间断性减压低氧(8...
- 段瑞峰张志清邓炳楠刘晓华田通关陈星鑫龙超良李曦刘卫肖忠海聂鸿靖李培兵陈照立汪海
- 关键词:醋甲唑胺红细胞增多症红细胞压积血液粘度
- 驻寒区边防某部军事作业能力调查与分析被引量:9
- 2014年
- 目的调查寒区边防部队军事作业影响因素及对军人军事作业能力的影响,为寒区军事作业能力维护提供依据。方法依据相关标准,采用随机整群抽样法,抽取驻守寒区部队新兵(入伍时间<1个月)和驻守寒区部队老兵(入伍时间>1年),进行寒区军事作业影响因素、体力、睡眠、心理健康及认知能力评估。结果寒冷环境是影响寒区部队军事作业能力的主要影响因素;依据体能标准,该寒区边防部队体能状况处于较差水平;130名新兵的SCL-90总分、阳性均分、阳性项目数、各因子分均显著优于46名老兵和中国军人常模;46名老兵的SCL-90总分、阳性均分、阳性项目数、各因子分与中国军人常模相比,均无显著性差异,老兵的睡眠状况普遍较差,新兵的瞬时记忆能力显著高于老兵(P<0.05);分别来自于东北地区、中部地区和南方地区的新兵SCL-90总分、阳性均分、阳性项目数、各因子分及认知能力均无显著性差异,来自于中部地区和南方地区的新兵睡眠状况较差(P<0.05);从事不同军事任务的老兵中,通信连SCL-90总分、躯体化、强迫、抑郁和焦虑因子分显著高于中国军人常模(P<0.05),通信连士兵的睡眠状况显著差于其他部队的睡眠状况(P<0.05)。结论寒冷环境是影响寒区军事作业能力的主要影响因素。寒区边防部队军事体力作业能力显著低于部队军事标准,应强化寒区部队的军事训练水平。我军心理健康教育开展较好,寒区部队心理健康水平较好。初进寒区和长期驻训可能会对官兵的睡眠产生重要影响,有待于进一步注重睡眠防护措施的开发及相关的基础研究。应强化冬季户外作业较多的寒区部队防护装备研究。
- 张志清崔博马强刘嘉瀛李曦王军李军杨丹凤
- 关键词:军队人员心理健康状况
- 急进高原作业对官兵心理健康的影响被引量:5
- 2014年
- 目的调查急进高原对部队官兵心理健康的影响,以便针对性地开展心理健康教育和临床心理辅导。方法采用随机整群抽样法抽取驻高原部队官兵190名(高原组)和平原急进高原部队官兵103名(平原组),应用SCL-90进行心理测试。结果全体参试官兵躯体化因子分显著高于全国常模,但与军人常模相比差异无显著性;其余强迫、人际敏感、抑郁、焦虑和偏执等因子分都显著低于军人常模和全国常模。平原组官兵在强迫、人际敏感、抑郁、焦虑、敌对、恐怖、偏执等各因子分及阳性均分、阳性项目数和SCL-90总分上均低于高原组;在躯体化、精神病性和代表睡眠等状况的其他因子分上,均略低于高原组,但差异无统计学意义。结论此次急进高原官兵整体心理状态较为稳定,躯体化和敌对等方面的心理问题比较突出,可能和任务环境改变有关。
- 安改红陈学伟张娜徐传香佘晓俊马强袭著革汪海崔博张志清肖忠海李培兵王晓明李超郭长江高志贤
- 关键词:急进心理健康SCL-90