张小艺 作品数:14 被引量:40 H指数:4 供职机构: 贵州大学动物科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 贵州省科技支撑计划 北京市重点实验室开放基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 更多>>
金英黄归液的抑菌作用分析 目的以金黄色葡萄球菌为供试菌,研究'金英黄归液'注射剂的体内、体外抑菌作用,观察其对细菌的形态结构的影响,并探讨其对细菌体内琥珀酸脱氢酶(SDH)比活性的影响,为中药复方'金英黄归液'深入研究提供理论数据。材料方法将金银... 杨航 张小艺 王鲁关键词:金黄色葡萄球菌 MBC 超微结构 SDH siRNA干扰TGF-β1基因对LPS诱导小鼠乳腺上皮细胞IL-6和TNF-α分泌的影响 被引量:2 2017年 为研究转化生长因子β1(TGF-β1)对脂多糖(LPS)刺激小鼠乳腺上皮细胞(MECs)分泌炎症因子的影响,本实验利用si RNA转染技术干扰MECs TGF-β1基因,采用荧光定量RT-PCR方法筛选最佳转染条件,并检测其干扰后LPS介导其下游信号smad3 m RNA的表达量,采用ELISA法检测其下游信号smad3蛋白含量和LPS介导细胞分泌前炎症细胞因子TNF-α和IL-6的含量。结果显示,选用50 n M浓度的TGF-β1-mus-1212片段转染组能够极显著抑制TGF-β1的m RNA表达(p<0.01);TGF-β1被干扰后,LPS刺激其下游smad3 m RNA的表达量与对照组相比呈显著性降低(p<0.05),smad3蛋白含量与对照组相比均极显著性降低(p<0.01);细胞分泌TNF-α的量与对照组相比显著降低(p<0.05),分泌IL-6的量各组无变化(p>0.05)。本实验结果表明干扰TGF-β1能降低LPS诱导乳腺上皮细胞TNF-α的分泌量,因此TGF-β1可作为靶基因深入研究乳腺上皮细胞的免疫功能,本研究为乳腺炎症、肿瘤等乳腺相关疾病的治疗提供新的思路及实验数据,为新药的开发和应用提供理论依据。 冯将 张小艺 李昀桦 王玉坤 魏玉好 易琼 王鲁关键词:TGF-Β1 乳腺上皮细胞 IL-6 TNF-Α 两种不同消化法对小鼠乳腺上皮细胞培养的影响 被引量:2 2014年 为了探究体外培养小鼠乳腺上皮细胞的消化方法,体外分离小鼠乳腺组织,分别采用胶原酶和胰蛋白酶混合消化法或两步消化法消化小鼠乳腺组织,并进行细胞培养,利用角蛋白18激光共聚焦显微技术鉴定目的细胞。结果显示,混合酶消化法能在短期内分离到大量的乳腺上皮细胞,且细胞纯度达到98%,细胞可连续培养至第3代;两步酶消化法虽能分离到一定量的乳腺上皮细胞,但细胞继代培养困难,且细胞不易纯化。以上结果表明,混合酶消化法培养小鼠乳腺上皮细胞优于两步酶消化法。 杨航 易琼 李圆方 张小艺 王鲁关键词:胶原酶 胰蛋白酶 金英黄归汤对LPS介导乳腺上皮细胞TLR4信号通路中相关因子的影响 被引量:7 2016年 为了评价金英黄归汤抗LPS致炎的作用机制,作者采用ELISA法检测金英黄归汤对细胞分泌细胞因子TNF-α、IL-8的影响,采用qPCR法研究药物对TLR4通路中IL-1受体相关激酶-1(IRAK-1)、肿瘤坏死因子受体6(TRAF-6)、转化生长因子激活激酶(TAK-1)、NF-κB诱导激酶(NIK)、抑制性NF-κB(IκB)mRNA的转录影响。结果显示,金英黄归汤低剂量组(39.1μg·mL-1)、中剂量组(391μg·mL-1)、高剂量组(3 910μg·mL-1)能显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)减少LPS介导的TNF-α和IL-8分泌;能显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)减少LPS介导的IRAK-1、TRAF-6、TAK-1、IκB、NIK mRNA的转录。结果提示,金英黄归汤通过抑制小鼠MECs的TLR4/NF-κB信号通路中IRAK-1/TRAF-6/TAK-1/NIK途径的活化来控制炎性因子的释放而发挥抗炎作用,而不是通过IRAK-1/TRAF-6/TAK-1/IκB途径实现的,这可能是金英黄归汤的抗炎机制。 李欣 李中改 张小艺 周送桂 王玉坤 冯将 易琼 王鲁关键词:LPS 乳腺上皮细胞 MRNA转录 金英黄归汤粗提取物中有效成分的测定 为了确定自制的金英黄归汤的质量标准,本实验对金英黄归汤进行了粗提取,并对粗提取物中金英黄归汤有效成分的进行初步鉴定.以期为后期对金英黄归汤的整个提取工艺中有效成分的含量变化的测定的实验提供一定的参考依据与打下基础.本实验... 周送桂 肖序 李欣 张小艺 王鲁 何珺关键词:高效液相色谱法 文献传递 鱼胆草提取物及其活性成分獐牙菜苦苷的药理学初探 被引量:4 2015年 为了初步考察鱼胆草提取物及其活性成分獐牙菜苦苷(含量为61%)的体外抑菌效果和安全性,以及獐牙菜苦苷对α-葡萄糖苷酶活性的影响,试验采用小鼠急性毒性试验的方法测定其安全浓度、试管二倍稀释法测定其体外最小抑菌浓度和紫外分光光度法检测獐牙菜苦苷对α-葡萄糖苷酶活性的抑制率。结果表明:鱼胆草提取物及獐牙菜苦苷以5 g/kg灌胃时,小鼠均无死亡发生;醇沉前后的鱼胆草提取物和獐牙菜苦苷对大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC)均为125 mg/mL,对金黄色葡萄球菌的MIC均为31.25 mg/mL;当獐牙菜苦苷浓度为1 mg/mL时对α-葡萄糖苷酶活性的抑制率为30.19%,浓度为100 mg/mL时抑制率为84.92%。说明可尝试用鱼胆草提取物及獐牙菜苦苷防治由金黄色葡萄球菌等细菌感染引起的疾病,獐牙菜苦苷无毒副作用,有望被研发成一种新的降糖药物。 张小艺 何润霞 易琼 何珺 杨航 王鲁关键词:獐牙菜苦苷 Α-葡萄糖苷酶活性 急性毒性 抑制率 金银花提取物对金黄色葡萄球菌的抗菌作用研究 被引量:12 2013年 目的:研究金银花对金黄色葡萄球菌的抗菌作用。方法:将金银花用50%乙醇提取,石油醚萃取后取水相,采用试管二倍稀释法测定其对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),建立小鼠尾静脉注射感染金黄色葡萄球菌模型检测其对小鼠体内的保护率,并采用比色法研究其对细菌体内琥珀酸脱氢酶(SDH)比活性的影响。结果:金银花对金黄色葡萄球菌的MIC和MBC分别为15.6 mg/mL和31.2 mg/mL,能降低小鼠人工感染金黄色葡萄球菌死亡率,但差异不显著(P>0.05);金银花能极显著降低细菌体内SDH比活性(P<0.01)。结论:金银花对金黄色葡萄球菌具有抑菌作用,其抑菌作用是通过降低SDH比活性来实现的。 贺常亮 张小艺 杨航 王鲁关键词:金银花提取物 金黄色葡萄球菌 抗菌 SDH 小鼠 TGF-β1、PDGF-B在TLR4信号通路中作用的研究 前期研究表明TGF-β1、PDGF-B基因在LPS介导的小鼠乳腺上皮细胞(MECs)差异显著的上调,且小鼠MECs在LPS刺激下通过TLR4信号通路引起细胞分泌前炎症细胞因子而调节免疫和炎症,为了研究TGF-β1、PDG... 张小艺关键词:乳腺上皮细胞 转化生长因子-Β 血小板源性生长因子-B 金英黄归液的抑菌作用分析 被引量:6 2013年 为了初探自制金英黄归液对金黄色葡萄球菌(S.aureus)的抗菌作用,作者常规制备金英黄归注射液,采用试管二倍稀释法测定其对S.aureus的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),通过S.aureus人工感染小鼠试验研究其在体内的抑菌作用,在MBC下应用电镜观察其对细菌形态结构的影响,采用比色法研究其对细菌的琥珀酸脱氢酶(SDH)比活性的影响。结果表明金英黄归液对S.aureus的MIC和MBC分别为31.2和62.5mg·mL-1,能显著抑制S.aureus引起的小鼠死亡(P<0.05),在MBC作用下的S.aureus细胞壁上有大量絮状物,细胞呈塌陷状,甚至细胞壁破裂,能极显著降低细菌体内SDH比活性(P<0.01)。结果提示金英黄归液对S.aureus具有抑菌作用,抑菌机制是破坏细菌的细胞壁,抑制菌体内的酶系统。 杨航 张小艺 王鲁关键词:金黄色葡萄球菌 MBC 超微结构 SDH HPLC法监测金英黄归汤制备过程中绿原酸和连翘酯苷A含量 被引量:8 2015年 目的采用高效液相色谱(HPLC)法建立绿原酸和连翘酯苷A的含量测定方法,并对制备过程中绿原酸和连翘酯苷A含量进行监测,为金英黄归汤制备工艺改进提供质控标准。方法采用Hypersil C18色谱柱(150mm伊4.6 mm,5μm);绿原酸和连翘酯苷A的流动相分别为乙腈-0.2%磷酸(11颐89)与乙腈-0.4%冰醋酸(17颐83);检测波长分别为327 nm和330 nm;柱温分别为35益和30益;流速分别为0.8 m·min-1和1.0 m L·min-1。结果绿原酸和连翘酯苷A的线性范围分别为:13.56耀217.00μg·m L-1(r2=0.9997),0.0536耀0.2680 mg·m L-1(r2=0.9996);稳定性试验RSD分别为0.14%和0.47%;中间精密度试验RSD分别为0.63%和0.56%;重复性试验RSD分别为0.68%和1.00%;平均回收率分别为绿原酸99.23%,RSD为0.61%;连翘酯苷A100.24%,RSD为1.15%。结论建立的绿原酸和连翘酯苷A含量检测方法,可为金英黄归汤制备过程提供质控数据。 周送桂 何珺 肖序 李欣 张小艺 王鲁关键词:绿原酸 连翘酯苷A 高效液相色谱法