崔芳
- 作品数:11 被引量:21H指数:2
- 供职机构:军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金:国家杰出青年科学基金国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 构建动物模型的方法、由该方法获得的非人转基因动物的体细胞及其用途
- 本发明提供了一种肝细胞癌小鼠模型,以及构建该小鼠模型的方法,它包括以下步骤:1.将外源目的基因插入携带靶位点同源序列的适宜载体中,构建出重组的打靶载体;2.将步骤1的打靶载体转化所研究动物的ES细胞,从中获得外源基因定位...
- 杨晓王友亮崔芳吕娅歆黄翠芬
- 文献传递
- 肝脏组织特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的建立
- 随着人类基因组计划的完成并进入后基因组时代,对基因功能特别是基因在体内的功能和作用机理的研究显得越来越重要。基因剔除无疑是一种研究基因体内功能的有效手段,但有时剔除与胚胎发育相关的基因常导致小鼠死于胚胎早期而无法获得成体...
- 王友亮程萱程竟崔芳吕娅歆杨晓
- 关键词:CRE重组酶转基因小鼠白蛋白启动子
- 文献传递
- 乙型肝炎病毒X基因定位敲入转基因小鼠发生肝细胞癌
- 肝细胞癌是一种严重威胁人类健康的疾病。已经有许多文献报道肝细胞癌与多种因素关系密切,而乙肝病毒感染则是肝细胞癌的重要诱因之一。乙肝病毒是一种不完全闭合的双链DNA病毒,有四个开放读码框,S、C、P以及X,分别编码表面抗原...
- 崔芳王友亮吕娅歆邓初夏黄翠芬杨晓
- 关键词:HBXHBV肝细胞癌转基因
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- 肝细胞特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的建立被引量:17
- 2004年
- 目的 构建在小鼠肝细胞中特异表达Cre重组酶的转基因小鼠。 方法 利用聚合酶链反应(PCR)获得小鼠肝细胞特异性启动子——白蛋白启动子,指导Cre重组酶在肝细胞中特异表达。通过受精卵显微注射的方法,将转基因载体导入小鼠受精卵中,获得转基因小鼠。利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测转基因小鼠中Cre重组酶转录的组织特异性,并将转基因小鼠与Smad4条件基因打靶小鼠进行杂交,利用PCR和Southern Blot进一步检测Cre重组酶在小鼠体内表达的组织特异性及其介导lox P位点之间发生重组的活性。 结果 获得了白蛋白启动子,构建了转基因载体pAlb-Cre。将转基因载体进行显微注射,共注射了837枚小鼠受精卵。PCR检测显示53只子代小鼠中有7只整合了Cre重组酶基因,Southern杂交结果证实共获得6只基因组上整合Cre重组酶基因的首建者小鼠。RT-PCR结果表明其中3只阳性小鼠的子代鼠在肝脏和睾丸中正确转录了外源基因。将在肝脏和睾丸中正确转录了外源基因的两只阳性鼠与Smad4条件基因打靶的小鼠杂交,通过PCR检测发现Cre转基因与Smad4条件基因打靶双阳性的子代鼠在肝脏中特异表达Cre重组酶,并能介导基因组中loxP序列间的基因重组,此结果通过Southern杂交得到了进一步证实。 结论 成功构建了在小鼠肝细胞中特异表达Cre重组酶?
- 王友亮程萱崔芳程竞吕娅歆杨晓
- 关键词:肝细胞CRE重组酶转基因小鼠聚合酶链反应
- 利用条件基因剔除技术研究Smad4基因在组织器官发育以及相关疾病发生过程中的功能
- 转化生长因子-β(TGF-β)超家族通过调节细胞的增殖、分化、移行及凋亡而在脊椎动物发育过程中起重要的作用。SMADs是细胞质内TGF-β信号转导分子,它们可以将TGF-(信号直接从细胞膜转导入细胞核内。SMAD4是TG...
- 杨晓程萱毛春明王友亮谭晓红张继帅崔芳王剑侯宁吕娅歆周江郝振明林福玉黄培堂黄翠芬
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- Ⅱ型肺泡细胞特异表达SARS冠状病毒核衣壳蛋白转基因小鼠的建立被引量:2
- 2006年
- 目的:建立Ⅱ型肺泡细胞特异表达SARS冠状病毒(SARS-CoV)核衣壳蛋白(N蛋白)的转基因小鼠。方法:用分子克隆的方法构建包括肺表面活性蛋白A(SP-A)启动子、SARS-CoVN蛋白基因、β-半乳糖苷酶(LacZ)报告基因和人生长激素(hGH)polyA的转基因载体pSP-A-N。以显微注射的方法将8.3kb的转基因片段引入小鼠受精卵。通过PCR、Southern印迹和LacZ染色检测子代小鼠中转基因的整合及表达。结果:共注射952枚受精卵,移植至42只假孕母小鼠的输卵管中发育,获得子代小鼠128只,经PCR、Southern印迹鉴定,其中11只小鼠基因组上整合有SARS-CoVN蛋白基因,整合率为8.6%。鉴定结果显示,11只转基因首建者小鼠中有1只表达外源基因并能正常传代。LacZ染色结果表明N蛋白基因在转基因小鼠Ⅱ型肺上皮细胞中特异表达。结论:成功构建了Ⅱ型肺泡细胞特异表达SARS-CoVN蛋白的转基因小鼠,为深入研究该基因的病理生理学效应奠定了基础。
- 潘晓晨王友亮程萱侯宁崔芳时令刘伯华祝庆余秦鄂德杨晓
- 关键词:SARS冠状病毒核衣壳蛋白转基因小鼠肺表面活性蛋白A
- 遗传修饰小鼠模型在功能蛋白质组学研究中的应用被引量:3
- 2004年
- 功能蛋白质组学是蛋白质组学研究的重要分支 ,其研究与发展对获得蛋白质的功能信息具有重要作用。各种遗传修饰小鼠模型是研究功能基因组学的有力工具 ,在功能蛋白质组学的研究中 ,这项技术的应用也日益广泛。本文综述了利用肝脏、神经系统、心脏疾病的小鼠模型进行蛋白质组学研究取得的有意义的结果。
- 崔芳王友亮杨晓
- 关键词:蛋白质组功能蛋白质组学遗传修饰
- 精细突变小鼠模型的研究进展
- 2001年
- 郝振明崔芳杨晓黄翠芬
- 关键词:基因打靶疾病模型
- 一种乙型肝炎病毒基因定位整合导致肝细胞癌的小鼠模型
- 本发明提供了一种肝细胞癌小鼠模型,以及构建该小鼠模型的方法,它包括以下步骤:1.将外源目的基因插入携带靶位点同源序列的适宜载体中,构建出重组的打靶载体;2.将步骤1的打靶载体转化所研究动物的ES细胞,从中获得外源基因定位...
- 杨晓王友亮崔芳吕娅歆黄翠芬
- 文献传递
- 一种用于肝细胞癌早期诊断的分子
- 本发明提供了一种用于肝细胞癌早期诊断的分子——雌激素受体β,它特异表达于HBsAg转基因小鼠的肝脏肿瘤中。
- 杨晓王友亮崔芳黄翠芬
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