尹岚
- 作品数：10 被引量：46H指数：5
- 供职机构：上海第二医科大学更多>>
- 发文基金：上海市科学技术发展基金国家重点基础研究发展计划上海市教委科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 神经干细胞向少突胶质前体细胞的定向分化诱导(英文)被引量：11
- 2005年
- 本研究采用神经胶质瘤细胞株(B104 neuroblatoma cells,B104 cells)培养上清(B104CM)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF),将冷冻复苏的大鼠胚胎脊髓神经干细胞(neural stem cells,NSCs)定向诱导为少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precusor cells,OPCs)。形态学和免疫组化的结果显示,诱导后95%以上的细胞具有双极或多极突起的典型OPCs 形态,并表达A2B5和血小板源生长因子受体-α(platelet derived growth factor receptor-α,PDGFR-α)等OPCs标志,所有PDGFR-α阳性的OPCs均不表达β-Tublin Ⅲ,其中仅少量细胞表达胶质原纤维酸性蛋白(glia fibrillary acidic protein,GFAP)。在B104CM 和bFGF共存的培养条件下,悬浮培养的OPCs可大量增殖形成少突胶质细胞球,该细胞球可通过传代继续扩增,且扩增的OPCs仍能维持其特有的形态和自我增殖的特性。撤去bFGF和B104CM后,OPCs能进一步分化为成熟的少突胶质细胞(oligodendrocytes,OLs)或Ⅱ型星形胶质细胞。实验表明,诱导NSCs产生的OPCs在形态、增殖以及分化格局等方面均与已报道的存在于胚胎脑区的O-2A前体细胞相类似。该培养系统可为实验性细胞移植的研究提供丰富的细胞来源。
- 富赛里胡建国李莹尹岚金建强徐晓明陆佩华
- 关键词：神经干细胞少突胶质前体细胞碱性成纤维细胞生长因子
- 胚胎大鼠脑和脊髓神经干细胞的分离和培养被引量：16
- 2003年
- 研究采用显微解剖、无血清细胞培养和免疫荧光细胞化学染色等实验技术 ,成功地建立了胚胎大鼠脑和脊髓神经干细胞 (NSCs)的分离和培养方法。结果显示 ,( 1)在含成纤维细胞生长因子 2 (FGF 2 )和表皮生长因子(EGF)的无血清培养液中 ,两种来源的NSCs经体外培养 8- 10代后 ,其细胞数呈指数级增加 ,其中脑来源的NSCs数由原代培养时的 1× 10 6 增加至 1× 10 12 ,脊髓来源的NSCs数从 1× 10 6 增加至 1× 10 11。增殖的细胞表达神经上皮干细胞蛋白 (nestin) ;( 2 )在含 1%胎牛血清 (FBS)的培养条件下 ,它们都能被诱导分化为神经元、少突胶质细胞和星型胶质细胞。但其分化比例可随细胞传代次数的增加而改变 ,其中 ,大脑来源的NSCs分化为神经元的比例从第二代 (P2 )的 11 95± 2 5 %下降至第五代 (P5)的 1 97± 1 16% (P <0 0 1) ,而少突胶质细胞的分化比例则基本保持不变 ,这一分化格局同样可在脊髓来源的NSCs中发现。结果表明 ,我们所分离和培养的细胞在体外经多次传代后仍具有很强的增殖能力和多向分化潜能 ,它们都表达nestin 。
- 富赛里马政文尹岚陆佩华徐晓明
- 关键词：神经干细胞胚胎成纤维细胞生长因子-2表皮细胞生长因子
- 神经干细胞移植治疗创伤性脊髓损伤的免疫排异研究
- ＜正＞本实验旨在从免疫学的角度,阐明用同种异体神经干细胞治疗脊髓损伤的可行性和可能存在的问题,以期为将来用神经干细胞移植治疗脊髓损伤疾病的临床应用提供实验依据。实验中采用流式细胞术、RT-PCR和免疫组化等方法,检测体外...
- 尹岚富赛里李莹王小飞邹健杭勤陆佩华
- 关键词：神经干细胞MHC排斥反应
- 文献传递
- 大鼠胚胎脑和脊髓神经干细胞分化特性比较被引量：5
- 2005年
- 体外分离大鼠胚胎脑和脊髓神经干细胞,经培养传代后,撤除生长因子(bFGF和EGF)并给予 1%胎牛血清促其自然分化,然后比较两者的分化规律,以及传代次数对分化的影响。结果发现:在完全相同的培养条件下,来源于脑和脊髓的神经干细胞均可分化为神经元、少突胶质细胞和星形胶质细胞,但两者分化为神经元的能力均随细胞体外传代次数的增加而显著下降 (P<0. 05);此外,脑来源的神经干细胞分化为神经元的能力远高于脊髓来源的神经干细胞 (P<0. 01)。提示,来自中枢神经系统不同部位的神经干细胞在分化潜力上存在差别,体外传代会影响神经干细胞的分化能力。
- 尹岚富赛里马政文徐晓明陆佩华
- 关键词：分化胎脑大鼠胚胎脊髓神经体外分离少突胶质细胞
- 大鼠胚胎神经干细胞的冷冻复苏被引量：12
- 2003年
- 目的 :建立大鼠胚胎神经干细胞冷冻复苏方法 ,探讨冻存后神经干细胞的活力及生物学特性。 方法 :采用 10 %BSA + 7.5 %DMSO作冷冻保护剂 ,于液氮中冻存 ;采用细胞培养和间接免疫荧光染色方法对冻存后细胞的活力、形态及分化能力作鉴定。结果 :不同的冻存时间、细胞代数、组织来源以及神经营养因子对冻存后细胞存活率没有明显差异 (P >0 .0 5 )。冷冻保存复苏后培养的大鼠胚胎神经干细胞能够存活 ,能在体外多次传代 ,并能分化成神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。结论 :大鼠神经干细胞的冻存复苏并不影响其原有的生物学特性包括其正常的形态、增殖能力和多向分化能力。
- 马政文富赛里尹岚徐晓明陆佩华
- 关键词：胚胎神经干细胞冷冻
- 中枢神经系统的抗原递呈细胞及其对免疫应答的调节被引量：5
- 2002年
- 尹岚
- 关键词：中枢神经系统抗原递呈免疫调节
- cDNA微阵列技术比较胚胎大鼠脑和脊髓神经干细胞的基因差异表达被引量：1
- 2005年
- 目的 从分子水平探讨脑和脊髓来源的神经干细胞(NSCs)的生物学特性,并鉴定这两种来源的NSCs 的分子表达差异。 方法 应用cDNA微阵列技术对脑和脊髓来源的NSCs的基因表达情况进行检测和比较,在成 功分离、培养和鉴定脑和脊髓两种来源的NSCs的基础上,抽提细胞总RNA并纯化、定量,以32P逆转录标记合成 cDNA探针。AltasTMcDNAExpressionArray(ClontechCo)与探针杂交、洗膜后在磷屏上曝光并扫描成像,以Arrayvision 5.1软件分析杂交结果。 结果 cDNA阵列膜上覆盖的1176个基因中,绝大部分基因表达无明显差异,但也有14 个基因在两种来源的NSCs中的表达有显著差异,其中8个在脑来源的NSCs中表达较高,6个在脊髓来源的NSCs 中表达较显著。在两种来源的NSCs都明显表达的基因中,许多分子如P 选择素(P selectin)、钙黏素(cadherin)、乙酰 胆碱受体α、cyclins、某些转录因子和原癌基因等可能在NSCs的自我更新(增殖)、神经球形成和保持不分化状态中 起重要作用。 结论 两种来源的NSCs的生物学特性基本相同,但也存在一定的差异。
- 胡建国富赛里李莹尹岚金建强沈天伟陆佩华徐晓明
- 关键词：神经干细胞脊髓CDNA微阵列
