目的:研究白花蛇舌草总黄酮(FHD)对人肝癌细胞SMMC-7721,BEL-7402的体外抑制作用,对小鼠移植性肝癌H22的体内抑制作用和对其增殖周期、凋亡、免疫功能的影响.方法:MTT法评价FHD在0,5,10,50,100 mg/L浓度下,于24,48,72h对人肝癌细胞SMMC-7721,BEL-7402的抑制率变化.昆明♂小鼠60只,随机取10只为正常对照组,余接种H22瘤株,随机分为模型对照组、5-FU阳性对照组(30 mg/kg)和高中低剂量FHD给药组(剂量分别为25,50,100 mg/kg),腹腔给药10d后,比较各组瘤质量抑制率、H22细胞周期分布及凋亡率,比较各组荷瘤小鼠的胸腺指数(×10^(-3))、脾脏指数(×10^(-3))、脾淋巴细胞转化率和血清TNF-α、IFN-γ水平(ng/L).结果:FHD对SMMC-7721、BEL-7402细胞具有体外抑制作用,且呈剂量依赖性和时间依赖性(P<0.05).与模型对照组相比,25,50,100 mg/kg FHD显著抑制小鼠移植性H22肿瘤(P<0.01),使G_0/G_1期H22细胞比例逐渐增加(30.36%±5.72%,32.83%±6.67%,39.67%±8.01% vs 25.62%±4.36%,P<0.05或P<0.01),G_2/M期细胞比例逐渐下降(7.65%±2.32%,6.33%±3.43%,2.22%±0.98% vs 11.13%±2.77%,P<0.05或P<0.01),促进肿瘤细胞凋亡(2.41%±0.42%,2.22%±0.33%,2.07%±0.40% vs 1.47%±0.66%,P<0.01),降低荷瘤小鼠脾脏指数(51.43±8.31,47.43±7.89,48.64±9.35 vs 67.63±7.44,P<0.01),升高胸腺指数(33.36±4.09,40.35±5.79,34.57±6.56 vs 22.43±4.52,P<0.01)和脾淋巴细胞转化率(10.83%±3.75%,11.33%±5.04%,13.58%±4.62% vs 9.35%±2.02%,P<0.05),并提高血清TNF-α(257.56±42.29,386.36±25.97,364.52±23.62 vs 101.43±24.72,P<0.01)、IFN-γ水平(355.83±35.74,392.31±25.17,357.38±34.82 vs 172.35±29.02,P<0.01).结论:FHD在体外、体内均具有抑制肝癌细胞的作用,此作用与阻滞肿瘤细胞增殖周期、促进肿瘤细胞凋亡、调节机体免疫环境有关.
目的:应用基因芯片技术研究白花蛇舌草豆甾醇(Stigmasterol from Hedyotis diffusa willd.,SHD)抑制人肝癌细胞SMMC-7721生长的靶基因调控。方法:MTT法评价SHD在0、5、10、50、100mg/L浓度下,于24、48、72h对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制率变化。分别提取人正常肝细胞、人肝癌SMMC-7721细胞和SHD作用后的SMMC-7721细胞的总RNA,逆转录合成单链、双链cDNA后,体外转录合成生物素标记的cRNA与人HO4基因表达谱芯片杂交,扫描杂交芯片图像,利用软件获得SHD抑制人肝癌的靶基因,对其进行生物信息学分析。结果:SHD对SMMC-7721具有体外抑制作用,且呈剂量依赖性和时间依赖性;SHD使癌基因fos、myc、ras、pim-1、met、rel下调至正常水平,使抑癌基因NF-2和磷酸激酶MAP2K6的表达上调至正常水平。结论:SHD对人肝癌细胞SMMC-7721具有显著的体外抑制作用;SHD抑制SMMC-7721细胞的作用由多条靶基因协同,并通过胞内外信号转导途径协调完成。
