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rhBMP-2、bFGF双基因共转染兔骨髓间充质干细胞复合nHA/RHLC/PLA支架及其体内外成骨分化研究被引量：10: 2011年; [目的]探讨rhBMP-2、bFGF双基因共转染兔骨髓间充质干细胞(bone marrow stem cells,BMSCs)复合nHA/RHLC/PLA支架及其体内异位成骨研究。[方法]构建携带rhBMP-2及bFGF基因片段的双基因表达载体prh-BMP-2-IRES-bFGF并转染兔BMSCs,免疫细胞化学检测目的基因表达,进而与nHA/RHLC/PLA支架复合构建骨组织工程复合体。rhBMP-2及bFGF单独转染组、未干预BMSCs组设为对照。实时定量RT-PCR检测成骨相关基因(I型胶原、骨连蛋白、骨桥蛋白)表达,扫描电镜观察细胞/材料复合情况。体外培养7 d后埋于自体股部肌袋,4周后取材,放射学及组织学方法检测成骨情况。[结果]转染后BMSCs的rhBMP-2及bFGF蛋白表达均呈阳性。复合材料后,其成骨相关基因表达明显高于rhBMP-2及bFGF单独转染组、未干预BMSCs组(P<0.05,n=3),放射学及组织学检测也证实其异位成骨明显。[结论]采用rhBMP-2及bFGF双基因转染技术能够有效促进BMSCs成骨分化,与新型材料nHA/RHLC/PLA支架复合所构建的骨组织工程复合体,体现出良好的体内外成骨活力,进一步研究将探讨其针对大段骨缺损的修复效能。; 郝伟姜明周东生王新刘洪智周路纲孙煜杰; 关键词：RHBMP-2 BFGF 骨髓间充质干细胞成骨

慢性胃炎胃粘膜血流量变化与辨证分型的关系被引量：11: 1995年; 慢性胃炎胃粘膜血流量变化与辨证分型的关系济南军区总医院（２５００３１）张燕，权启镇，李士林，徐俊，姜明关键词慢性胃炎，胃粘膜；血流量；辩证分型在慢性胃炎的发病机制中，胃粘膜血液循环状态是重要因素之一，了解不同辨证类型胃炎患者胃粘膜血流量变化，对辩证施...; 张燕权启镇李士林徐俊姜明; 关键词：胃炎胃粘膜血流量辩证分型

基于脂肪干细胞I型胶原凝胶PLGA-β-TCP支架的新型仿生骨组织工程复合体的构建及生物学性能被引量：11: 2008年; 目的:尝试构建基于脂肪干细胞、I型胶原凝胶以及PLGA-β-TCP支架的新型仿生骨组织工程复合体,并对其生物学性能进行研究.方法:取3 mo龄日本大耳白兔皮下脂肪,获得脂肪干细胞,经体外成骨诱导分化鉴定后使用I型胶原凝胶将其悬浮并与三维多孔支架PLGA-β-TCP复合,从而构建成脂肪干细胞-I型胶原凝胶/PLGA-β-TCP骨组织工程复合体,体外成骨诱导培养2 wk,实验以脂肪干细胞/PLGA-β-TCP材料复合体作为对照.扫描电镜观察复合情况,并对脂肪干细胞的增殖以及成骨诱导分化情况进行检测.结果:I型胶原凝胶将rADSCs均匀悬浮于材料孔隙中,碱性磷酸酶活性以及细胞外基质矿化程度检测显示I型胶原凝胶能显著促进rAD-SCs的成骨分化.结论:脂肪干细胞-I型胶原凝胶/PLGA-β-TCP复合体的构建成功为骨组织工程复合体的设计提供了一条新的思路.; 郝伟胡蕴玉姜明吕荣王军赵廷宝; 关键词：脂肪干细胞骨组织工程

老年眩晕患者舌象与大脑局部血流量的关系: 1995年; 老年眩晕病为本虚标实。辨证多为肝肾亏虚,肝阳上亢或风痰上扰。现代医学认为,脑血液循环障碍为其重要病因。我们通过对90例老年眩晕患者舌象及大脑局部血流变化的观察,探讨了眩晕的病机与脑血液循环障碍的关系。临床资料与方法眩晕患者90例,男59例,女31例,年龄55—75岁,平均62.74岁。眩晕诊断标准参照《实用中医内科学》而定。90例中,高血压病66例,椎—基底动脉供血不足24例;另设健康查体者60例,男55例。; 张燕王久春姜明董晓玲; 关键词：眩晕舌象脑血流量

TNF-α对人牙囊细胞表达单核细胞趋化蛋白-1的影响及其信号传导通路被引量：1: 2011年; 目的研究不同浓度肿瘤坏死因子α(TNF-α)对体外培养人牙囊细胞表达单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的影响及其信号传导通路。方法取第5代人牙囊细胞,分别与浓度为0(对照组)5、1、02、55、0、100ng/ml的TNF-α共孵育6h,夹心ELISA法检测上清液中MCP-1的含量,RT-PCR法检测MCP-1 mRNA表达的变化。另取第5代人牙囊细胞,分别加入25μmol/L SB203580、50μmol/L PD98059、15μmol/L SP600125,以阻断p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MARK)、细胞外信号调节激酶(ERK)J、un氨基端激酶(JNK),培养30min后加入10ng/ml TNF-α,孵育6h后,RT-PCR检测MCP-1 mRNA含量。结果 ELISA结果显示,与对照组比较,TNF-α浓度为10～100ng/ml时,可显著增强MCP-1的分泌(P<0.05);RT-PCR结果显示,与对照组比较,TNF-α浓度为10～50ng/ml时,MCP-1表达增强,且此作用可被阻滞剂SP600125阻断。结论 TNF-α可增强MCP-1的基因表达、蛋白合成和分泌,此作用通过JNK信号转导途径实现。; 毕迎春姜明刘鹏金作林; 关键词：牙囊肿瘤坏死因子Α

施万细胞高效体外传代培养的实验研究: 2009年; 目的探讨获取大量高纯度施万细胞（SC）的体外培养纯化方法。方法取6-7 d SD乳鼠坐骨神经,立体显微镜下机械性剥除神经外膜与束膜,采用低浓度胰酶消化法和差速贴壁法去除成纤维细胞,阿糖胞苷与G enetic in联合应用进行SC纯化,牛脑垂体提取物（BPE）促进SC增殖。结果经形态学及S-100蛋白相关抗原免疫细胞化学染色鉴定证实所获得的SC状态良好,纯度较高,可达96%以上。结论本方法可以体外获取大量、高纯度的SC,为神经组织工程的研究奠定了实验基础。; 迟建光郝伟姜明王福利刘建平董青川; 关键词：施万细胞体外培养纯化

组织工程骨-软骨复合组织种子细胞的获取与培养: 2012年; 目的:探索体外培养组织工程骨-软骨复合组织种子细胞的条件,并观察其部分生物学活性。方法:采用机械-酶消化法对3周龄新西兰大白兔耳软骨和关节软骨消化来获得软骨细胞,采用全骨髓贴壁法来获得骨髓间充质干细胞,对两种细胞进行原代和传代培养,通过倒置相差显微镜观察细胞形态、绘制生长曲线、免疫组化染色等对细胞进行生物学特性分析。结果:原代培养的软骨细胞以多角形或三角形为主,传代3次以后出现去分化。形态学和免疫组化显示细胞3代以内可以保持表型稳定,具有较强的增殖及分泌细胞外基质的能力,而且耳软骨及关节软骨细胞在实验中没有表现出明显的生物学差别。采用贴壁筛选法获得的BMSCs呈长梭形或多边形,生长曲线呈"S"形,Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性,细胞生长增殖能力旺盛。结论:体外分离培养的软骨细胞和骨髓间充质干细胞符合组织工程要求,能够作为骨-软骨复合组织的种子细胞。; 刘鹏付崇健邓天政姜明李吉国于书娟朱国雄; 关键词：骨髓间充质干细胞软骨细胞种子细胞

Ⅰ型胶原凝胶包埋脂肪干细胞复合PLGA-β-TCP支架修复兔自体桡骨缺损被引量：10: 2011年; 目的采用Ⅰ型胶原凝胶悬浮包埋兔脂肪干细胞并复合PLGA-β-TCP支架修复自体桡骨缺损。方法使用Ⅰ型胶原凝胶悬浮兔脂肪干细胞并与PLGA-β-TCP复合构建脂肪干细胞一Ⅰ型胶原凝胶／PLGA-β-TCP复合体（ASCs—COL／PLGA-β-TCP）（A组），同时设立单纯细胞／PLGA-β-TCP材料复合体（ASCs／PLGA-β-TCP）（B组）、单纯Ⅰ型胶原凝胶／PLGA-β-TCP复合体（COIMPLGA-β-TCP）（C组）、单纯PLGA-β-TCP支架材料（D组）以及空白缺损（E组）作为对照，体外成骨诱导培养2周后植入桡骨1．5cm缺损部位。30只兔（60侧）采用两因素随机区组设计每只兔两侧骨缺损植入组别。分别于术后8、16、24周处死兔，取材，进行相关分析。结果术后8周，大体观察、放射学、组织学检测示A组桡骨断端连续性基本恢复。术后16周，A组骨断端连续性完全恢复，髓腔未通。术后24周，A组髓腔再通，改建塑形趋于完成，材料基本降解。自术后16～24周，A组残存材料比例低于其他3组（P〈0．05，n=4）；与A组比较，在整个观察周期内，B、C、D组均无明显成骨现象，E组保持骨缺损状态（P〈0．05，n=4）。结论通过应用Ⅰ型胶原凝胶悬浮包埋脂肪于细胞进而与PLGA-β-TCP多孔支架材料复合构建新型仿生骨组织工程复合体，可修复兔桡骨1．5cm缺损。; 郝伟姜明王新刘洪智周路纲孙煜杰胡蕴玉; 关键词：脂肪干细胞骨组织工程桡骨缺损

脂肪干细胞／Ⅰ型胶原凝胶／聚乳酸聚乙醇酸-β-磷酸三钙骨组织工程复合体的构建及其异位成骨研究被引量：8: 2008年; 目的构建基于脂肪于细胞、Ⅰ型胶原凝胶以及聚乳酸聚乙醇酸-β-磷酸三钙支架（PLGA-β-TCP）的骨组织工程复合体并对其异位成骨进行研究。方法设计构建脂肪干细胞-Ⅰ型胶原凝胶／PLGA—β—TCP复合体（A组），同时设立单纯细胞／PLGA—β—TCP材料复合体（B组）、单纯Ⅰ型胶原凝胶／PLGA-β-TCP复合体（C组）以及单纯PLGA-β-TCP支架材料（D组）作为对照。扫描电镜、相差显微镜观察细胞材料复合情况并对脂肪干细胞增殖以及成骨分化进行分析。体外成骨诱导培养2周后移植于自体股部肌袋，8周后取出，依次行放射学、组织学定性及半定量分析。结果（1）体外成骨诱导2周，A组细胞增殖率慢于B组（P〈0．05，n=4），但其细胞总数远高于后者（P〈0．01，n=4）。A组碱性磷酸酶（ALPase）活性、细胞外基质矿化程度均显著高于B组（P〈0．01，n=4）。A组细胞悬浮于Ⅰ型胶原凝胶并均匀分布于材料孔隙中而B组细胞仅见黏附于材料表面。（2）移植8周，X线片示A组高密度钙化影形成，B、C、D组未见有阳性结果。A组材料孔隙中均匀充满新生骨组织，可观察到骨小梁样结构。B组仅在少数孔隙中有类骨组织形成，同时伴有结缔组织长入。A组新生骨面积百分比显著高于B组（P〈0．01，n=4）。结论通过应用Ⅰ型胶原凝胶来实现脂肪干细胞与PLGA-β-TCP多孔支架材料的均匀复合，能够有效促进脂肪干细胞在材料孔隙中的成骨分化及均质骨组织形成。; 郝伟姜明钱淑琴何帆孟庆溪张云昌赵廷宝胡蕴玉; 关键词：脂肪干细胞

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姜明

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