周财源
- 作品数：6 被引量：12H指数：2
- 供职机构：东北农业大学动物科学技术学院动物营养研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鹅β-防御素10基因的分离、鉴定与表达被引量：2
- 2012年
- 【目的】从鹅的组织中克隆鹅β-防御素10(avianβ-defensin 10,AvBD10)基因,通过大肠杆菌进行原核表达,检测重组鹅AvBD10蛋白的生物学特性。【方法】采用RT-PCR方法,从鹅的肾脏组织中扩增鹅AvBD10基因。根据已发现的禽β-防御素和部分哺乳类动物β-防御素的氨基酸序列构建系统进化树,进行遗传进化分析;并应用荧光定量的方法对该基因的组织表达水平进行鉴定。将该基因克隆到原核表达载体pGEX-6p-1上进行原核表达,并对该重组蛋白进行纯化,测定体外生物学活性。【结果】从鹅肾脏组织中克隆出了鹅AvBD10基因,该基因的cDNA大小为207 bp,编码68个氨基酸。经遗传进化分析表明,该基因推导的氨基酸序列与鸭AvBD10的同源性最高,达92.7%。通过对重组蛋白抗菌活性的检测发现,该蛋白对12种致病性细菌均具有较强抑菌作用,但在高盐离子浓度下活性减弱。并且重组蛋白不具有溶血的特性。【结论】成功克隆并表达了鹅AvBD10基因,原核表达产物具有广谱的抗菌活性且不具有溶血特性。
- 周财源张名岳韩宗玺邵昱昊刘胜旺马得莹
- 关键词：克隆遗传进化分析抗菌活性
- 鹅β-防御素3基因的分离、鉴定及其表达产物生物学特性的分析
- 为了克隆鹅β-防御素(AvBD)3基因，并在原核表达重组鹅AvBD3蛋白，进一步研究鹅AvBD3蛋白的生物学特性，本研究利用RT-PCR方法从鹅脾脏和法氏囊组织中扩增到鹅AvBD3基因片段，其cDNA片段大小为182 b...
- 张名岳周财源韩宗玺邵昙昊刘胜旺马得莹
- 关键词：重组蛋白生物学特性
- 鹅β-防御素基因克隆与生物学特性的初步分析被引量：8
- 2011年
- 本试验采用RT-PCR方法,从鹅的骨髓细胞中扩增到禽β-防御素(AvBD)基因。测序结果表明,该基因的cDNA大小为201 bp,编码66个氨基酸。经遗传进化分析发现,该基因推导的氨基酸序列与鸡AvBD5的同源性最高,达84.8%。因此,将其命名为鹅AvBD5。进一步将该基因定向插入到pGEX-6p-1的EcoRⅠ和SalⅠ双酶切位点上,构建pGEX-AvBD 5重组表达质粒。将重组质粒转化大肠杆菌BL 21,于37℃不同时间进行诱导表达,SDS-PAGE检测外源基因的表达情况。结果表明,重组鹅AvBD 5融合蛋白的分子量约为32 ku,重组蛋白以包涵体形式存在。采用菌落计数法进行抗菌活性测定,结果表明,重组鹅AvBD 5有广谱的抗菌活性,对11种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有较强抗菌作用。此外,该蛋白对温度和pH有较高的稳定性。
- 周财源蔺利娟韩宗玺邵昱昊刘胜旺马得莹
- 关键词：重组蛋白抗菌活性
- 鹅β-防御素3基因的分离、鉴定及其表达产物的生物学特性
- 为了克隆鹅β-防御素(AvBD)3基因，并在原核表达重组鹅AvBD3蛋白，进一步研究鹅AvBD3蛋白的生物学特性，本研究利用RT-PCR方法从鹅脾脏和法氏囊组织中扩增到鹅AvBD3基因片段，其cDNA片段大小为182bp...
- 张名岳周财源韩宗玺邵昙昊刘胜旺马得莹
- 关键词：融合蛋白生物学特性抗菌活性溶血活性
- 一个新的禽β-防御素,鹅β-防御素5基因克隆与生物学特性的初步分析
- 抗菌肽是一类广泛存在于动物体内的小分子活性肽,具有广谱抗菌活性。至今为止,未见有关于抗菌肽的毒副作用、残留、致细菌耐药性等方面的报道。因此,抗菌肽在养殖业方面具有广阔的应用前景。禽抗菌肽属于β-防御素类,在禽的防御系统中...
- 周财源蔺丽娟韩宗玺邵昱昊刘胜旺马得莹
- 关键词：重组蛋白抗菌活性
- 文献传递
- 鹅β-防御素3基因的分离、鉴定及其表达产物的生物学特性被引量：4
- 2011年
- 为了克隆鹅β-防御素(AvBD)3基因,并在原核表达重组鹅AvBD3蛋白,进一步研究鹅AvBD3蛋白的生物学特性,利用RT-PCR方法从鹅脾脏和法氏囊组织中扩增到鹅AvBD3基因片段,其cDNA片段大小为182 bp,编码60个氨基酸残基。经同源性分析发现鹅AvBD3氨基酸序列与鸡AvBD3氨基酸序列同源性最高,为100%。将该基因亚克隆到原核表达载体pGEX-6p-1的BamHⅠ和SalⅠ双酶切位点上,构建重组表达质粒pGEX-goose AvBD3。将重组质粒转化大肠杆菌BL21,于37℃用IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳表明,重组鹅AvBD3蛋白在原核高效表达(分子量约31 kDa)。该重组蛋白经纯化后测定其体外抗菌活性与理化特性,结果显示,重组鹅AvBD3蛋白具有广谱的抗菌活性,对12种细菌,包括革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有抑菌作用。高盐离子浓度显著降低重组鹅AvBD3蛋白的抗菌活性。此外,该重组蛋白的溶血活性极低,并对酸碱度具有较高的稳定性。
- 张名岳周财源韩宗玺邵昙昊刘胜旺马得莹
- 关键词：生物学特性
