周蔚
- 作品数：8 被引量：31H指数：4
- 供职机构：郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Edg4基因小分子干扰RNA载体的构建及其对卵巢上皮性癌细胞的沉默效应
- 2007年
- 目的构建针对 Edg4基因的小分子干扰 RNA(siRNA)载体,初步观察其对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞的沉默效应。方法利用软件分析、设计针对人 Edg4 mRNA 的 siRNA 靶序列,合成发夹样 DNA 序列;退火成双链,克隆至真核表达载体 pRNAT-U6.1质粒上,经 PCR 技术鉴定及DNA 双向测序证实其序列无误后,用脂质体包裹并转染卵巢癌细胞系 SKOV3细胞,用荧光显微镜初步观察其在 SKOV3细胞中的转染率。采用实时荧光定量荧光定量 PCR 技术检测转染前后 SKOV3细胞中 Edg4 mRNA 的表达,生化法测定转染前后 SKOV3细胞上清液中溶血磷脂酸(LPA)含量的变化,流式细胞术检测转染后 SKOV3细胞的凋亡率。结果经 PCR 技术鉴定及 DNA 双向测序证实重组真核表达载体的序列无误,并将此命名为 pRNAT-U6.1-siEdg4。荧光显微镜下观察,转染后 SKOV3细胞内有明显绿色荧光信号,转染率为64%;实时荧光定量 PCR 技术检测显示,转染后 SKOV3细胞的Edg4 mRNA 表达水平(0.05±0.01)明显低于转染前(0.29±0.04,P<0.05);SKOV3细胞上清液中LPA 的含量,转染后明显低于转染前[分别为(3.0±1.0)、(7.5±2.2)μmol/L;P<0.05];流式细胞仪检测显示,转染后 SKOV3细胞的凋亡率明显高于转染前(分别为53.38%、0.51%;P<0.05)。结论本研究成功构建了针对人 Edg4基因的 siRNA 真核表达载体,并能较高效转染 SKOV3细胞,转染后能明显抑制 SKOV3细胞中 Edg4 mRNA 的表达,诱导卵巢癌细胞凋亡。
- 乔玉环李留霞郭瑞霞周蔚王淼张孝艳张建好赵先兰张梦真赵国强
- 关键词：卵巢肿瘤基因表达
- 卵巢上皮性肿瘤患者血浆溶血磷脂酸水平测定被引量：10
- 2007年
- 目的:探讨卵巢上皮性肿瘤患者血浆溶血磷脂酸(LPA)水平及其潜在的临床应用价值。方法:采用生化法对70例卵巢上皮性肿瘤患者(恶性50例、良性20例)、20例正常妇女进行血浆LPA水平检测,同时测定血浆肿瘤相关抗原CA125水平。结果:正常妇女和良性卵巢上皮性肿瘤患者血浆LPA分别为(1.81±0.45)μmol/L、(2.23±0.37)μmol/L,恶性卵巢上皮性肿瘤患者血浆LPA水平高于正常妇女和良性卵巢上皮性肿瘤患者(P<0.05)。血浆LPA水平对恶性卵巢上皮性肿瘤诊断的敏感性(96.0%)和特异性(87.5%)优于肿瘤相关抗原CA125。结论:恶性卵巢上皮性肿瘤患者血浆LPA水平明显升高,LPA有望成为卵巢上皮性肿瘤诊断的敏感指标。
- 李留霞张建好乔玉环王淼周蔚
- 关键词：溶血磷脂酸卵巢上皮性肿瘤CA125
- 卵巢癌的靶向基因治疗研究进展被引量：4
- 2006年
- 分子生物学和免疫学的发展为卵巢癌基因治疗研究提供了理论基础和技术方法,卵巢癌的靶向基因治疗以其准确性高、不良反应轻成为近年研究热点。载体是基因治疗的关键,载体主要包括病毒载体和非病毒载体,各有其优点及局限性。利用卵巢癌特殊启动子和潜在的候选靶向基因可提高卵巢癌基因治疗的靶向性。卵巢癌基因治疗方法包括自杀基因治疗、RNA干扰、多向耐药基因治疗、联合基因治疗等,均处于临床试验中。
- 周蔚李留霞
- 关键词：卵巢癌靶向基因治疗
- 人磷脂磷酸水解酶3基因真核表达载体的构建及其对卵巢癌细胞生长的抑制作用
- 2009年
- 目的:构建人磷脂磷酸水解酶3(hLPP3)基因的真核表达载体pLenExpress-hLPP3并转染卵巢癌细胞系SKOV3细胞,初步观察重组表达载体对卵巢癌细胞的转染效率、目的基因表达情况及对卵巢癌细胞生长的影响。方法:采用RT-PCR法从正常胎盘组织中提取hLPP3基因,先克隆入克隆载体pGEM-T easy质粒得到pGEM-T-hLPP3,再用BamHⅠ和XhoⅠ进行双酶切,切下的hLPP3基因亚克隆入真核表达载体pLenExpress,得到pLenEx-press-hLPP3重组质粒,采用脂质体转染法转染卵巢癌细胞系SKOV3细胞。实验分为3组:A组为实验组(转染表达hLPP3基因重组质粒)、B组为空质粒对照(转染空表达质粒)、C组为无转染对照。荧光显微镜观察细胞转染效率,实时荧光定量PCR法检测hLPP3 mRNA的表达,化学法测定转染前后细胞上清液中溶血磷脂酸(LPA)含量的变化,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况。结果:重组表达质粒经限制性酶切鉴定得到与hLPP3基因长度一致(936bp)的酶切产物,测序分析证实,目的基因序列与GenBank上登录的hLPP3基因(BC009196)序列完全一致。荧光显微镜下见A、B2组SKOV3细胞内有大量绿色荧光信号,转染率分别为67%和69%,C组细胞中无荧光信号。实时荧光定量PCR测定显示A组细胞中hLPP3 mRNA的相对表达量较B、C组明显增加(A、B、C组分别为0.5109±0.0584、0.1499±0.0255、0.1433±0.0181,P<0.05)。A组卵巢癌细胞上清液中的LPA含量较B、C组明显下降[A、B、C组分别为(2.37±0.76)μmol/L、(6.71±2.03)μmol/L、(6.84±1.49)μmol/L,P<0.05];流式细胞仪检测显示A组卵巢癌细胞凋亡率明显增加[A、B、C组分别为(30.50±2.12)%、(1.26±0.43)%、(0.10±0.03)%,P<0.05],细胞周期无明显变化。结论:成功构建了表达目的基因hLPP3的重组真核表达载体pLenEx-press-hLPP3,并能高效转染卵巢癌细胞系SKOV3细胞,使细胞中hLPP3基因表达水平明显升高。增强hLPP3基因表达可以降低细胞外LPA水平,诱导细
- 李留霞乔玉环王淼郭瑞霞赵国强张孝艳周蔚张建好赵先兰
- 关键词：卵巢癌细胞系真核表达载体转染
- 妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中溶血磷脂酸受体蛋白Edg4、7的表达及其意义被引量：6
- 2007年
- 目的探讨胎盘组织中溶血磷脂酸受体蛋白 Edg4、7的表达与妊娠期高血压疾病发生的关系及作用机制。方法采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法,检测20例正常晚期妊娠妇女(正常晚孕组)、20例妊娠期高血压患者(妊娠期高血压组)、20例轻度子痫前期患者(轻度子痫前期组)、30例重度子痫前期患者(重度子痫前期组)的胎盘组织中溶血磷脂酸受体蛋白Edg4与 Edg7的表达。结果 (1)表达部位:Edg4与 Edg7主要表达于胎盘绒毛滋养细胞及蜕膜细胞的细胞质和细胞膜。(2)Edg4和 Edg7在胎盘绒毛滋养细胞中的表达阳性率:正常晚孕组分别为25%和20%,妊娠期高血压组分别为60%和40%,轻度子痫前期组分别为80%和65%,重度子痫前期组分别为83.3%和86.7%。轻、重度子痫前期组阳性率明显高于正常晚孕组,两组分别比较,差异有统计学意义(P<0.05);妊娠期高血压组与正常晚孕妇组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(3)Edg4和 Edg7在胎盘蜕膜细胞中的表达阳性率:正常晚孕组分别为20%和25%,妊娠期高血压组分别为55%和50%,轻度子痫前期组分别为70%和55%,重度子痫前期组分别为83.3%和73.3%。轻度子痫前期组及重度子痫前期组阳性表达率明显高于正常晚孕组,两组分别比较,差异有统计学意义(P<0.05);妊娠期高血压组与正常晚孕组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中溶血磷脂酸受体蛋白 Edg4、7呈高表达,提示溶血磷脂酸与胎盘组织中的特异性受体 Edg4、7结合,并参与了妊娠期高血压疾病的发生。
- 李留霞周蔚乔玉环王淼张建好
- 关键词：高血压胎盘
- A型肉毒素联合透明质酸钠溶液治疗面部皱纹的临床效果被引量：5
- 2020年
- 目的探讨A型肉毒素联合透明质酸钠溶液治疗面部皱纹的临床效果。方法选取2017年12月至2019年12月在我院进行面部皮肤填充治疗的64例患者作为研究对象,按照治疗方式将其分为观察组(A型肉毒素联合透明质酸钠溶液)和对照组(A型肉毒素),各32例。比较两组的治疗效果。结果观察组各类型皱纹治疗总有效率均高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组自信心评分均提高,尊严感评分均下降,且观察组明显优于对照组(P<0.05)。两组患者并发症总发生率无显著差异(P>0.05);观察组的满意度高于对照组(P<0.05)。结论A型肉毒素联合透明质酸钠溶液用于面部皱纹治疗的临床效果显著,能有效改善患者的自信心和尊严感评分,提高治疗满意度,值得临床推广和应用。
- 季广磊张建文周蔚
- 关键词：A型肉毒素皱纹
- 卵巢上皮性肿瘤组织中溶血磷脂酸受体Edg4与Edg7蛋白的表达及其临床意义被引量：1
- 2006年
- 卵巢上皮性癌（卵巢癌）由于其组织学的复杂性,病变的隐秘性,为临床诊断和治疗增加了极大的困难.1998年,Xu等[1]发现,卵巢癌患者血浆及腹水中溶血磷脂酸（lysophosphatidic acid,LPA）水平明显升高,推测LPA在卵巢癌的发生、发展中起重要作用.而LPA主要通过其相关的G蛋白偶联受体Edg2、Edg4、Edg7起作用.本研究采用免疫组化法检测LPA受体Edg4与Edg7蛋白在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达情况,探讨其与卵巢上皮性肿瘤发生、发展的关系,为进一步了解卵巢癌的生物学行为及寻找卵巢癌新的基因治疗靶点提供理论依据.
- 李留霞王淼乔玉环张建好周蔚
- 关键词：G蛋白偶联受体卵巢上皮性癌溶血磷脂酸肿瘤组织免疫组化法检测
- 妊娠期高血压疾病患者血浆溶血磷脂酸水平的测定及其意义被引量：9
- 2007年
- 妊娠期高血压疾病是影响妊娠预后最常见的妊娠期特有疾病，直接威胁母儿的生命安全，其病因及病理机制尚不清楚，目前多认为其发病可能与血管内皮细胞损伤、自身免疫、凝血及纤溶系统失调等有关。溶血磷脂酸（lysophosphatidic acid，LPA）是一种细胞间磷脂类信号分子，通过G蛋白耦联受体发挥广泛而多样的生物学功能。近年来研究发现，妊娠期高血压疾病患者血液中的LPA可以来源于活化的血小板，而血小板的活化聚集则促使血栓形成，因此，LPA在缺血性脑卒中的诊断及中风预警中有重要价值。本研究通过对妊娠期高血压疾病患者血浆IJPA水平的检测，以探讨LPA与妊娠期高血压疾病的发生、发展及预后的关系。
- 李留霞张建好王淼周蔚乔玉环
- 关键词：妊娠期高血压疾病血浆溶血磷脂酸疾病患者血管内皮细胞损伤妊娠预后
