周松华
- 作品数:20 被引量:76H指数:7
- 供职机构:中南大学湘雅医学院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家科技重大专项湖南省重点学科建设项目更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学生物学文化科学更多>>
- 日本血吸虫天然抗原分子的柱层析分离纯化与鉴定被引量:5
- 2005年
- 目的分离纯化日本血吸虫成虫(AWA)和未成熟虫卵(SIEA)可溶性抗原中的单一蛋白,为血吸虫病免疫诊断、预防提供新的抗原分子。方法柱层析分离纯化成虫和未成熟虫卵可溶性抗原,SDS-PAGE及银染色进行分析鉴定。结果得到了三种不同大小血吸虫分子抗原AWA18000u,SIEA42000u,SIEA130000u。结论实验证明柱层析法是一种快速分离纯化血吸虫单一组分抗原简单而有效的方法。
- 彭先楚汪世平周松华姜孝新吕志跃徐绍锐肖小芹曾少华余俊龙戴橄李文凯吴仕筠
- 关键词:日本血吸虫抗原分子可溶性抗原未成熟虫卵组分抗原银染色
- 多价复合疫苗免疫猪血清与SIEA免疫特性的初步分析
- 血吸虫病疫苗研究一直是当前血防科研的重点内容之一。业已证明来源于血吸虫不同阶段抗原如Sm28,Sj26,97kDa,155kDa,GP68,GP38等,免疫动物均可产生不同程度的保护效果。本研究采用抗日本血吸虫病天然分子...
- 刘雪琴汪世平徐绍锐周帅峰何卓周松华彭先楚肖小芹曾少华车宏丽
- 文献传递
- 抗日本血吸虫病天然分子疫苗免疫猪血清筛选日本血吸虫尾蚴cDNA文库结果分析被引量:4
- 2006年
- 目的通过天然分子疫苗免疫猪血清作为探针筛选日本血吸虫尾蚴cDNA文库,应用表达序列标签获得日本血吸虫新基因。方法制备天然分子免疫猪血清,将筛选的尾蚴cDNA文库中大肠杆菌XL1-Blue侵入大肠杆菌BM25.8后环化成质粒,筛选出已转入质粒的菌株。提取质粒DNA,进行测序,得到一个表达序列标签(EST)。通过NCBI网站的BLASTx及BLASTn公共数据库,编辑分析EST序列并进行同源性比较。结果从26个克隆样品中筛选出8个阳性克隆,其中有一个新基因(GenBank登录号DQ097517),该基因全长861bp,有完整的阅读框架,与蜜蜂(Apismellifera)SMC3蛋白编码的mRNA基因序列同源性最高。结论疫苗免疫猪血清可作为筛选日本血吸虫新基因的有效探针,新发现1个日本血吸虫相关基因。
- 曾少华吕志跃汪世平张加祥陈晓光周松华刘雪琴李文凯姜孝新肖小芹徐绍锐彭先楚
- 关键词:日本血吸虫表达序列标签
- 一种简便、快速分离日本血吸虫卵的方法
- 众所周知,血吸虫卵在造成血吸虫病的传播流行方面起着重要的关键作用,是传播日本血吸虫病的唯一因子。血吸虫病防制工作的重点归根到底是如何控制虫卵传染源的问题,有效控制传染源,才能从源头上治理血吸虫病,这是治本之策。无论是控制...
- 周松华汪世平刘心利郭圆圆李庆华李林李乐彭先楚戴橄姚孟辉
- 文献传递
- 日本血吸虫SJCWL06基因编码蛋白结构与功能的生物信息分析被引量:7
- 2006年
- 目的分析和预测日本血吸虫SJCWL06基因编码蛋白的结构与功能。方法利用国际互联网中生物信息网站如美国国家生物技术信息中心(NCBI)等的相关信息,分析与预测该编码蛋白一、二、三级结构与功能。结果该基因长861bp,有一个完整的327bp的开放读框,编码109个氨基酸,其编码蛋白有一个信号肽,多个磷酸化位点和一个ABC-三磷酸腺苷酶的结构域,与蜜蜂(Apis mel-lifera)SMC3编码的mRNA基因序列同源性最高(84%)。结论SJCWL06基因编码蛋白具有进一步研究的潜在价值。
- 曾少华汪世平张加祥吕志跃周松华刘雪琴徐绍锐姜孝新彭先楚李文凯
- 关键词:日本血吸虫生物信息学基因
- 日本血吸虫琥珀酸脱氢酶铁硫蛋白全长cDNA的克隆、表达及保护性免疫评价被引量:1
- 2007年
- 根据GenBank日本血吸虫(Schistosoma japonicum)琥珀酸脱氢酶铁硫蛋白(SjSDISP)不完整的表达序列标签(BU804141)以及日本血吸虫成虫cDNA文库载体多克隆位点邻近核苷酸序列设计引物,以日本血吸虫成虫cDNA文库为模板,采用锚式PCR策略,对SjSDISP cDNA不完整的3′端和5′端进行扩增、测序,用序列比对拼接电子软件比对,基于重叠区进序列合并,获得1071bp的SjSDISP全长cDNA.序列分析推断该片段含有编码SjSDISP基因的完整阅读框,编码278个氨基酸残基.将其编码基因克隆到原核表达载体pQE30上,在大肠杆菌M15中获得准确、高效表达,表达产物分子量约为32kD.用日本血吸虫成虫抗原免疫血清对表达产物进行Western blot检测,在预测位置上出现明显的识别条带.用纯化的重组蛋白rSjSDISP免疫小鼠,进行动物免疫保护性评价,在虫荷、每克肝卵、每克粪卵和每雌子宫内卵数方面,与佐剂对照组比较差异均具有显著性(P<0.05,P<0.01).结果表明,日本血吸虫琥珀酸脱氢酶铁硫蛋白酶(SjSDISP)全长cDNA成功克隆并在大肠菌中得到表达;表达产物具有良好的抗原性和动物免疫保护效果,是一种潜在的具有部分免疫保护性的抗日本血吸虫病疫苗候选分子.
- 余俊龙汪世平李文凯戴橄徐绍锐何卓彭先楚周松华刘雪琴
- 关键词:日本血吸虫基因克隆基因表达免疫保护
- 日本血吸虫成虫38kDa天然分子抗原的分离纯化与免疫保护性的研究被引量:3
- 2005年
- 目的研究日本血吸虫成虫可溶性抗原38kDa(SjAWA38kDa)的动物保护作用,并对SjAWA38kDa作为抗日本血吸虫病分子疫苗的可行性进行评估。方法用SDS-PAGE电泳、切胶、电洗脱、超滤等方法分离纯化SjAWA38kDa,继而用SjAWA38kDa免疫昆明小鼠,然后进行尾蚴攻击感染(40尾/只),进行减虫率和减卵率研究。结果SjAWA 38kDa天然蛋白质分子能刺激机体产生抗日本血吸虫的作用,其减虫率为33.8%,减卵率为51.7%,有统计学意义(P<0.05)。结论SjAWA 38kDa分子抗原具有刺激机体产生抗日本血吸虫病的免疫保护作用,可以作为抗日本血吸虫病分子疫苗研究的靶标。
- 姜孝新汪世平肖小芹曾少华周松华刘雪琴吕志跃徐绍锐彭先楚何卓
- 关键词:日本血吸虫抗原纯化
- 人体蠕形螨人群感染现场流行病学的调查与分析(英文)被引量:3
- 2006年
- 目的了解人群感染蠕形螨情况和流行规律及居住环境中物品污染情况,为科学防治提供依据。方法应用挤压刮拭法和透明胶纸粘贴法检验人体皮肤;采用透明胶纸法检验物器具。结果调查发现在校中学生感染率为48.05%,连续4次检查男、女人群感染率差异无显著性;蠕形螨人群感染随年龄增加而增多,对154名在校生的观察,人体蠕形螨感染具有家庭聚集性;宾馆房间物品检测,面巾和面巾挂杆污染率分别为0.07%和0.03%。结论蠕形螨人群感染具有家庭聚集性,外界物品可作为传播载体,防治人体蠕形螨应包括感染者和与感染者共同生活人群的治疗,对感染者居住环境中的物品应采取消杀等措施进行处理。
- 曾少华汪世平李文凯周松华刘雪琴张加祥肖小芹徐绍锐姜孝新彭先楚
- 关键词:蠕形螨污染
- 日本血吸虫中国大陆株琥珀酸脱氢酶铁硫蛋白的克隆与表达被引量:2
- 2006年
- 目的:克隆日本血吸虫琥珀酸脱氢酶铁硫蛋白(SjSDISP)全长编码基因,并对所获基因在大肠杆菌中进行表达。方法:根据基因库中SjSDISP对应的EST(BU804141)以及日本血吸虫成虫cDNA文库载体λgt11多克隆位点邻近核苷酸序列设计引物,以日本血吸虫成虫cDNA文库为模板,采用锚式PCR对SjSDISP基因不完整的3′端和5′端进行扩增、测序,用电子软件拼接成全长cDNA,将其克隆到表达载体pGEX-4T-1上,经琼脂糖凝胶电泳、限制性内切酶消化、PCR和测序鉴定后,选择阳性克隆进行表达及Western印迹分析。结果:获得1071bp全长cDNA,其理论推导为编码278个氨基酸残基的蛋白质。SjSDISP基因在大肠杆菌BL21中获得良好表达。该融合表达产物相对分子质量约为56kD,且能被日本血吸虫成虫抗原免疫血清特异识别。结论:编码日本血吸虫琥珀酸脱氢酶铁硫蛋白全长cDNA克隆及其在大肠杆菌中的表达获得成功。
- 余俊龙汪世平何卓戴橄姜孝新曾少华肖晓芹周松华李文凯徐绍锐吕志跃彭先楚
- 关键词:日本血吸虫基因克隆基因表达
- DNA片断专利给基础研究带来的影响与对策被引量:1
- 2007年
- 简要介绍了包括EST、SNP在内的DNA片段的技术背景,回顾了此类研究工具的专利保护给生物医药研究带来的冲击,在此基础上进一步讨论了授予研究工具专利权对此后的基础研究所产生的影响,认为:若对此类研究工具授予专利将会在很大程度上阻碍生物医药技术的进步,并提出相关的解决对策。
- 周松华汪世平
- 关键词:DNA片断可专利性