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携EGFP基因的逆转录病毒包装细胞的分选和滴度测定被引量：7: 2005年; 目的探讨利用荧光激活细胞分选技术获得有效重组逆转录病毒包装细胞系的方法。方法用脂质体介导pLEGFP转染PA317细胞,用荧光显微镜观察转染结果;依据EGFP荧光利用流式细胞仪的分选技术获得多克隆和单克隆源性的包装细胞,并利用PCR、RT-PCR对其鉴定;以NIH3T3为靶细胞,对其滴度进行测定。结果荧光显微镜显示用脂质体介导的方法成功的转染PA317细胞,在4次连续流式细胞仪分选后得到了稳定表达的多克隆和单克隆源性的包装细胞。PCR和RT-PCR分别从多克隆和单克隆源性的包装细胞细胞基因组DNA以及多克隆和部分(6/8)单克隆源性的包装细胞培养上清中的重组逆转录病毒RNA中扩增出了插入的EGFP片段。滴度测定显示得到的包装细胞能够产生有效的病毒滴度。结论荧光激活细胞分选技术是获得有效病毒滴度的包装细胞的有效方法。; 张银刚郭雄周京军鱼兵刘兵; 关键词：EGFP 重组逆转录病毒载体基因转染

钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ抑制剂KN-93加重大鼠离体心脏钙超载损伤被引量：8: 2016年; 目的观察钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)抑制剂KN-93对大鼠离体心脏钙超载损伤的影响。方法采用Langendorff装置进行离体心脏灌流,利用钙反常现象诱发胞内钙超载。32只SD♂大鼠随机分为正常对照组、药物KN-93对照组、钙反常组和KN-93处理组。实验全程记录左心室内压的变化,以左心室舒张末压(LVEDP)和发展压(LVDP)评价心功能,于不同时间点收集冠脉流出液,并测定乳酸脱氢酶(LDH)的含量。实验结束后,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色检测心肌梗死面积的变化。结果与正常对照组相比,KN-93(2.5μmol·L^(-1))对正常心脏的左室功能、冠脉流量和心肌梗死面积没有明显影响(P>0.05);与正常对照组相比,钙反常组在复钙灌注结束时LVEDP抬升、LVDP降低,梗死面积达(18±7.2)%,冠脉流量减少,LDH含量增加(P<0.01);KN-93(2.5μmol·L^(-1))处理组与钙反常组相比,心肌梗死面积为(90±4.8)%,LVEDP进一步升高,LVDP消失,冠脉流量明显减少,LDH含量明显增多(P<0.01)。结论 CaMKⅡ抑制剂KN-93加重急性钙超载引起的心肌损伤,这一作用可能与影响CaMKⅡ活性有关。; 孔令恒顾晓明南瑛张建英孙娜朱娟霞周京军; 关键词：钙超载 KN-93 钙离子心脏心肌损伤

钙蛋白酶10的分子生物学特性及其与糖代谢关系的研究进展: 2013年; 钙蛋白酶10基因存在多种形式的单核苷酸多态性,是2型糖尿病发生发展过程中的危险因素。蛋白质研究发现,钙蛋白酶10属于非溶酶体类半胱氨酸蛋白酶,但结构中缺少经典钙蛋白酶所具有的EF手性结构域。新近研究表明,钙蛋白酶10广泛分布于胰岛、骨骼肌、肝脏等多种组织,在胰岛素分泌、骨骼肌等组织糖摄取、以及线粒体呼吸等生命过程中发挥着重要作用。; 周善洛武峰周京军高峰; 关键词：钙钙蛋白酶糖尿病糖代谢

从多环节提高机能学综合实验的教学质量被引量：6: 2005年; 机能学综合实验是一门跨生理学、药理学和病理生理学等多个学科的基础医学综合课程.由于其周期长、内容多,因此,有必要从多个环节入手提高教学质量:理论课阶段,指导学生做好文献检索与综述;规定实验阶段,指导学生熟练掌握相关的实验技术;探索性实验阶段,注重提高学生的综合素质.并且要求教师提高认识,转变观念,提高业务能力.; 于军刘利兵刘芳娥陈健康陈宝莹周京军; 关键词：机能学教学质量

CFTR氯离子通道细胞膜外段形成孔道的碱性氨基酸残基鉴定: ＜正＞研究发现,位于第一跨膜片断的侧链为正电荷的95位赖氨酸残基,和位于第五跨膜片断的303位精氨酸残基参与了CFTR氯离子通道细胞膜内段孔道的形成;而位于第六跨膜片断的334位精氨酸残基参与了细胞膜外段孔道的形成。它们...; 周京军Paul Linsdell; 文献传递

吗啡对家兔心室肌细胞电生理的影响: ＜正＞内源性阿片肽以及外源性阿片肽类物质如吗啡等都参与对心血管系统的调节作用。已经发现吗啡可直接作用于心肌细胞,增强心肌细胞对缺血性损伤的耐受性。但吗啡对心肌细胞的电生理影响仍不太明了。本研究采用全细胞膜片钳技术观察吗...; 周京军王冠英朱运龙李贵荣黄德明; 文献传递

17β-雌二醇对CNE2细胞κ阿片受体表达的抑制作用: 本研究采用半定量RT-PCR和Western blot方法,17β-雌二醇作用24-72 h后检测CNE2 细胞κOR mRNA含量和蛋白表达的变化,观察雌激素对κ阿片肽受体(kappa opioid receptor,...; 韦耿泽朱运龙胡玉珍周京军; 文献传递

代谢抑制处理后大鼠心室肌细胞反向Na^+/Ca^(2+)交换体转运功能的变化被引量：3: 2005年; 目的:利用荧光标记法观察代谢抑制处理后,大鼠心肌细胞反向Na+/Ca2+交换体(NCX)转运功能的变化。方法:酶解法分离制备钙耐受心肌细胞用Fura-2/AM负载,采用双激发荧光光电倍增系统(IonOptix Photom etry Sys-tem)检测钙信号。结果:细胞置于无Na+液后,可见[Ca2+]i逐渐升高,L-型Ca2+通道阻断剂n ifed ip ine在浓度为1μmol/L时,不影响此现象;而NCX的抑制剂N i2+,在浓度为1 mmol/L时,则完全阻断[Ca2+]i的升高。采用20mmol/L乳酸加10 mmol/L脱氧葡萄糖作为代谢抑制物处理心肌细胞不同时间,正常Tyrode液灌流10 m in,之后检测无Na+液引发[Ca2+]i升高效应的变化,发现5 m in处理与对照组无显著性差异,10和30 m in处理后此效应逐渐减弱。结论:首次发现,代谢抑制处理后心肌NCX的反向转运功能被抑制,阐明其调节机制,将为心肌缺血/再灌注损伤的治疗提供新思路。; 王波李树壮韦耿泽金振晓胡玉珍周京军张海锋何炜第四军医大学药学系化学教研室; 关键词：心肌细胞代谢抑制

腺苷增强冷血心肌保护液在瓣膜置换患者术中初步应用被引量：4: 2006年; 目的观察腺苷增强的冷血高钾心肌保护液应用于风湿性心脏病瓣膜置换患者的安全性、耐受性和有效性。方法随机采集2005年3月10日到2005年5月19日收入我院心脏外科行二尖瓣置换，或者二尖瓣、主动脉瓣联合置换手术的患者共74例。心肌保护液采用冷血高钾保护液，晶体：血液比例为1：4，K^＋浓度为16mmol／L，首次灌注腺苷剂量为0（对照组），0．1，0．5，1．0，2．0mmol／L。病例数分别为20、12、19、13和10例。首次灌注量为700ml，速度为300ml／min，以后每隔25～30min重复灌注1次，灌注量为350ml。只有首次灌注加用腺苷。心脏复跳后3min采集冠状静脉窦回血，检测心肌酶谱和肌钙蛋白I、T。结果各剂量组首次心肌保护液灌注前后，患者血压无明显变化。腺苷各组从心肌保护液灌注开始到心脏完全静止所用时间较对照组明显缩短，但是腺苷各组之间没有显著差异[（79±59）s vs（35±25）s，（31±18）s，（34±18）s和（28±20）s]。各组之间自动复跳比例无显著差异。升主动脉开放后到心脏复跳所用时间，虽然大剂量腺苷组（1．0mmol／L和2．0mmol／L）较对照组和小剂量腺苷组明显缩短，但是统计学检验未发现有显著差异。大剂量血管活性药物[多巴胺〉5μg／（kg·min），或者使用肾上腺素]使用的比例在各组之间未发现有显著差异。冠状静脉窦采血进行心肌酶谱分析和肌钙蛋白检测结果显示：多数指标在腺苷组特别是2．0mmol／L腺苷组较对照组有下降，除AST一项在2．0mmol／L腺苷组较对照组有显著性降低[（0．5±0．2）μkat vs（0．9±0．5）μkat]，LDH1在0．1mmol／L腺苷组较对照组有显著性降低[（0．7±0．3）μkat vs（1．1±0．4）μkat）]外，其它数据统计学分析未见明显差异。术后各组患者恢复情况：对照组、0．1、0．5和1．0mmol／L腺苷组在术后气管插管拔除时间�; 金振晓周京军辛梅陈涛顾春虎薛卫斌易定华; 关键词：心肌保护液腺苷瓣膜置换

17β-雌二醇对CNE2细胞κ阿片受体表达的抑制作用被引量：1: 2006年; 目的：观察雌激素对κ阿片肽受体（κOR）mRNA含量和蛋白表达的调节作用．方法：采用半定量RT—PCR和Western blot方法，检测17β-雌二醇作用24～72h后CNE2细胞κOR mRNA含量和蛋白表达的变化．结果：17β-雌二醇（μmol／L）作用24h后，CNE2细胞表达κOR mRNA和蛋白明显降低，mRNA和蛋白含量分别下降到对照组的（49．2±7．66）％（P〈0．01）和（60．8±8．36）％（P〈0．01）；作用时间延长到48h后，CNE2细胞κOR蛋白含量为对照组的（32．9±7．13）％（P〈0．01）；而延长到72h后，κOR mRNA和蛋白含量分别下降到对照组的（20．8±7．71）％（P〈0．01）和（29．8±8．41）％（P〈0．01）．结论：雌激素能够从转录水平抑制κOR在CNE2细胞的表达．; 韦耿泽朱运龙胡玉珍周京军; 关键词：雌二醇 CNE2细胞

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周京军

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