吴正宇
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：贵阳医学院附属医院更多>>
- 发文基金：贵州省卫生厅科研项目贵州省省长基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- TRAIL基因原核表达载体的构建、表达与抗体制备
- 2004年
- 目的:获取抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)抗体。方法:利用PCR技术和基因重组技术将TRAIL基因构建于原核表达载体pPreTMH-Tb中,经酶切、测序鉴定证实构建完全正确后,通过IPTG诱导在大肠杆菌DH-5α中获得表达,并将TRAIL蛋白免疫家兔,通过Dot blot及Western blot检测抗TRAIL抗体的产生。结果:成功构建TRAIL基因原核表达载体,并在大肠杆菌DH-5α中获得表达,TRAIL蛋白表达量占菌体蛋白质总量的11.8％,Dot blot及Western blot检测证实获得了抗TRAIL抗体。结论:成功制备抗TRAIL抗体,这为TRAIL在真核细胞水平研究奠定了实验基础。
- 方琴孙等军张旭任志娟肖芸刘丰丰吴正宇文小平王季石
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因表达大肠杆菌
- G156A六氧甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶原核表达载体的构建和表达
- 2004年
- 目的 :构建原核表达载体pPROEXHTb G15 6AMGMT ,观察突变型G15 6AMGMT在大肠杆菌中的表达情况。方法 :通过基因重组技术将G15 6AMGMT亚克隆至pPROEXHTb原核表达载体 ,在大肠杆菌DH5α中经异丙基硫代 β D半乳糖苷 (IPTG)诱导表达。 结果 :经PCR及酶切分析证实 ,成功构建了pPROEXHTb G15 6AMGMT原核表达载体 ,经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)显示重组克隆化基因pPROEXHTb G15 6AMGMT在大肠杆菌DH5α中有表达。结论 :G15 6AMGMT在大肠杆菌DH5α中有表达 ,为获取突变型MGMT工程蛋白奠定了基础。
- 肖芸王季石孙等军任志娟张维吴正宇张旭方琴
- 关键词：大肠杆菌基因表达
- 新福菌素对人白血病细胞株K562的凋亡诱导作用被引量：1
- 2004年
- 目的 研究新福菌素对人白血病细胞株K562的体外抑瘤效应及其作用机制。方法应用MTT比色法观察新福菌素对细胞的生长抑制作用;显微镜观察细胞的生长变化和结构改变;DNA凝胶电泳和流式细胞术等分析细胞凋亡和Bel-2蛋白表达情况。结果 新福菌素对人白血病细胞株K562有较强的体外增殖抑制作用。新福菌素能诱导K562细胞凋亡,同时伴随有Bel-2蛋白表达下调。结论 新福菌素对白血病细胞株K562有较强的抗瘤效应,其可能与Bel-2蛋白下调引起的细胞凋亡有关。
- 方琴孙等军王季石王培民张维张旭吴正宇刘丰丰
- 关键词：新福菌素白血病K562细胞抑瘤效应
