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绵羊痘病毒E3L基因在Vero细胞中的表达: 2014年; 为了构建组成型表达绵羊痘病毒E3蛋白的真核表达载体,并检测E3蛋白在Vero细胞中瞬时表达的情况,将绵羊痘病毒E3L基因亚克隆至pcDNA3.1(+)表达载体,构建重组质粒pcDNA3.1(+)-E3L,经酶切和测序鉴定正确后转染至Vero细胞,利用Western-blot和间接免疫荧光试验(IFA)对E3蛋白的表达水平进行鉴定。结果显示,转染后第48小时可检测到E3L基因高水平的表达。这一研究结果为进一步研究绵羊痘病毒E3蛋白的生物学功能奠定了基础。; 于少雄颜新敏赵志荀吴国华叶奕优卢昌王曼吴娜朱海霞李健张强; 关键词：绵羊痘病毒 VERO细胞真核表达

抗羊痘病毒K3L蛋白C末端的单克隆抗体及其应用: 本发明公开一株可分泌抗羊痘病毒K3L蛋白C末端的单克隆抗体的杂交瘤细胞株、其分泌的抗羊痘病毒K3L全蛋白的单克隆抗体，以及该杂交瘤细胞株和抗体的应用。本发明的可分泌抗羊痘病毒K3L蛋白C末端单克隆抗体的杂交瘤细胞株K3L...; 赵志荀张强朱学亮张志东吴国华颜新敏李健朱海霞吴娜; 文献传递

山羊痘病毒A6L基因的克隆及序列分析被引量：2: 2015年; 为了分析山羊痘病毒A6蛋白的分子特征,本试验提取了山羊痘病毒古浪分离株的基因组DNA,设计引物进行PCR扩增,克隆A6L基因的DNA序列。将PCR产物连接到pGEM-T Easy载体后转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆进行序列测定,利用生物信息学软件对A6L基因序列进行预测分析。结果显示,A6L基因序列含有1个由1 128个核苷酸组成的开放阅读框,编码375个氨基酸残基组成的多肽,蛋白质分子质量的理论值为43.68ku,理论等电点为7.50。该蛋白的二级结构中,α螺旋占53.30%,β折叠占10.24%,其余39.46%为无规则卷曲。多序列比对分析结果显示,不同羊痘病毒分离株A6L序列高度保守,同源性在97%以上。上述研究结果为进一步研究A6蛋白的生物学功能和羊痘病毒早期蛋白的分子相互作用奠定了基础。; 赵银龙吴国华朱海霞吴健颜新敏赵志荀李健吴娜穆晓峰张强; 关键词：山羊痘病毒基因克隆

山羊痘病毒ORF014蛋白的结构预测及其真核表达被引量：1: 2014年; 以山羊痘病毒古浪株基因组DNA为模板,经PCR扩增,获得山羊痘病毒ORF014基因,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(-)/Myc-His(-)B,通过脂质体法将重组质粒转入Vero细胞,Western-blot分析目的基因表达情况。使用WabLab、SWISS-MODEL和ExPASY等在线软件预测GTPV014蛋白的功能结构域和二、三级结构以及氨基酸组成,对其作为凋亡抑制蛋白的真实性、可靠性做出理论上的判断。结果显示,重组表达载体可以在Vero细胞中表达出大小约为20ku的重组融合蛋白,该蛋白具有与黏液瘤病毒M11L蛋白相似的一些结构特征。上述结果为GTPV014蛋白在山羊痘病毒感染过程中抑制凋亡的研究提供了一些理论依据。; 卢昌吴国华颜新敏赵志荀王曼吴娜朱海霞李健张强; 关键词：山羊痘病毒真核表达

山羊痘病毒A11R基因的克隆及生物信息学分析: 2016年; 为了分析绵羊痘病毒A11R蛋白质的分子特征,提取了山羊痘病毒古浪分离株(GL)的基因组DNA,设计引物进行PCR扩增,将PCR产物连接到p GEM-T Easy载体后转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆进行序列测定,利用生物信息学软件对A11R基因序列进行预测分析。结果显示,A11R基因序列由954个核苷酸组成的开放阅读框,编码317个氨基酸残基组成的多肽,蛋白质分子质量的理论值为36 091.7,理论等电点为5.14。A11R蛋白质的二级结构中,α螺旋占29.02%,β折叠占10.41%,其余60.57%为无规则卷曲。多序列比对分析显示,不同羊痘病毒分离株A11R序列高度保守,同源性在98%以上。进化树分析结果显示,GL株与NK株、TU株以及SA株在一个分支,说明它们之间具有较近的亲缘关系,上述研究结果为进一步研究A11R蛋白质的生物学功能和羊痘病毒早期蛋白质分子间相互作用奠定了基础。; 吴健朱海霞赵志荀颜新敏赵银龙吴娜李健张志东张强李影吴国华; 关键词：羊痘病毒基因克隆生物信息学

抗羊痘病毒K3L蛋白的单克隆抗体及其应用: 本发明公开一株杂交瘤细胞株K3L25，其在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC No：C2015222。本发明的杂交瘤细胞株K3L25及所分泌的单克隆抗体表现出良好的免疫原性，可在制备早期诊断试剂或早期检测羊痘病...; 赵志荀朱学亮张强张志东吴国华颜新敏李健朱海霞吴娜; 文献传递

蛋白质互作研究技术被引量：2: 2016年; 蛋白质在生物体的机制中是必不可少的,担任着生物系统内启动以及执行的任务。生物体的每一个生物过程,从遗传物质复制到细胞衰老与死亡,依赖于几种甚至几百种蛋白质之间的功能协调。蛋白质的功能,结构的改变会破坏这种平衡,导致疾病的发生,通常这种情况是由于蛋白间的相互作用引起的。目前有很多蛋白质的结构功能是未知的,所以蛋白质组学发展的也尤为迅速。论文主要综述了双向电泳、噬菌体展示技术、GST pull-down、酵母双杂交、串联亲和纯化、双分子荧光互补技术、蛋白质芯片、Far Western blot、免疫共沉淀9个蛋白质组学相关研究技术,并简单介绍了近几年这些技术在生物学中的应用。; 吴健朱海霞赵志荀颜新敏赵银龙吴娜李健张志东张强李影吴国华; 关键词：蛋白质相互作用生物信息学

痘病毒F10L基因的克隆及生物信息学分析: 2014年; 将古浪山羊痘病毒的基因组DNA提取出来,并设计引物进行PCR扩增,克隆F10L基因的DNA序列.为了分析山羊痘病毒F10蛋白的分子特征,将PCR产物连接到p GEM-T Easy载体后转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆进行序列测定,利用生物信息学软件对F10L基因序列进行预测分析.结果显示,F10L基因序列由1 335个核苷酸组成的开放阅读框,编码444个氨基酸残基组成的多肽,蛋白质分子质量的理论值53.01 ku,理论等电点为7.14.该蛋白的二级结构中,α螺旋占12.44%,β折叠占15.73%,其余71.83%为无规则卷曲.多序列比对分析显示,不同羊痘病毒分离株F10L序列高度保守,一致性在97%以上.此研究结果为进一步研究F10蛋白的生物学功能和羊痘病毒早期蛋白的分子相互作用奠定了基础.; 赵银龙吴国华吴健朱海霞颜新敏赵志荀李健吴娜张强穆晓峰; 关键词：痘病毒基因克隆生物信息学分析

抗羊痘病毒K3L蛋白的单克隆抗体及其应用: 本发明公开一株杂交瘤细胞株K3L25，其在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC No：C2015222。本发明的杂交瘤细胞株K3L25及所分泌的单克隆抗体表现出良好的免疫原性，可在制备早期诊断试剂或早期检测羊痘病...; 赵志荀朱学亮张强张志东吴国华颜新敏李健朱海霞吴娜

痘病毒入侵融合复合物的研究进展被引量：4: 2014年; 对于许多病毒而言,一种或两种蛋白就可以完成病毒与宿主细胞的结合,膜融合以及入侵等生物过程。然而,痘病毒却需要利用许多种蛋白完成这一生物过程,这可能与其能感染多种细胞有关联。已鉴定的9种入侵融合复合体蛋白和2种入侵融合复合体相关蛋白都属于非糖基化的跨膜蛋白,这些蛋白的大小在4ku^43ku之间,并且它们之间相互作用可以形成入侵融合复合体(EFC)。这些蛋白在痘病毒中都十分的保守,并且拥有一些共同的性质,这使得它们拥有相似的入侵机制。论文就已鉴定的痘苗病毒的11种入侵融合复合体蛋白的性质、结构、作用以及相互关系做了综述,另外还对可能的入侵融合复合体蛋白进行预测,为痘病毒入侵宿主的机理提供参考。; 卢昌吴国华王曼颜新敏赵志荀吴娜朱海霞李健张强; 关键词：痘病毒晚期基因

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吴娜

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