刘胜利
- 作品数：11 被引量：45H指数：5
- 供职机构：北京林业大学生物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 一种有效分离沙冬青线粒体基因组DNA的方法被引量：1
- 2018年
- 线粒体作为重要的细胞器,在植物进化适应过程中起着不可忽视的作用。抗旱耐寒常绿阔叶灌木沙冬青主要分布在我国西北荒漠地区,是第三纪孑遗植物,研究该植物线粒体基因组与长期进化适应的关系具有重要意义。然而,用常规的方法难以分离纯化获得沙冬青线粒体基因组DNA,限制了沙冬青线粒体功能基因组研究。该研究利用不连续蔗糖梯度密度离心和DNase I消化技术,成功获得了高纯度沙冬青线粒体DNA,该线粒体DNA的纯度和完整性满足建库的要求,为沙冬青线粒体基因组研究提供了技术支持,对其他植物线粒体基因组学研究也具有参考价值。
- 于婷乔崔洪玮孙丽春刘胜利陈玉珍卢存福
- 关键词：沙冬青线粒体DNA提取纯化
- 沙冬青热胁迫相关蛋白基因AmHsa32超表达提高大肠杆菌的抗热性被引量：3
- 2012年
- 热胁迫相关蛋白32(Heat stress associated protein32,Hsa32)与植物的抗逆性密切相关。本文将从沙冬青低温干旱EST库中获得的热胁迫相关蛋白基因AmHsa32进行了非生物胁迫下的表达分析与转化大肠杆菌研究。生物信息学分析表明,AmHsa32的编码区全长858bp,编码286个氨基酸,预测分子量约32kD,与拟南芥HSA32亲缘关系较近。qRT-PCR分析显示,AmHsa32在沙冬青幼苗中受热胁迫诱导后表达量迅速提高,1h后达到对照的25倍;对其他非生物胁迫如低温、干旱及盐均有响应,表达量有不同程度的增加,说明AmHsa32对沙冬青非生物胁迫抗性的提高可能发挥着重要作用。将AmHsa32基因转化大肠杆菌,同野生菌相比,热胁迫(50℃)条件下,转基因大肠杆菌存活率明显提高。本研究结果表明,AmHsa32可用于通过转基因技术提高热敏感植物抗热性的研究。
- 王艳萍刘美芹师静刘胜利陈玉珍卢存福
- 关键词：沙冬青热胁迫基因表达分析
- 沙冬青AmCSDP基因特性及转基因烟草的抗寒性分析被引量：5
- 2017年
- 冷休克结构域蛋白(CSPs)是含有不同数量冷休克结构域(cold shock domain,CSD)的低温响应蛋白,在低温胁迫中发挥重要作用。以沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)为材料,克隆得到了冷休克结构域蛋白基因AmCSDP。生物信息学分析显示AmCSDP(Gen Bank登录号:KX756575)全长540bp,编码180个氨基酸,二级结构由8.9%的α–螺旋、47.8%的β–折叠和43.3%的无规则卷曲组成,其N端含有冷休克结构域。进化分析表明沙冬青与花生同源性最高。构建了AmCSDP真核表达载体Pcambia2300-35S-AmCSDP-OCS,经农杆菌介导转入本氏烟中。对转基因T1代和野生型烟草进行4℃低温胁迫处理,结果证实转基因本氏烟比野生型的耐冷能力强。
- 王红蕾王艳萍于婷乔刘胜利陈玉珍卢存福
- 关键词：沙冬青转基因
- 3种长白山高山杜鹃叶片结构及其对环境的适应性被引量：7
- 2012年
- 依托扫描电子显微技术,研究了长白山高山珍稀濒危植物牛皮杜鹃、毛毡杜鹃及苞叶杜鹃的叶片结构,分析了其对高山环境的适应性。结果表明:3种杜鹃叶片均为异面叶,具表皮附属物。上表皮由1～2层细胞组成,有角质层,无气孔器;下表皮由1层细胞组成,有气孔器分布。栅栏组织细胞排列紧密有2～8层,海绵组织细胞间隙大,中脉维管束为圆形外韧型。此外,叶片的表皮附属物类型,气孔器特点,海绵组织细胞排列方式等差异明显。3种杜鹃植物的扫描电镜结构特征,既为种间鉴别提供了依据,也反映了其对高山环境的适应性。
- 王艳萍刘胜利陈玉珍卢存福
- 关键词：牛皮杜鹃叶片解剖结构
- 基于等温滴定微量热技术的玉米脱落酸受体检测体系被引量：1
- 2016年
- 脱落酸(ABA)是响应逆境胁迫及调控植物生长发育的重要激素,其受体的发现以及在不同植物中的比较研究具有重要的理论与实际意义。等温滴定微量热技术(ITC)是鉴定和筛选ABA受体的重要技术之一,该方法对受体蛋白的纯度和生物活性要求较高。该文探讨了超声波破碎条件对受体蛋白得率以及ABA和受体蛋白浓度对二者亲和力的影响。结果表明,通过超声波破碎获得的原核表达玉米(Zea mays)ABA受体蛋白Zm PYL1含量高,蛋白质图谱条带清晰。超声波破碎适宜的条件为:菌悬液浓度100 mg·m L–1,破碎总时长15分钟,单次破碎时长为3秒,间歇时长10秒;ITC检测结果发现,(±)-ABA与玉米受体Zm PYL1的结合反应为吸热过程,推测该受体蛋白Zm PYL1为二聚体,4 mmol·L–1(±)-ABA与0.1 mmol·L–1受体蛋白Zm PYL1反应结合效果较好,反应的解离常数Kd值为72.46μmol·L–1。研究结果为筛选和鉴定植物ABA受体奠定了重要技术基础。
- 杨瑞雪刘海洋刘胜利于婷乔陈玉珍卢存福
- 关键词：玉米
- 沙冬青AmLEA5基因的生物信息学分析及非生物胁迫下的表达模式被引量：5
- 2013年
- 对用固相扣除杂交方法从低温驯化沙冬青克隆得到的AmLEA5基因进行表达模式分析和生物信息学分析,表明该基因编码一种第5族胚胎发育晚期丰富蛋白(LEA),全长693 bp,含有1个297 bp的开放阅读框,编码98个氨基酸,预测Am-LEA5的分子量为10.6 kDa,是一种亲水性蛋白,有多个磷酸化位点。密码子偏好性分析表明该基因略偏好于用A或T结尾的密码子。系统发生分析表明,AmLEA5蛋白与蒺藜苜蓿LEA(ACJ84182.1)亲缘关系最近。qRT-PCR结果显示AmLEA5的表达量在低温、干旱、盐和热胁迫条件下均有上调,尤其在低温胁迫后期富集量最高。亚细胞定位表明,用YFP标记的AmLEA5位于细胞质和细胞核内。一系列试验结果表明AmLEA5基因在沙冬青抵御非生物胁迫,尤其是在抵御低温胁迫机制中发挥重要作用。
- 赵晓鑫刘美芹师静智冠华刘胜利张俊琦陈玉珍卢存福
- 关键词：沙冬青生物信息学分析亚细胞定位
- 沙冬青AmCIP基因结构及其内含子生物信息学分析被引量：6
- 2016年
- 旨在分析沙冬青Am CIP基因DNA序列结构特性及功能。以沙冬青Am CIP基因的c DNA序列设计引物,采用PCR扩增其DNA序列,并利用生物信息学方法分析基因的结构。序列分析表明,沙冬青Am CIP基因DNA序列长1 548 bp,包含2个外显子和1个内含子,Gen Bank登录号KU744005。在该基因的ORF内存在一个78 bp的内含子序列,同时内含子序列中含有参与厌氧诱导的类增强子元件(GC-motif)和光响应元件(TCCC-motif),3'-UTR区域含有多个参与光响应、胁迫响应和激素响应等相关的顺式作用元件,而5'-UTR区域只含有赤霉素响应元件(GARE-motif),这些元件可能对Am CIP基因转录表达起调控作用。此外,该基因具有较高的A+T碱基含量(64.7%),Am CIP的内含子不具有GT-AG规则的保守序列,即内含子5'碱基是GT,3'碱基是TG,推测Am CIP的m RNA具有独特的剪切机制。
- 雷晨刘胜利于婷乔陈玉珍卢存福
- 关键词：沙冬青外显子内含子生物信息学分析
- 喜马拉雅紫茉莉根水浸提液对五种植物的化感作用研究被引量：2
- 2015年
- 以采自西藏林芝地区的藏药植物喜马拉雅紫茉莉为试材,探讨其根部不同浓度(0.0125、0.025、0.05、0.1 g·m L-1)水浸提液对莴苣、绿豆、小麦、萝卜、油菜等5种植物的化感效应。结果表明,随着浸提液浓度的增加,受试植物的种子萌发及幼苗生长均受到不同程度的抑制,植株体内丙二醛含量持续升高,抗氧化酶活性及叶绿素含量逐渐下降,受试植物不同部位对浸提液敏感程度为地下部分>地上部分。另外,5种植物对浸提液敏感程度为莴苣>绿豆>小麦>萝卜>油菜。
- 马世尧刘胜利陈玉珍卢存福兰小中
- 关键词：化感作用种子萌发幼苗生长抗氧化酶
- 小麦和绿豆根形态及细胞结构对喜马拉雅紫茉莉根水浸提液的化感作用响应被引量：1
- 2017年
- 为了探究喜马拉雅紫茉莉(Mirabilis himalaica)根部水浸提液的化感作用,以小麦和绿豆作为供试材料进行了研究,结果表明这两种植物在经过喜马拉雅紫茉莉根部的水浸提液处理8 d后,细胞和组织形态结构受到了明显的化感抑制作用影响。利用透射电子显微镜和扫描电子显微镜分别观察和分析两种作物在水浸提液处理后的根系形态和细胞结构,结果发现小麦和绿豆的根尖结构已不完整,部分表皮细胞脱落,细胞间的空隙加大,组织间出现了断层和空腔,细胞间紧密排列的结构也被打乱,有内含物渗出;细胞膜萎缩,逐渐发生了质壁分离,细胞质中液泡变大,细胞核出现了消融现象,一些主要的细胞器如内质网、线粒体、高尔基体等结构遭受了破坏或解体,数量减少,植物生命活动受到了严重的抑制。以上结果反映了喜马拉雅紫茉莉根部的水浸提液对两种常见作物都具有较强的化感抑制作用。
- 刘胜利马世尧吴晓飞史军娜周晓阳兰小中卢存福
- 关键词：化感作用植物形态细胞结构
- 喜马拉雅紫茉莉瘦果粘液对种子低温萌发的保护被引量：9
- 2014年
- 以采自西藏林芝的喜玛拉雅紫茉莉(Mirabilis himalaica)瘦果为材料,了解瘦果结构组成、淀粉颗粒对瘦果TTC活性检测的影响,及不同吸胀时间瘦果抵抗低温胁迫的效果,以揭示瘦果分泌粘液在萌发过程中的低温保护作用。结果表明:瘦果由果皮、种皮、胚和淀粉颗粒组成,淀粉影响了TTC检测细胞活性的准确性,并发现成熟瘦果有分泌粘液的特性;瘦果发芽的适温为15℃;TTC法检测瘦果细胞活力显示,吸胀72h是研究低温胁迫对喜马拉雅紫茉莉瘦果萌发影响的较适宜时间;吸胀72h的瘦果低温胁迫处理后再进行萌发试验,-5℃和-10℃处理的瘦果在发芽进程中后期有粘液瘦果发芽率比去掉粘液瘦果的发芽率高8.3%左右。
- 卢骁兰小中杨凤娇马世尧刘胜利玉猛贺茜陈玉珍
- 关键词：瘦果粘液萌发
