刘晓宇
- 作品数：13 被引量：14H指数：2
- 供职机构：复旦大学上海医学院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 医学细胞生物学整合式实验课的课程改革被引量：1
- 2012年
- 针对八年制学生开设独立的"医学细胞生物学实验课",强调课程的整体性和系统性。该课程已经开展五年,本文就课程设计及带教过程中的体会与大家共同探讨,以期为医学细胞生物学实验课程改革提供一定的思路。
- 杨玲李锦燕郭锋刘晓宇夏蓓莉刘雯左伋
- 关键词：医学细胞生物学实验课课程改革整合式
- 促存活信号通路在Grp75抑制Bax构象改变中的作用
- 葡萄糖调节蛋白75(glucose-rcgulated proteiIl 75,Grp75)又名mortalin/PBP74/mthsp70,是HSP70家族成员之一,广泛分布于线粒体、内质网、胞浆等部位。Grp75具有...
- 杨玲刘雯刘晓宇左伋
- 关键词：PI3K/AKT
- 文献传递
- 葡萄糖调节蛋白75基因突变体及其真核表达载体构建
- 2009年
- 葡萄糖调节蛋白75(glucose-regulated protein75,Grp75)与细胞内的p53结合抑制其核移位,起到了保护细胞的作用。为研究Grp75和p53的结合与否是如何影响细胞活力,现构建Grp75缺失突变基因的真核表达载体。以SOE-PCR(genesplicing by overlap extension)法得到Grp75缺失突变基因,与pcDNA3.0真核表达载体连接,构建Grp75缺失突变的特异性表达载体pcDNA3.0/Grp75(Δ253-282),经酶切、测序鉴定Grp75缺失突变蛋白表达载体成功构建。用脂质体将pcDNA3.0/Grp75(Δ253-282)转染到PC12细胞株,以1mg/mL浓度的G418筛选出稳定株,并命名为PC12/Grp75(Δ253-282)(+)。半定量RT-PCR和Western blot结果显示PC12/Grp75(Δ253-282)(+)细胞组内Grp75的mRNA和蛋白的表达水平较PC12细胞组增高。对PC12细胞组、PC12/Grp75(Δ253-282)(+)细胞组和PC12/Grp75(+)细胞组(pcDNA3/Grp75真核表达载体已构建)分别缺糖0h、3h、9h、18h和36h,MTT法检测各组细胞活力,Hoechst33324法检测细胞凋亡情况。结果显示PC12/Grp75(+)组细胞活力高于其它两组,PC12/Grp75(Δ253-282)(+)组高于PC12组,差异有统计学意义。Hoechst33324染色后,凋亡细胞的比率与MTT细胞活力检测结果基本一致。Western blot检测三种细胞内p53的表达量,PC12/Grp75(+)细胞内p53蛋白表达量低于另外两组,可能是由于Grp75蛋白量的增多部分抑制了p53的表达,提示Grp75对缺糖诱导细胞凋亡的抑制作用部分与p53的结合有关。以上结果表明Grp75基因的缺失突变在一定程度上降低了细胞的活力。
- 郭纬纬杨玲刘晓宇刘雯左伋
- 关键词：葡萄糖调节蛋白75缺失突变真核表达载体细胞活力
- 医学遗传学整合式实验课的课程改革被引量：1
- 2012年
- 随着医学遗传学的迅速发展,理论课知识的迅速更新,实验课程无论从内容还是形式上都显示出了明显的滞后性,对医学遗传学进行深入改革势在必行。我们针对八年制学生进行了医学遗传学实验课程改革,开设独立的"医学遗传学实验课",强调课程的整体性和系统性。该课程已经开展五年,本文就课程设计及带教过程中的体会与大家共同探讨,以期为医学遗传学实验课程改革提供一定的思路。
- 杨玲李锦燕郭锋刘晓宇夏蓓莉刘雯左伋
- 关键词：医学遗传学实验课课程改革整合式
- Wnt-3 a对Connexin43及相关基因的表达调控被引量：1
- 2006年
- 目的探讨信号分子Wnt3a蛋白对缝隙连接蛋白43(connexin43)的表达调控作用,以期揭示Wnt3a与connexin43在心脏发育过程中的特定联系与作用。方法以本室自行构建pCD- NA3．1/wnt-3a真核表达载体转染大鼠心肌细胞系H9c2,在细胞水平通过RT-PCR及Western-blot实验方法研究Wnt-3a对其中Cx43表达及心脏发育相关基因的影响。结果经转染wnt-3a后,H9c2细胞系中connexin43的表达明显上调,同时与心脏发育相关的GATA4,Nkx2．5基因表达也明显上调。结论Wnt3a信号通路对connexin43表达存在影响；并可能对心脏发育存在调控作用。
- 刘晓宇李笑天刘雯夏蓓莉左伋
- 关键词：心脏发育
- Connexin 43在细胞死亡中的作用被引量：1
- 2010年
- 缝隙连接蛋白在细胞膜表面聚合形成半通道,部分两两结合构成缝隙连接通道,两者与胚胎发育、肿瘤发生及某些心脑血管疾病有关。Connexin 43(Cx43)在心肌细胞和神经细胞高表达,在多种缺血性心脑疾病及缺血再灌注损伤的病理过程中具有重要作用。近来有研究发现,Cx43也存在于线粒体和细胞核,分别参与心肌保护和细胞分化。该文以心肌细胞和神经细胞为主讨论近年来Cx43在细胞死亡中的作用的研究进展。
- 宋东莉刘晓宇刘雯左伋
- 关键词：CONNEXIN细胞死亡凋亡
- 葡萄糖调节蛋白75对缺糖诱导的凋亡相关基因Bax和NF-κB改变的影响被引量：2
- 2009年
- 目的通过已获得稳定表达葡萄糖调节蛋白（Grp75）的PC12细胞株,检测Grp75对缺糖诱导的细胞凋亡过程中Bax和NF-κB的影响。方法Grp75过表达组和对照组细胞无糖培养6h、12h2、4h和48h后,进行相关的实验。免疫印迹法检测缺糖状态下两组细胞中Grp75的表达水平和NF-κB的活性;应用半定量RT-PCR和免疫印迹法比较Bax表达水平的变化;免疫细胞化学通过构象特异性的Bax 6A7抗体检测Bax的活化。结果Bax活化和NF-κB活性的下降在缺糖诱导的PC12细胞凋亡过程中发挥了重要的作用。而Grp75通过阻止Bax的活化和NF-κB活性的下降抑制缺糖诱导的凋亡。缺糖状态下Grp75过表达组和对照组细胞中Bax表达水平均未发生改变。结论Bax活化和NF-κB活性下降与缺糖诱导的PC12细胞凋亡关系密切,Grp75通过阻止Bax的活化和维持NF-κB的活性保护PC12细胞。
- 杨玲赵明霞刘雯刘晓宇郝金玉左伋
- 关键词：葡萄糖调节蛋白75BAXNF-ΚB缺糖免疫印迹法
- 谷氨酰胺对细胞缺糖损伤的保护作用
- 2006年
- 目的观察谷氨酰胺(glutamine,Gln)对细胞缺糖(glucose desprivation,GD)损伤的保护作用,并探讨可能的作用机制。方法在以无糖培养大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞建立细胞缺糖损伤模型的基础上,首先以噻唑蓝比色(MTT)法、流式细胞法、细胞线粒体跨膜电位检测等方法观察Gln对缺糖损伤细胞模型的作用;再以大鼠大脑中动脉线栓法建立动物脑缺血模型,观察Gln对动物缺血性损伤的保护作用;同时用免疫细胞化学法、Western blot印迹法检测细胞中应激基因葡萄糖调节蛋白75(grp75)的表达变化。结果Gln能使离体细胞在缺糖应激下存活率增加、凋亡率降低,线粒体跨膜电位稳定;动物实验显示Gln能减轻动物因缺血造成的脑损伤;免疫细胞化学法、Western blot印迹法检测结果表明Gln可以上调细胞中grp75的表达。结论Gln对细胞缺糖损伤和动物缺血性脑损伤具有一定的保护作用,这种保护作用可能与上调细胞中的应激基因grp75的表达有关。
- 刘雯张艳左伋刘晓宇李锦燕
- 关键词：谷氨酰胺PC12细胞葡萄糖调节蛋白75
- 医学遗传咨询对出生缺陷干预的策略研究被引量：5
- 2011年
- 以医院产科、社区、企业等三个点,分别进行问卷调查,分析目前社会上最需要的医学遗传知识、遗传咨询核心内容、对健康生育的需求等信息。在调查基础上,开展遗传知识宣传、遗传咨询。为有关部门制定遗传咨询程序和内容提供理论和实践的依据。
- 刘晓宇陈玟君刘雯左伋
- grp75与p53在PC12细胞中的交互作用
- 探讨葡萄糖调节蛋白75(grp75)与p53蛋白在细胞中的交互作用,以揭示grp75在提高细胞对缺糖损伤耐受性作用中的分子机制。以Pc12细胞为模型,通过免疫共沉淀实验检测细胞内grp75与 p53的相互作用;构建grp...
- 刘晓宇左伋
- 关键词：GRP75P53
- 文献传递
