刘亚珍
- 作品数：5 被引量：17H指数：2
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- 免疫磁珠富集母体外周血胎儿DNA方法的研究
- 2010年
- 很多先天遗传性疾病目前尚无理想的早期诊断办法.传统的产前诊断方法如羊膜腔穿刺、绒毛膜取样、抽取脐血等取样技术,虽然有很高的准确性,但均具有创伤性,因此,探求无创性产前诊断方法具有重要临床意义.
- 赵之恭马金姝刘亚珍邱亚飞戴琎刘永茂
- 关键词：胎儿DNA母体外周血产前诊断方法羊膜腔穿刺
- 碘化钾与酚/氯仿提取外周血基因组DNA方法的比较被引量：13
- 2006年
- 目的建立碘化钾快速提取外周血基因组DNA的方法。方法采用碘化钾法和酚/氯仿提取法,直接从人外周血中提取基因组DNA,并以此为模板,进行人类生长激素(HGH)基因片段的扩增及鉴定。结果此方法提取的DNA量大,DNA体外扩增结果稳定。结论该方法较传统酚/氯仿提取基因组DNA法快速、简便、经济,可用于PCR模板DNA的制备。
- 鞠海英刘亚珍刘永茂李勇
- 关键词：碘化钾外周血
- 人β-NGF蛋白的原核表达、纯化及其生物活性被引量：2
- 2009年
- 目的在大肠杆菌中表达人神经生长因子β(β-NGF)蛋白,并进行纯化及生物活性检测。方法以人外周血基因组DNA为模板,PCR扩增人β-NGF基因片段,克隆并测序后,与表达载体pET-28a(+)连接,构建重组表达质粒pET-28a-β-NGF,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。采用分子筛层析法对表达产物进行纯化,复性后用鸡胚背根神经节培养试验检测其生物活性。结果酶切和测序证实,PCR扩增的人β-NGF基因片段为β-NGF成熟肽编码序列;重组蛋白的表达量约占菌体总蛋白的23.5%,主要以包涵体形式表达,纯化后蛋白纯度达90%以上,表达量为4.8mg/L菌液,且可明显促进鸡胚背根神经节神经突起生长。结论已在大肠杆菌中成功表达了人β-NGF蛋白,纯化后的重组蛋白具有良好的生物活性。
- 朱武飞刘亚珍赵之恭刘永茂
- 关键词：大肠杆菌纯化生物活性
- 人胶质细胞源性神经营养因子基因片段克隆及其在大肠杆菌中的表达
- 2011年
- 目的在大肠杆菌中表达具有生物活性的人胶质细胞源性神经营养因子（glial cell linederived neurotrophic factor, GDNF）蛋白。方法从人胶质瘤组织中提取总RNA，采用逆转录聚合酶链反应（reverse transcription PCR，RT—PCR）方法扩增出GDNFDNA片段，并将经双酶切后的GDNF基因片段直接与表达载体pET28a＋连接，构建重组表达载体pET28a＋GDNF，再将其转入大肠杆菌BL21中进行异丙基-β—D一硫代半乳糖苷诱导表达；采用分子筛层析法对表达产物进行纯化；用十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）对其纯度进行鉴定。结果酶切和测序证实，PCR扩增出GDNF基因片段为GDNF成熟肽编码序列；表达产物的SDS—PAGE显示，相对分子质量16000处有一新增蛋白带。结论本研究所构建的原核表达系统可表达人GDNF。
- 刘亚珍施雨露王友联刘永茂万全
- 关键词：神经生长因子类基因表达逆转录聚合酶链反应
- 止颤胶囊对帕金森模型大鼠脑内单胺氧化酶B的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨止颤胶囊对帕金森病(PD)模型大鼠脑内单胺氧化酶B(MAO-B)表达的调节作用。方法应用脑内定位注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)方法制备部分损伤PD模型;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)对PD大鼠脑内MAO-B mRNA的表达进行分析;采用生化法对脑内MAO-B活性进行测定。结果从给药后第10天开始,模型组MAO-B mRNA表达明显增加,扩增产物的量为止颤胶囊的4.728倍,远远高于止颤胶囊组和对照组;MAO-B的活性检测结果与RT-PCR分析结果一致,止颤胶囊对大鼠脑内MAO-B活性抑制率大于40%。结论止颤胶囊对PD大鼠脑内MAO-B mRNA表达和活性有下调作用,可使6-OHDA引起的脑内MAO-B mR-NA高表达得到抑制。
- 刘亚珍施雨露刘永茂万全
- 关键词：帕金森病
