刘云
- 作品数：220 被引量：453H指数：10
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金黑龙江省留学归国人员基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- 腐殖酸钠对肠产毒素性大肠杆菌K88感染小鼠肠道损伤的保护作用被引量：2
- 2022年
- 本研究旨在探究腐殖酸钠(HNa)对肠产毒素性大肠杆菌K88(ETEC K88)感染小鼠肠道损伤的保护作用。选取健康的无特定病原体(SPF)级雌性昆明小鼠30只,随机分为3组,对照组、模型组(ETEC组)、HNa干预组(ETEC+HNa组),每组10只。对照组和ETEC组小鼠每天灌胃0.2 mL生理盐水,ETEC+HNa组小鼠每天灌胃0.2 mL 5%HNa;试验第8天,ETEC和ETEC+HNa组小鼠灌胃0.2 mL 5×10^(10)CFU/mL ETEC K88。试验期10 d。采用苏木精-伊红(HE)染色法观察空肠病理变化,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清炎症因子含量,采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测肠道屏障相关蛋白的mRNA表达,采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测空肠紧密连接、黏附连接、肠道组织炎性小体和细胞凋亡相关蛋白的表达。结果表明:1)与对照组和ETEC+HNa组,ETEC组小鼠体重及空肠绒毛高度、绒毛高度/隐窝深度显著降低(P<0.05)。2)与对照组和ETEC+HNa组相比,ETEC组小鼠血液白细胞、单核细胞、粒细胞数量及血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸(D-Lac)含量显著升高(P<0.05),血清白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10)含量显著降低(P<0.05)。3)与对照组和ETEC+HNa组相比,ETEC组空肠闭合蛋白(Occludin)、封闭蛋白-1(Claudin-1)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)和黏蛋白-2(MUC-2)的mRNA相对表达量显著降低(P<0.05),空肠Claudin-1、ZO-1、E-cadherin和MUC-2的蛋白表达量也显著降低(P<0.05)。4)与对照组和ETEC+HNa组相比,ETEC组空肠核因子-κB(NF-κB)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、半胱天冬蛋白酶-1(Caspase-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)和B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)的蛋白表达量显著升高(P<0.05),空肠B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)的蛋白表达量显著降低(P<0.05)。5)与对照组相比,ETEC组粪便大肠杆菌数量显著增加(P<0.05),粪便乳酸菌数量则显著降低(P<0.05)。与
- 王栋何炎峻柳可欣邓守翔黄思琪刘云
- 关键词：肠道屏障小鼠
- 畜禽疾病智能化诊断与综合防治系统
- 王洪斌王靖飞魏清勇肖建华刘东明高利吴春艳刘云范宏刚罗继龙葛铭熊继东马海昆姜永萍杨彦涛李林吉增涛盛鹏飞冯国峰
- 该项目实现了畜禽疾病诊断与防治的智能化在国内外率先开发出“奶牛疾病诊断与防治专家系统”、“猪病诊断与防治专家系统”、“鸡病诊断与防治专家系统”等软件。。实现了畜禽疾病管理的数字化首次将数字化技术应用于畜禽场站的疾病管理，...
- 关键词：
- 关键词：畜禽疾病诊治专家系统
- 紫杉醇诱导CHMm凋亡和细胞ROS、SOD失衡的研究
- 目的：紫杉醇是一种对微管系统的作用新型天然广谱抗肿瘤药物，而其他作用机制尚不清楚。
方法：本实验用不同浓度和不同作用时间的紫杉醇处理细胞，用台盼蓝排斥实验乖，MTT法检测细胞活性，AO/BB双荧光染色荧光显微镜...
- 李华涛任晓丽张荣蓉李响李德文陈萌宋贤义刘云
- 关键词：紫杉醇CHMM
- 文献传递
- 牛嵴病毒VP3蛋白的原核表达及初步应用被引量：1
- 2012年
- 牛嵴病毒(BKV)是近几年在牛消化道中新发现的病毒,其致病性尚不清楚。我们的相关研究已表明,该病毒在我国的牛群中普遍存在。为重组表达BKV VP3蛋白,本研究采用RT-PCR方法从牛腹泻粪便样品中扩增BKV VP3蛋白的编码基因,将其克隆至pET-28a(+)载体中构建原核重组表达质粒pET-VP3。将pET-VP3转化至大肠杆菌BL21(DE3)中。经IPTG诱导表达及SDS-PAGE分析表明重组蛋白分子量约为27.8 ku,以包涵体形式存在。采用电洗脱方法纯化该重组蛋白并免疫BALB/c小鼠,制备抗BKV VP3的多克隆抗体。以纯化的重组蛋白作为包被抗原,初步建立了间接ELISA抗体检测方法。小范围调查结果显示,在检测的牛群中BKV感染率较高。
- 王茜常继涛刘云于力
- 关键词：VP3蛋白抗血清间接ELISA
- 氧氟沙星联合多西环素对牛源大肠杆菌突变选择窗的研究被引量：1
- 2016年
- 研究氧氟沙星与多西环素联用对牛源大肠杆菌耐药突变选择窗(MSW)及防突变浓度(MPC)的影响。该试验通过琼脂二倍稀释法分别测量了氧氟沙星(OFL)及多西环素(DOX)两药单用及联合用药时牛源大肠杆菌临床分离株E.coliⅠ、E.coliⅡ。试验结果测得E.coliⅠ、E.coliⅡOFL单独用药时MSW为2.95、9.74,DOX单独用药时MSW为48.43、53.64,OFL及DOX联合应用时对OFL其MPC分别缩小了4倍、6倍,与8MIC浓度DOX联用时分离株E.coliⅡMSW完全关闭。研究表明,OFL和DOX联用,可以缩小各自单独用药对牛源大肠杆菌的MSW,降低其MPC,减少耐药突变菌株产生。
- 李彦庆张震孙冬冬孙思超刘云
- 关键词：防耐药突变浓度突变选择窗氧氟沙星多西环素
- HMME-PDT对犬乳腺肿瘤细胞线粒体膜电位及Bcl-2/Bax蛋白表达的研究
- 为探讨HMME-PDT对犬乳腺肿瘤细胞线粒体膜电位及Bcl-2／Bax蛋白表达的影响。实验用HMME联合He-Ne激光作用于CHMm细胞，分别检测细胞线粒体内Ca2+浓度变化，流式细胞仪检测线粒体膜电位及通透性转运孔变化...
- 李华涛宋贤义陈萌刘云
- 关键词：光动力学疗法线粒体膜电位蛋白表达
- 紫杉醇对CHMm细胞G_2/M期的阻滞及对周期相关因子的影响被引量：2
- 2013年
- 为探讨紫杉醇对犬乳腺肿瘤细胞的周期阻滞及周期相关因子的表达影响,采用不同浓度紫杉醇以不同作用时间处理细胞,通过倒置显微镜、流式细胞仪(FCM)、SYBR染料法实时荧光定量PCR,研究细胞的形态学变化、G2/M期阻滞以及对抑癌基因p27、p53和原癌基因bcl-2表达的影响。结果显示,0.1μmol/L紫杉醇作用72h,犬乳腺肿瘤细胞(CHMm)生长状况极差,细胞大量凋亡。同时,0.1μmol/L紫杉醇作用48h,G2/M期阻滞明显,比例高达78.69%。紫杉醇对周期相关因子的影响,具有时间-剂量关系,p27、p53的表达均呈上升趋势,bcl-2的表达呈下降趋势。结果表明,紫杉醇能抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡;促使细胞G2/M期阻滞和抑制细胞有丝分裂;并有促进p27、p53表达、抑制bcl-2表达的作用。
- 李情姚微杨超卢婷张立国刘云
- 关键词：紫杉醇原癌基因
- 一例犬眼睑纤维瘤的手术治疗
- 2008年9月24日,本市犬主送1只杂种公犬就诊,4岁。主诉,该病犬于2008年6月发现左侧上眼睑出现一小肿块,随后2个多月里肿块体积迅速增大,初步诊断为纤维瘤,切除后并进行眼睑再造,现报告如下。
- 陈曦刘云
- 关键词：眼睑再造纤维瘤手术治疗
- 文献传递
- 44例犬乳腺肿瘤的病理学分析及p53和HER-2的蛋白表达被引量：1
- 2015年
- 为了对犬乳腺肿瘤分类,分析表皮生长因子受体-2(HER-2)与p53的过表达在肿瘤类型上的差异及影响,对所收集的犬乳腺肿瘤标本,进行石蜡切片、H.E.染色,划分肿瘤的病理类型,应用免疫组织化学法检测犬乳腺肿瘤中HER-2基因与p53基因的表达情况。结果 44例犬乳腺肿瘤病理组织切片中,共观察到纤维腺瘤、叶状肿瘤、导管乳头状瘤、浸润性导管癌、浸润性小叶癌(腺泡型)、小叶癌、黏液癌、髓样癌伴随淋巴细胞浸润、混合样癌9种类型;42例犬乳腺肿瘤的免疫组化结果中,HER-2在良性肿瘤中无表达,在恶性肿瘤中的表达率为38.9%,p53在犬乳腺肿瘤中的表达可达78.6%,而在恶性肿瘤中的表达率100%。结论 HER-2与p53的过表达有肿瘤类型的差异性。
- 姚薇杨超梁伟峰刘云
- 关键词：HER-2P53
- 口蹄疫病毒2C3AB基因的原核表达及ELISA方法的建立
- 2012年
- 口蹄疫病毒(FMDV)的2C蛋白中存在对自然感染和灭活疫苗免疫动物具有鉴别诊断意义的抗原表位。为建立一种敏感的血清学鉴别诊断方法,本研究截取FMDV 2C蛋白的C端B细胞表位较为富集的区域与全长3AB基因组合,经原核表达获得分子量约为44 ku的目的蛋白。Western blot分析表明,表达产物2C3AB与FMDV感染动物的阳性血清呈特异性反应。以纯化的目的蛋白作为包被抗原建立间接ELISA方法,敏感性检测表明该方法比3ABC-ELISA具有更高的敏感性;同时检测猪圆环病毒、猪繁殖和呼吸障碍综合征病毒、猪瘟病毒标准阳性血清均无交叉反应。批内和批间重复性试验显示,OD450nm值的变异系数小于9%。采用该方法检测不同背景的临床样品,并与3ABC-ELISA及进口试剂盒比较,总符合率分别为98.5%和90%。结果表明,该ELISA检测方法具有更高的敏感性和良好的特异性、重复性。
- 王幸周国辉刘云于力
- 关键词：口蹄疫病毒原核表达间接ELISA
