兰云刚
- 作品数：28 被引量：25H指数：3
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- 猪A型塞内卡病毒、猪水泡性口炎病毒二联灭活疫苗及其制备方法
- 本发明涉及一种猪A型塞内卡病毒、猪水泡性口炎病毒二联灭活疫苗及其制备方法，属于动物二联灭活疫苗技术领域。解决了现有技术中缺少有效的防治猪A型塞内卡病毒病、猪水泡性口炎病毒病两种疾病联苗的问题。本发明的猪A型塞内卡病毒、猪...
- 兰云刚姚来顺王炳量高飞曹泽昭王改丽贺文琦宋德光高丰
- 和厚朴酚在制备治疗猪血凝性脑脊髓炎病毒感染药物中的应用
- 本发明涉及一种和厚朴酚在制备治疗猪血凝性脑脊髓炎病毒感染药物中的应用，属于医药技术领域。本发明具体通过对体外猪血凝性脑脊髓炎病毒感染细胞模型和体内猪血凝性脑脊髓炎病毒感染小鼠模型试验进行研究，结果显示和厚朴酚在体内外均能...
- 兰云刚贺文琦曹泽昭陆慧君王炳量赵越王改丽宋斯伟高丰
- 一种羊传染性脓疱病毒减毒株的制备方法及其应用
- 本发明提供了一种羊传染性脓疱病毒减毒株的制备方法，通过将目标基因突变的方式制备，所述目标基因为羊传染性脓疱病毒ORF120基因。所述缺失ORF120基因的羊传染性脓疱病毒是采用基因工程手段，利用同源重组的方法从ORFV‑...
- 赵魁周艳龙关继羽吕品高丰贺文琦宋德光兰云刚李姿田静
- 文献传递
- 猪血凝性脑脊髓病毒在J774A.1细胞中的增殖特性及炎性因子表达被引量：2
- 2015年
- 为了探讨宿主巨噬细胞(J774A.1细胞)在猪血凝性脑脊髓炎病毒(Procine hemagglutinatin encephalomyelitis virus,PHEV)感染过程中的作用及其参与炎性反应的应答特征,本研究通过CPE观察、TCID50、免疫荧光(IFA)、ELISA和PT-PCR等方法,对PHEV感染J774A.1细胞的增殖特性及炎性因子IL-6、TNF-a、IL-1β等mRNA转录水平和蛋白水平的表达情况进行检测分析。IFA的检测结果显示,感染后8h后仅有少量的被荧光抗体标记细胞出现绿色荧光,随着感染时间的延长,荧光标记的细胞逐渐增加,直至感染后32~40h出现大量细胞出现荧光。TCID50结果显示,PHEV感染滴度的增值趋势与mRNA含量的变化基本一致,在感染后24~32h增殖速度最快,至32h病毒感染滴度达到最高。荧光定量RT-PCR结果显示,PHEV感染可诱导J774A.1细胞分泌的TNF-a、IL-6、IL-1βmRNA转录水平均显著升高,尤其IL-6mRNA的表达量显著增加,在48h达到对照组的25倍;TNF-αmRNA的表达量在感染后8h内增加为对照组的4倍,随后一直维持较高水平。ELISA结果显示,TNF-a、IL-6、IL-1β蛋白水平表达也显著增加。上述研究结果表明,PHEV不仅可以感染J774A.1细胞,而且能诱导其分泌多种细胞因子参与免疫应答,为进一步阐明机体重要免疫细胞在PHEV过程中的作用奠定了基础。
- 唐博张竞兰云刚潘伟田忠华贺文琦高丰
- 关键词：猪血凝性脑脊髓炎病毒实时荧光定量PCR
- 猪血凝性脑脊髓病毒刺激小鼠树突状细胞成熟及炎性因子分泌被引量：4
- 2015年
- 为了了解猪血凝性脑脊髓炎病毒(Procine hemagglutinating encephalomyelitis virus,PHEV)感染机体后对树突状细胞(Dendritic cell,DC)的激活状况,以及DC在PHEV感染过程中参与免疫应答的能力,本试验分离了BALB\c小鼠骨髓细胞,并通过条件培养基诱导培养8d,获得纯度约77.69%的DC。将PHEV接种DC后,分别对其表面成熟标志分子CD40、CD80、MHCⅡ类分子以及分泌炎症因子的能力进行检测分析。结果显示,PHEV感染DC后T细胞共刺激分子CD40、CD80及MHCⅡ均有一定程度的上调,同时DC分泌细胞因子和趋化因子的能力显著增强,尤其IL-1β的mRNA表达量增高近10倍。经荧光定量PCR方法检测病毒刺激后DC模式识别受体的表达情况结果显示,TLR4和TLR9表达量变化不明显,TLR7的表达受到抑制;但Rig-I的表达量显著增加。结果表明,PHEV在体外能有效的活化DC并促使其成熟为有效的抗原提呈细胞,具有潜在的激活T、B淋巴细胞的能力。
- 赵家宽岳慧青张竞兰云刚田忠华高丰贺文琦
- 关键词：猪血凝性脑脊髓炎病毒树突状细胞炎性因子模式识别受体
- 猪血凝性脑脊髓炎病毒感染可激活脑内的小胶质细胞被引量：3
- 2015年
- 以猪血凝性脑脊髓炎病毒(PHEV)易感的BALB/c小鼠为实验动物模型,以小胶质细胞表面特异性标记物Iba1蛋白为检测对象,利用荧光定量PCR、Western-blot、免疫组化等方法,分别从基因转录水平、蛋白水平和组织学水平对PHEV感染后不同时间点小鼠脑内小胶质细胞的增殖、活化情况进行了检测分析。结果表明,与对照组相比,试验组小鼠脑组织内的Iba1基因转录水平、蛋白表达量均有升高,且都随着感染时间延长而增大。将采集的小鼠脑组织制作石蜡切片,免疫组化结果证实PHEV的感染激活了小胶质细胞,表现为细胞数量增多,呈聚集样分布;同时细胞形态变化也很明显,胞体变大并呈阿米巴状。上述试验证实PHEV感染小鼠后小胶质细胞发生了明显增殖、活化现象,为后期深入开展PHEV所致神经系统炎性损伤的机制研究奠定了基础。
- 唐志文赵家宽张竞兰云刚高丰贺文琦靳朝
- 关键词：猪血凝性脑脊髓炎病毒小胶质细胞增殖活化
- 一起猪繁殖与呼吸综合征的诊断及病因分析
- 2011年
- 2010年10月份,吉林省长春市某猪场送检的不同年龄松辽黑猪出现不同程度的发热、呼吸困难,妊娠母猪伴发有流产甚至突然死亡等临床症状。研究首先根据猪场的发病情况、
- 李松励王丽杨占清兰云刚陈克研赵魁李子义
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病因分析松辽黑猪临床症状妊娠母猪
- PHEV感染小鼠大脑皮质mRNA和microRNA表达谱变化及其诱导细胞凋亡机制的研究
- 猪血凝性脑脊髓炎病毒(Porcine Hemagglutinating encephalomyelitis virus,PHEV)属于冠状病毒科β-冠状病毒属成员，为不分段的单股正链RNA病毒，可引起仔猪发生猪血凝性脑脊...
- 兰云刚
- 关键词：PHEVMICRORNA表达谱凋亡
- 文献传递
- 猪血凝性脑脊髓炎病毒R、S基因的RNAi研究
- PHEV主要感染1-3周龄的仔猪,临床上以呕吐、衰竭和明显的神经症状为主要特征,对养猪业尤其是SPF猪的养殖存在很大的潜在风险。因此对于该病的防治及其治病机理的研究是很有意义的。 PHE主要由冠状病毒PHEV感染引起。P...
- 兰云刚
- 关键词：RNAIPHEVS基因
- 文献传递
- 一种猪血凝性脑脊髓炎细胞培养灭活疫苗及其制备方法
- 本发明提供一种猪血凝性脑脊髓炎细胞培养灭活疫苗，包含有抗原猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV-67N)和佐剂。本发明以PK-15细胞增殖HEV-67N，优化病毒的增殖条件，提高疫苗的质量和使用效果，制备的猪血凝性脑脊髓炎细胞培...
- 陈克研高丰贺文琦陆慧君宋德光高巍赵传博李志萍兰云刚臧德跃
