侯宗柳
- 作品数：53 被引量：136H指数：6
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：云南省教育厅科学研究基金云南省自然科学基金“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 超大容量非免疫人源性Fab抗体库的构建被引量：4
- 2006年
- 目的构建超大容量非免疫人源性Fab抗体库。方法通过RT-PCR从208名不同人的外周血淋巴细胞中扩增出人IgG重链Fd段和κ、λ两轻链基因片段,将其克隆入噬粒pComb3中,构建人源性Fab段噬菌体抗体库。结果成功地构建了库容量为2.6×1012的人源性Fab段噬菌体抗体库。结论新的噬菌体抗体库对筛选不同抗原位点的抗体,提供有用的资源。
- 李晓琳侯宗柳刘建生孟明耀马进王萍
- 关键词：噬菌体抗体库
- 昆明地区2002-2004年轮状病毒肠炎患儿的病毒分子流行病学特征被引量：28
- 2006年
- 目的 研究昆明地区2002-2004年轮状病毒肠炎惠儿的病毒分子流行特征。方法 收集昆明医学院第一附属医院2002、2003、2004年9-12月儿科住院和门诊轮状病毒肠炎患儿的粪便标本计210份。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法检浸11轮状病毒基因组，用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）以及巢式．PCR（net-PCR）对5种主要的VP7的血清型（G1、G2、G3、G4和G9）进行分型，并采用RT-PCR对VP7阳性标本进行NSP4（非结构蛋白4）的基因扩增，选取30份标本用net-PCR法扩增出NSP4 CDNA 500bp送去测序。结果 210份标本中轮状病毒基因阳性143份（68．1％），其中长型143份，未发现短型和混合型。143份阳性标本行RT-PCR扩增VP7全基因，134份获得阳性产物，进一步用net-PCR分型显示G3型73例（73／134，54．5％），G1型38例（28．4％），未分型11例（8．2％），混合型8例（6％），G4型4例（3％），未发现G2和G9型。所有VP7阳性标本均可髓扩增出NSP4的全长。其中30份标本送去测序显示有变异。结论 A组轮状病毒是目前昆明地区婴幼儿腹泻的主要致病原，在不同的3年中，轮状病毒电泳型以长型为主，血清型以G3、G1型为主，G4型少见，未见G2、G9型。3年监测结果显示NSP4存在变异，但未发现轮状病毒肠炎临床症状与NSP4的变异有关。
- 甄双平黄永坤侯宗柳李海林戚勤刘建生庞伟赵亚玲
- 关键词：轮状病毒肠炎分子
- 昆明地区A组轮状病毒感染状况调查与VP7血清型分析被引量：3
- 2004年
- A组轮状病毒(HRV)是世界范围内小儿急性胃肠炎的主要病原.我们采用ELISA和PAGE方法对昆明地区HRV的分子流行特征进行了VP7血清型别研究.
- 赵亚玲黄永坤侯宗柳魏群德周丽芳
- 关键词：A组轮状病毒病毒感染
- 腹泻患儿轮状病毒VP7基因分型与临床的关系被引量：3
- 2005年
- 目的研究昆明地区2003年9～12月婴幼儿轮状病毒腹泻分子流行病学及临床特点.方法采用逆转录-聚合酶链法(RT-PCR)扩增婴幼儿腹泻大便样本中编码轮状病毒VP7蛋白的全基因片断,用巢式-聚合酶链反应(nested PCR)对扩增得到的VP7基因进行分型.结果 1.昆明地区2003年秋冬季50份标本能定型者32份(占64%).其中G3型占93.75%(30/32);混合型占6.25%(2/32),均为G1+G3型.本次分型中未见G2及G4型.2.2003年9～12月轮状病毒腹泻临床特点为病程短,脱水程度轻,腹泻次数少,电解质紊乱及酸中毒少见.结论1.2003年9～12月昆明地区轮状病毒流行株以G3型为主,与以往比较出现了流行株的转变.2.G1型感染的临床表现较G3型重.
- 黄永坤戚勤侯宗柳李海林文革生庞伟周丽芳
- 关键词：轮状病毒属
- 2种口服甲型肝炎疫苗免疫应答效果评价被引量：1
- 2006年
- 目的研究甲型肝炎减毒活疫苗和灭活疫苗口服免疫效果。方法将甲型肝炎减毒活疫苗和灭活疫苗口服免疫Balb/c小鼠,并检测免疫后抗甲型肝炎总抗体I、gA和sIgA,外周血淋巴细胞亚群,脾淋巴细胞增殖反应和细胞因子干扰素-γ(IFN-γ),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素2(IL-2)水平。结果2种疫苗口服免疫后均能诱导体液、细胞和局部免疫应答;但含铝佐剂的甲型肝炎灭活疫苗口服免疫,诱导抗体水平较低,但可诱导较好的细胞免疫应答。结论口服免疫可以作为甲型肝炎疫苗有效的免疫途径之一。
- 邵聪文侯宗柳徐冬蕾孟明耀刘建生王萍杨丽仙马进陈统球
- 关键词：甲型肝炎减毒活疫苗甲型肝炎灭活疫苗免疫应答
- 甲型肝炎灭活疫苗有效剂量的评价被引量：3
- 2005年
- 目的 评价佐剂吸附甲型肝炎成品疫苗有效免疫剂量。方法 将 4个厂家的 4批甲型肝炎灭活疫苗进行解离吸附后 ,检测比较HAV抗原含量 ;通过小白鼠体内效力实验 ,计算半数有效稀释倍数 ,比较评价各组疫苗的免疫效力。结果 体外吸附解离HAV抗原含量与体内免疫效力相偏离 ,传统概念上的半数有效剂量 (ED50 )不能用作比较评价指标。结论 体内半数有效稀释倍数可用于甲型肝炎灭活疫苗有效剂量的评价。
- 刘建生庞伟孟明耀马进杨丽仙张鸣陈统球侯宗柳
- 关键词：甲型肝炎灭活疫苗
- 甲型肝炎病毒抗原定量参比品的研制
- 2005年
- 目的制备甲型肝炎病毒抗原定量参比品.方法依据<甲型肝炎灭活疫苗制造及检定规程>制备了1批甲肝病毒抗原参比品,并进行蛋白质含量测定、HAV蛋白纯度分析和酶标抗原含量标化.结果经纯化,杂蛋白去除率达99.9%,参比品的纯度大于95%;抗原含量在20～80EU/ml范围内,抗原含量的对数与其A值呈剂量-效应关系.结论该参比品可用于甲肝病毒ELISA定性及定量标定.
- 刘建生庞伟孟明耀马进王萍杨丽仙陈统球侯宗柳
- 关键词：甲型肝炎病毒蛋白质
- 细胞因子在风湿性心脏病发生发展中的作用被引量：5
- 2006年
- 风湿性心脏病是一种常见病、多发病,在发展中国家是危害人们健康的主要的疾病之一。多认为是A型溶血性链球菌感染引起的风湿热的后遗症,是一种自身免疫性疾病。自身免疫性疾病与细胞因子密切相关,细胞因子在风湿热/风湿性心脏病发生发展过程中发挥着重要的作用。对不同的促炎性和抗炎性细胞因子在风湿性心脏病的发生、发展阶段中所起的作用进行综述,有助于进一步认识其分子机制。
- 王萍侯宗柳
- 关键词：风湿性心脏病细胞因子促炎性细胞因子抗炎性细胞因子
- 轮状病毒腹泻患儿NSP4基因变异与临床关系被引量：7
- 2005年
- 目的研究腹泻患儿的轮状病毒( RV)流行株非结构蛋白 4( NSP4)的基因变异与临床的关系.方 法对昆明地区 2002年和 2003年流行期不同程度腹泻患儿中分离出的 22株轮状病毒流行株的 NSP4基因进行 RT-PCR扩增,并进行 cDNA序列分析,与来自 GenBank Database的 4株人 RV( Wa、 KUN、 AU-1、 Hochi)和 3株动物 RV( EW、 OSU、 SAll)以及我国不同地区 RV流行株 NSP4的基因变异情况进行比较.结果氨基酸同源性表明昆明地区轮状病毒流行株间的同源性高达 98.9%～ 99.4%, 22株流行株全都属于 Wa组.氨基酸进化树提示在 Wa组内又包括 3个亚组.NSP4基因变异与轮状病毒腹泻临床症状严重程度不相关( P>0.05).结论 2002年和 2003年昆明地区轮状病毒流行株皆属 Wa组,且其氨基酸序列极为保守; NSP4基因变异与轮状病毒腹泻临床症状严重程度不相关,但与流行发病的关系需继续研究.
- 戚勤侯宗柳李海林文革生庞伟周丽芳黄永坤
- 关键词：轮状病毒基因
- 不同PCR方法检测轮状病毒腹泻患儿血中RV基因被引量：3
- 2004年
- 目的 :探讨不同聚合酶链反应 (PCR)方法检测轮状病毒 (RV)腹泻患儿血中RVRNA敏感性以及病毒血症的情况。方法 :应用 2种逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)方法 ,对 30例轮状病毒腹泻患儿进行外周血血浆和单个核细胞中的RVRNA检测 ,阳性标本的PCR产物经琼脂糖电泳及测序证实。结果 :30例轮状病毒腹泻患儿 ,在外周血单个核细胞中检出RVRNA 1例 ,血浆中RVRNA检测均阴性 ,2种RT -PCR方法检测结果一致。阳性标本的PCR产物经测序结果证实属于人RVVP7片段序列 ,与G1型相似性为 94 % ,与G9型相似性为 75 %。检测出RVRNA阳性的病例有肠道外脏器损伤的表现。结论 :不同PCR方法可以检测到轮状病毒腹泻患儿血中RVRNA ,RV可能通过外周血单个核细胞向肠道外扩散 ,引起病毒血症造成肠道外脏器损伤。
- 刘丽利黄永坤魏群德侯宗柳周丽芳王明珠
- 关键词：PCR轮状病毒腹泻病毒血症聚合酶链反应
